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Erbin在β2-AR介导 MAPK信号通路中的调控作用及生物学功能的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
缩略词表第13-14页
引言第14-16页
第一部分 Her2、β2-AR 及 Erbin 相互作用第16-32页
   ·前言第17-18页
   ·材料第18-19页
     ·实验动物第18页
     ·实验细胞第18页
     ·实验试剂第18-19页
     ·质粒及表达载体第19页
     ·主要仪器设备第19页
     ·其他常用常规试剂参考《分子克隆实验指南》配制第19页
   ·方法第19-22页
     ·在 293T 细胞中同时过表达β2-AR 及 Her2第19-20页
     ·Wistar 大鼠心肌组织及脑组织蛋白的提取第20页
     ·细胞内蛋白免疫共沉淀第20-21页
     ·免疫印迹(Western blot)检测第21页
     ·在大鼠心肌细胞 H9c2 内敲低 Erbin 蛋白的表达第21页
     ·BCA 蛋白定量第21-22页
     ·免疫荧光第22页
     ·浆膜分离第22页
   ·结果第22-29页
     ·大鼠心肌和脑组织中存在 Erbin、β2-AR 及 Her2 相互作用第23页
     ·Erbin 可在 293T 细胞中介导外源性 Her2 与β2-AR 相互作用第23-24页
     ·Erbin 在儿茶酚胺刺激下被招募至细胞膜第24-25页
     ·在 H9C2 细胞内存在内源性 Erbin、β2-AR 及 Her2 相互作用第25-26页
     ·敲低 Erbin 表达可阻断β2-AR 与 Her2 相互作用第26页
     ·Erbin 突变体的构建及真核表达第26-27页
     ·Erbin 通过其 PDZ 结构域介导β2-AR 及 Her2 相互作用第27-29页
   ·讨论第29-30页
 参考文献第30-32页
第二部分 Erbin 在β2-AR 介导的 MAPK 信号通路中的调控作用及生物学功能的研究第32-44页
   ·前言第33页
   ·材料第33-35页
     ·实验动物第33-34页
     ·细胞系第34页
     ·试剂第34页
     ·质粒及表达载体第34页
     ·主要仪器设备第34-35页
     ·其他常用常规试剂参考《分子克隆实验指南》配制第35页
   ·方法第35-37页
     ·免疫印迹(Western blot)第35页
     ·在 COS7 细胞中转染第35-36页
     ·在大鼠心肌细胞 H9c2 内,敲低 Erbin 蛋白的表达第36页
     ·大鼠原代心肌细胞的分离与培养第36-37页
     ·腺病毒转染第37页
   ·结果第37-40页
     ·Erbin 在β2-AR 激动剂诱导的 ERK 活化中的调控作用第37-38页
     ·敲低 Erbin 表达可增强 ISO 慢性刺激诱导的细胞凋亡第38-39页
     ·敲低 Erbin 表达可降低大鼠原代心肌细胞在静息状态下及 ISO 慢性刺激下的搏动频率第39-40页
   ·讨论第40-42页
 参考文献第42-44页
文献综述第44-52页
 1 背景第44-45页
 2 Erbin 在 MAPK 信号通路中的负调控作用第45-46页
 3 Erbin 在 TGF-β信号通路中的负调控作用第46-47页
 4 Erbin 在核因子 NF -κB (NF-κB)信号通路中的调控作用第47-48页
 5 展望第48页
 参考文献第48-52页
致谢第52-54页
攻读学位期间发表的学术论文目录第54-55页

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