| 中文摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 常用符号说明 | 第11-16页 |
| 前言 | 第16页 |
| 第一部分 文献综述 | 第16-24页 |
| 1 鸡蛋的形成 | 第16-18页 |
| 2 钒对蛋品质的影响 | 第18页 |
| 3 钒引起蛋清品质下降的作用机制 | 第18-24页 |
| 3.1 钒与氧化应激 | 第19-21页 |
| 3.1.1 钒引起氧化应激的产生 | 第19-20页 |
| 3.1.2 钒引起氧化应激的机制 | 第20-21页 |
| 3.2 钒与细胞凋亡 | 第21-24页 |
| 3.2.1 钒引起细胞凋亡的产生 | 第22页 |
| 3.2.2 钒引起细胞凋亡的机制 | 第22-24页 |
| 第二部分 存在的问题、本研究的目的意义及技术路线 | 第24-26页 |
| 1 存在的问题 | 第24页 |
| 2 本研究的目的 | 第24页 |
| 3 本研究的意义 | 第24-25页 |
| 4 技术路线 | 第25-26页 |
| 第三部分 试验研究 | 第26-71页 |
| 试验一: 钒诱导蛋鸡输卵管膨大部上皮细胞氧化应激模型建立 | 第26-43页 |
| 1 引言 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-31页 |
| 2.1 主要仪器和试剂 | 第27页 |
| 2.2 培养基的配制 | 第27-28页 |
| 2.3 蛋鸡输卵管膨大部上皮细胞分离、培养与鉴定 | 第28-30页 |
| 2.3.1 膨大部上皮细胞的分离及纯化 | 第28-29页 |
| 2.3.2 膨大部上皮细胞的鉴定 | 第29-30页 |
| 2.4 钒对膨大部上皮细胞氧化应激模型的建立 | 第30-31页 |
| 2.4.1 试验设计 | 第30页 |
| 2.4.2 细胞活力的测定 | 第30页 |
| 2.4.3 细胞凋亡的测定 | 第30-31页 |
| 2.4.4 细胞内ROS的测定 | 第31页 |
| 2.4.5 抗氧化酶活、MDA含量和LDH活性的测定 | 第31页 |
| 2.5 数据分析 | 第31页 |
| 3 结果 | 第31-40页 |
| 3.1 膨大部上皮细胞鉴定 | 第31-33页 |
| 3.1.1 细胞形态学鉴定 | 第31-32页 |
| 3.1.2 免疫荧光染色鉴定 | 第32-33页 |
| 3.2 不同浓度钒作用不同时间后对细胞活力的影响 | 第33-34页 |
| 3.3 不同浓度钒作用12h后细胞形态学观察 | 第34-36页 |
| 3.4 不同浓度钒作用12h后对细胞凋亡的影响 | 第36-37页 |
| 3.5 不同浓度钒作用12h后对细胞内ROS的生成量的影响 | 第37-39页 |
| 3.6 不同浓度钒作用12h对细胞中SOD、CAT活性、MDA含量以及LDH活性的影响 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 4.1 蛋鸡OEMCs原代培养 | 第40页 |
| 4.2 钒诱导OMECs氧化应激模型的建立 | 第40-42页 |
| 5 小结 | 第42-43页 |
| 试验二: MAPK介导钒引起蛋鸡输卵管膨大部上皮细胞氧化应激的可能机制 | 第43-59页 |
| 1 引言 | 第43-44页 |
| 2 材料与方法 | 第44-49页 |
| 2.1 试验设计 | 第44页 |
| 2.2 细胞OMECs分离及原代培养 | 第44页 |
| 2.3 样品的收集与指标的测定 | 第44-48页 |
| 2.3.1 细胞形态学观察 | 第44页 |
| 2.3.2 细胞活力 | 第44-45页 |
| 2.3.3 细胞ROS生成 | 第45页 |
| 2.3.4 相关酶活测定 | 第45页 |
| 2.3.5 RT-PCR相关基因表达 | 第45-46页 |
| 2.3.6 Western blot相关蛋白表达 | 第46-48页 |
| 2.4 数据处理与分析 | 第48-49页 |
| 3 结果 | 第49-56页 |
| 3.1 MAPK抑制剂对钒对细胞形态的影响 | 第49-50页 |
| 3.2 MAPK抑制剂对钒诱导细胞活力的影响 | 第50-51页 |
| 3.3 MAPK抑制剂对钒诱导ROS生成的影响 | 第51-52页 |
| 3.4 MAPK抑制剂对钒诱导相关酶活的影响 | 第52-53页 |
| 3.5 RT-PCR测定MAPK抑制剂对钒诱导的相关基因表达的影响 | 第53-54页 |
| 3.6 Western blot测定MAPK抑制剂对钒诱导蛋白表达影响 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| 5 小结 | 第58-59页 |
| 试验三: MAPK介导的钒引起蛋鸡输卵管膨大部上皮细胞凋亡的可能机制 | 第59-71页 |
| 1 引言 | 第59-60页 |
| 2 材料与方法 | 第60-62页 |
| 2.1 试验设计 | 第60页 |
| 2.2 OMECs分离及原代培养 | 第60页 |
| 2.3 样品收集与指标测定 | 第60-61页 |
| 2.3.1 细胞凋亡 | 第60页 |
| 2.3.2 细胞上清液中LDH活性 | 第60页 |
| 2.3.3 线粒体膜电位 | 第60页 |
| 2.3.4 细胞凋亡相关基因mRNA相对表达 | 第60-61页 |
| 2.4 数据处理与统计分析 | 第61-62页 |
| 3 结果 | 第62-68页 |
| 3.1 细胞凋亡 | 第62-64页 |
| 3.2 细胞上清液LDH活性 | 第64-65页 |
| 3.3 线粒体膜电位变化 | 第65-67页 |
| 3.4 相关基因mRNA相对表达 | 第67-68页 |
| 4 讨论 | 第68-70页 |
| 5 小结 | 第70-71页 |
| 第四部分 全文讨论和结论 | 第71-73页 |
| 1 全文讨论 | 第71-72页 |
| 2 结论 | 第72-73页 |
| 第五部分 有待进一步研究的问题 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读硕士学位期间发表的科研成果 | 第80页 |
| 1 发表文章 | 第80页 |
| 2 发明专利 | 第80页 |
