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高迁移率蛋白-1在特应性皮炎中的作用及机制研究

摘要第4-8页
Abstract第8-12页
英文缩略语第13-18页
第一部分 :HMGB1在特应性皮炎样综合征小鼠模型中的作用第18-42页
    1 前言第18-20页
    2 材料和方法第20-30页
        2.1 主要试剂和仪器第20-22页
            2.1.1 主要试剂第20-21页
            2.1.2 主要仪器第21-22页
            2.1.3 需要配制的试剂第22页
        2.2 研究对象和分组第22页
        2.3 实验方法第22-30页
            2.3.1 建立AD样综合征动物模型第22-23页
            2.3.2 皮炎评分第23-24页
            2.3.3 ELISA法检测血清总IgE第24-25页
            2.3.4 小鼠皮肤组织切片制作第25页
            2.3.5 组织HE染色第25页
            2.3.6 组织甲苯胺蓝染色第25页
            2.3.7 组织间接免疫荧光染色第25-26页
            2.3.8 Westernblot第26-28页
            2.3.9 Real-timePCR第28-29页
            2.3.10 统计学方法第29-30页
    3 结果第30-40页
        3.1 DNCB诱导的AD样综合征小鼠模型大体表现及皮炎评分第30-31页
        3.2 皮损组织病理改变第31-33页
        3.3 血清总IgE水平改变第33-34页
        3.4 HMGB1及其受体RAGE在皮损组织中的表达第34-36页
        3.5 皮损组织中HMGB1、RAGE、NF-κB、TNF-α和IL-6蛋白的表达第36-38页
        3.6 皮损组织中TNF-αmRNA和IL-6mRNA的表达第38-40页
    4 讨论第40-41页
    5 结论第41-42页
第二部分 :HMGB1/RAGE在肥大细胞中的表达第42-56页
    6 前言第42-43页
    7 材料和方法第43-50页
        7.1 主要试剂和仪器第43-45页
            7.1.1 主要试剂第43-44页
            7.1.2 主要仪器第44-45页
            7.1.3 需要配制的试剂第45页
        7.2 实验细胞第45页
        7.3 实验方法第45-50页
            7.3.1 细胞培养第45-47页
            7.3.2 细胞甲苯胺蓝染色第47页
            7.3.3 细胞间接免疫荧光染色第47-48页
            7.3.4 流式细胞术检测FSMC表面分子FcεRI和CD117的表达第48页
            7.3.5 Westernblot检测FSMC中HMGB1、RAGE、TNF-α和IL-6蛋白的表达第48-49页
            7.3.6 统计学方法第49-50页
    8 结果第50-54页
        8.1 细胞培养第50-51页
        8.2 FSMC的鉴定第51-52页
            8.2.1 FSMC不同培养时期甲苯胺蓝染色第51页
            8.2.2 流式细胞术检测FSMC表面FcεRI和CD117的表达第51-52页
        8.3 HMGB1及其受体RAGE在肥大细胞中的表达第52-54页
            8.3.1 HMGB1及其受体RAGE在FSMC中的表达第52页
            8.3.2 HMGB1及其受体RAGE在P815细胞中的表达第52-53页
            8.3.3 FSMC中HMGB1、RAGE、TNF-α和IL-6蛋白的表达第53-54页
    9 讨论第54-55页
    10 结论第55-56页
第三部分 :HMGB1对肥大细胞活化的影响第56-80页
    11 前言第56-57页
    12 材料和方法第57-64页
        12.1 主要试剂和仪器第57-59页
        12.2 实验对象第59页
        12.3 实验方法第59-64页
            12.3.1 CCK-8法检测HMGB1和GL对P815细胞增殖的影响第59-60页
            12.3.2 细胞实验分组第60页
            12.3.3 P815细胞脱颗粒实验第60页
            12.3.4 流式细胞术检测HMGB1对P815细胞内Ca2+浓度的影响第60页
            12.3.5 流式细胞术检测HMGB1对P815细胞表面CD117表达的影响第60-61页
            12.3.6 Westernblot第61-62页
            12.3.7 Real-timePCR第62-63页
            12.3.8 募集作用检测第63页
            12.3.9 统计学方法第63-64页
    13 结果第64-77页
        13.1 HMGB1和GL对P815细胞增殖的影响第64-66页
        13.2 HMGB1对P815细胞脱颗粒的影响第66-67页
        13.3 HMGB1对P815细胞内Ca2+浓度的影响第67-69页
        13.4 HMGB1对P815细胞CD117表达的影响第69-70页
        13.5 HMGB1对P815细胞RAGE、TNF-α、IL-6和MCTryptase蛋白表达的影响第70-71页
        13.6 HMGB1对P815细胞NF-κB信号通路的影响第71-73页
        13.7 HMGB1对P815细胞HMGB1mRNA和RAGEmRNA表达的影响第73-74页
        13.8 HMGB1对小鼠腹腔肥大细胞的募集作用第74-77页
    14 讨论第77-79页
    15 结论第79-80页
本研究创新性的自我评价第80-81页
参考文献第81-89页
综述一第89-106页
    参考文献第96-106页
综述二第106-116页
    参考文献第110-116页
攻读学位期间取得的研究成果第116-117页
致谢第117-118页
个人简历第118页

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