摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-13页 |
缩略词表 | 第13-14页 |
引言 | 第14-16页 |
第一部分 Her2、β2-AR 及 Erbin 相互作用 | 第16-32页 |
·前言 | 第17-18页 |
·材料 | 第18-19页 |
·实验动物 | 第18页 |
·实验细胞 | 第18页 |
·实验试剂 | 第18-19页 |
·质粒及表达载体 | 第19页 |
·主要仪器设备 | 第19页 |
·其他常用常规试剂参考《分子克隆实验指南》配制 | 第19页 |
·方法 | 第19-22页 |
·在 293T 细胞中同时过表达β2-AR 及 Her2 | 第19-20页 |
·Wistar 大鼠心肌组织及脑组织蛋白的提取 | 第20页 |
·细胞内蛋白免疫共沉淀 | 第20-21页 |
·免疫印迹(Western blot)检测 | 第21页 |
·在大鼠心肌细胞 H9c2 内敲低 Erbin 蛋白的表达 | 第21页 |
·BCA 蛋白定量 | 第21-22页 |
·免疫荧光 | 第22页 |
·浆膜分离 | 第22页 |
·结果 | 第22-29页 |
·大鼠心肌和脑组织中存在 Erbin、β2-AR 及 Her2 相互作用 | 第23页 |
·Erbin 可在 293T 细胞中介导外源性 Her2 与β2-AR 相互作用 | 第23-24页 |
·Erbin 在儿茶酚胺刺激下被招募至细胞膜 | 第24-25页 |
·在 H9C2 细胞内存在内源性 Erbin、β2-AR 及 Her2 相互作用 | 第25-26页 |
·敲低 Erbin 表达可阻断β2-AR 与 Her2 相互作用 | 第26页 |
·Erbin 突变体的构建及真核表达 | 第26-27页 |
·Erbin 通过其 PDZ 结构域介导β2-AR 及 Her2 相互作用 | 第27-29页 |
·讨论 | 第29-30页 |
参考文献 | 第30-32页 |
第二部分 Erbin 在β2-AR 介导的 MAPK 信号通路中的调控作用及生物学功能的研究 | 第32-44页 |
·前言 | 第33页 |
·材料 | 第33-35页 |
·实验动物 | 第33-34页 |
·细胞系 | 第34页 |
·试剂 | 第34页 |
·质粒及表达载体 | 第34页 |
·主要仪器设备 | 第34-35页 |
·其他常用常规试剂参考《分子克隆实验指南》配制 | 第35页 |
·方法 | 第35-37页 |
·免疫印迹(Western blot) | 第35页 |
·在 COS7 细胞中转染 | 第35-36页 |
·在大鼠心肌细胞 H9c2 内,敲低 Erbin 蛋白的表达 | 第36页 |
·大鼠原代心肌细胞的分离与培养 | 第36-37页 |
·腺病毒转染 | 第37页 |
·结果 | 第37-40页 |
·Erbin 在β2-AR 激动剂诱导的 ERK 活化中的调控作用 | 第37-38页 |
·敲低 Erbin 表达可增强 ISO 慢性刺激诱导的细胞凋亡 | 第38-39页 |
·敲低 Erbin 表达可降低大鼠原代心肌细胞在静息状态下及 ISO 慢性刺激下的搏动频率 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
参考文献 | 第42-44页 |
文献综述 | 第44-52页 |
1 背景 | 第44-45页 |
2 Erbin 在 MAPK 信号通路中的负调控作用 | 第45-46页 |
3 Erbin 在 TGF-β信号通路中的负调控作用 | 第46-47页 |
4 Erbin 在核因子 NF -κB (NF-κB)信号通路中的调控作用 | 第47-48页 |
5 展望 | 第48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
致谢 | 第52-54页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第54-55页 |