| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-20页 |
| 1.1 国内外研究进展 | 第12-18页 |
| 1.1.1 重金属对植物的毒害效应 | 第12-13页 |
| 1.1.1.1 重金属对膜透性的影响 | 第12页 |
| 1.1.1.2 重金属对植物光合作用和呼吸作用的影响 | 第12-13页 |
| 1.1.1.3 重金属对酶活性的影响 | 第13页 |
| 1.1.2 植物对重金属的解毒机制 | 第13-16页 |
| 1.1.2.1 抗氧化作用 | 第13-14页 |
| 1.1.2.2 区隔作用 | 第14-15页 |
| 1.1.2.3 螯合作用 | 第15-16页 |
| 1.1.3 植物修复技术 | 第16页 |
| 1.1.4 超氧化物歧化酶研究进展 | 第16-18页 |
| 1.2 研究的主要内容及技术路线 | 第18-19页 |
| 1.2.1 东南景天 Cu/Zn SOD 基因的克隆和生物信息学分析 | 第18页 |
| 1.2.2 东南景天 Cu/Zn SOD 基因的原核表达及时空表达模式分析 | 第18页 |
| 1.2.3 东南景天 Cu/Zn SOD 基因的功能分析 | 第18页 |
| 1.2.4 技术路线 | 第18-19页 |
| 1.3 研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 2 试验材料及方法 | 第20-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 菌种及载体 | 第20页 |
| 2.1.3 酶及试剂 | 第20页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.1.5 引物及测序 | 第21页 |
| 2.2 方法 | 第21-31页 |
| 2.2.1 东南景天 Cu/Zn SOD 基因克隆及分析方法 | 第21-24页 |
| 2.2.1.1 DNA 提取 | 第21-22页 |
| 2.2.1.2 cDNA 克隆和 DNA 克隆 | 第22页 |
| 2.2.1.3 琼脂糖凝胶回收 DNA | 第22-23页 |
| 2.2.1.4 连接与热激转化大肠杆菌感受态 | 第23页 |
| 2.2.1.5 Cu/Zn SOD 序列生物信息学分析 | 第23-24页 |
| 2.2.2 原核表达及时空模式分析方法 | 第24-26页 |
| 2.2.2.1 原核表达载体构建 | 第24页 |
| 2.2.2.2 重组质粒提取 | 第24页 |
| 2.2.2.3 大肠杆菌 BL21 Star（DE3）的热激转化 | 第24-25页 |
| 2.2.2.4 点板实验 | 第25页 |
| 2.2.2.5 生长反应曲线 | 第25页 |
| 2.2.2.6 东南景天 RNA 的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.2.7 第一链 cDNA 的合成 | 第26页 |
| 2.2.2.8 实时定量 PCR | 第26页 |
| 2.2.3 东南景天 Cu/Zn SOD 在拟南芥中的功能分析 | 第26-31页 |
| 2.2.3.1 植物表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.3.2 电激转化农杆菌 | 第27页 |
| 2.2.3.3 拟南芥的转化 | 第27页 |
| 2.2.3.4 Kan 抗性筛选转基因拟南芥种子 | 第27-28页 |
| 2.2.3.5 转基因拟南芥的检测 | 第28-29页 |
| 2.2.3.6 SaCu/Zn SOD 转基因拟南芥植株的耐镉分析 | 第29-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-44页 |
| 3.1 东南景天 Cu/Zn SOD 基因结构与生物信息学分析 | 第31-34页 |
| 3.1.1 铜/锌超氧化物歧化酶基因 cDNA 全长序列的获得 | 第31页 |
| 3.1.2 Cu/Zn SOD 基因组全长序列分析 | 第31-32页 |
| 3.1.3 Cu/Zn SOD 基因序列比对与进化树分析 | 第32-34页 |
| 3.2 原核表达结果 | 第34-35页 |
| 3.2.1 重组质粒构建 | 第34页 |
| 3.2.2 原核表达结果 | 第34-35页 |
| 3.3 SaCu/Zn SOD 基因的表达模式分析 | 第35-37页 |
| 3.3.1 SaCu/Zn SOD 的组织表达特性分析 | 第35-36页 |
| 3.3.2 SaCu/Zn SOD 的逆境诱导表达特性分析 | 第36-37页 |
| 3.4 转基因拟南芥的耐镉性 | 第37-44页 |
| 3.4.1 农杆菌菌液 PCR 鉴定 | 第37页 |
| 3.4.2 转基因拟南芥的筛选及鉴定 | 第37-39页 |
| 3.4.3 镉胁迫下转基因拟南芥的生理响应 | 第39-44页 |
| 4 讨论 | 第44-47页 |
| 4.1 SaCu/Zn SOD 生物信息学分析 | 第44-45页 |
| 4.2 SaCu/Zn SOD 的原核表达 | 第45页 |
| 4.3 SaCu/Zn SOD 表达模式分析 | 第45-46页 |
| 4.4 SaCu/Zn SOD 对拟南芥耐镉能力的影响 | 第46-47页 |
| 5 结论 | 第47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 硕士期间发表论文 | 第56页 |
