| 目录 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 縮略词表 | 第16-20页 |
| 第一章 文献综述 | 第20-46页 |
| 1. 课题的提出 | 第20-21页 |
| 2. 植物类胡萝卜素研究进展 | 第21-37页 |
| 2.1 类胡萝卜素功能 | 第21页 |
| 2.2 植物类胡萝卜素组成 | 第21页 |
| 2.3 植物类胡萝卜素生物合成与降解 | 第21-26页 |
| 2.3.1 类胡萝卜素生物合成前体 | 第23-24页 |
| 2.3.2 类胡萝卜素生物合成 | 第24-26页 |
| 2.4 植物类胡萝卜素调控 | 第26-34页 |
| 2.4.1 类胡萝卜素生物合成基因的转录调控 | 第26-30页 |
| 2.4.2 类胡萝卜素生物合成基因的转录后调控 | 第30-33页 |
| 2.4.3 类胡萝卜素降解 | 第33-34页 |
| 2.5 植物八氢番茄红素合成酶研究进展 | 第34-35页 |
| 2.6 柑橘果实类胡萝卜素研究进展 | 第35-37页 |
| 2.6.1 柑橘果实类胡萝卜素组成与含量 | 第35-36页 |
| 2.6.2 柑橘果实类胡萝卜素代谢相关酶及基因 | 第36页 |
| 2.6.3 柑橘红色突变体的研究 | 第36-37页 |
| 3. 植物启动子结构与功能研究 | 第37-45页 |
| 3.1 启动子概述 | 第37-39页 |
| 3.1.1 结构与特征简介 | 第37-38页 |
| 3.1.2 植物启动子的结构与功能 | 第38-39页 |
| 3.2 启动子类型 | 第39-41页 |
| 3.2.1 组成型启动子 | 第39-40页 |
| 3.2.2 组织特异性启动子 | 第40-41页 |
| 3.2.3 诱导型启动子 | 第41页 |
| 3.3 研究启动子功能的技术方法 | 第41-44页 |
| 3.3.1 启动子预测 | 第41-42页 |
| 3.3.2 启动子的克隆方法 | 第42-44页 |
| 3.4 启动子功能检测 | 第44-45页 |
| 3.4.1 启动子强弱的定性定量分析 | 第44页 |
| 3.4.2 缺失分析 | 第44-45页 |
| 4. 本研究的目的与内容 | 第45-46页 |
| 第二章 甜橙Psy1基因的克隆与功能活性分析 | 第46-67页 |
| 1. 引言 | 第46-47页 |
| 2. 材料与方法 | 第47-55页 |
| 2.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第47页 |
| 2.1.2 菌株、质粒及试剂配方 | 第47页 |
| 2.1.3 主要生化试剂及仪器设备 | 第47-48页 |
| 2.2 实验方法 | 第48-55页 |
| 2.2.1 基因克隆 | 第48-50页 |
| 2.2.2 表达分析 | 第50页 |
| 2.2.3 原核表达载体pET-CsPSY1a,pET-CsPSY1b以及pET-CpPSY1b的构建 | 第50-51页 |
| 2.2.4 pET-CsPSY1a,pET-CsPSY1b以及pET-CpPSY1b活性分析 | 第51-52页 |
| 2.2.5 类胡萝卜素提取 | 第52-53页 |
| 2.2.6 点突变和聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第53-54页 |
| 2.2.7 四个突变后的原核表达载体的表达产物功能分析 | 第54-55页 |
| 3. 结果与分析 | 第55-64页 |
| 3.1 CsPsy1a与CsPsy1b基因序列分析 | 第55-56页 |
| 3.2 CsPsy1a与CsPsy1b基因表达分析 | 第56-57页 |
| 3.3 类胡萝卜素提取以及表达分析 | 第57-59页 |
| 3.4 Psy1基因序列分析 | 第59-60页 |
| 3.5 pET-CsPSY1a,pET-CsPSY1b与pET-CpPSY1b表达产物功能分析 | 第60-62页 |
| 3.6 四个突变后的原核表达载体的表达产物功能分析 | 第62-64页 |
| 4. 讨论 | 第64-67页 |
| 4.1 Psy1等位基因编码的蛋白酶活性 | 第64-65页 |
| 4.2 PSY1酶活性与果实色泽性状形成的关系 | 第65页 |
| 4.3 Psy1等位基因与柑橘不同品种进化形成的关系 | 第65-67页 |
| 第三章 甜橙Psy1基因启动子的克隆与功能分析 | 第67-102页 |
| 1 前言 | 第67-68页 |
| 2 材料与方法 | 第68-82页 |
| 2.1 实验材料 | 第68-69页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第68页 |
| 2.1.2 菌株,质粒,载体及培养基配方 | 第68-69页 |
| 2.1.3 试剂及仪器 | 第69页 |
| 2.2 实验方法 | 第69-82页 |
| 2.2.1 柑橘基因组DNA提取 | 第69页 |
| 2.2.2 染色体步移文库的构建 | 第69-70页 |
| 2.2.3 CsPsy1a基因启动子的克隆 | 第70-72页 |
| 2.2.4 CsPsy1b基因启动子的克隆 | 第72页 |
| 2.2.5 启动子序列分析 | 第72页 |
| 2.2.6 5’RACE精细定位CsPsy1基因转录起始位点 | 第72-76页 |
| 2.2.7 CsPsy1a基因启动子缺失表达载体的构建 | 第76-77页 |
| 2.2.8 CsPsy1b基因启动子表达载体的构建 | 第77页 |
| 2.2.9 农杆菌介导的拟南芥的遗传转化 | 第77-78页 |
| 2.2.10 外源处理 | 第78-79页 |
| 2.2.11 GUS定性及定量分析 | 第79-82页 |
| 3 结果与分析 | 第82-97页 |
| 3.1 CsPsy1a基因启动子的克隆与功能分析 | 第82-90页 |
| 3.1.1 CsPsy1a基因启动子的克隆 | 第82页 |
| 3.1.2 CsPsy1a基因启动子序列的分析 | 第82-83页 |
| 3.1.3 CsPsy1a基因转录起始位点的定位 | 第83-84页 |
| 3.1.4 CsPsy1a启动子缺失表达载体的构建 | 第84-86页 |
| 3.1.5 CsPsy1a基因全长启动子的表达模式 | 第86-87页 |
| 3.1.6 CsPsy1a基因一系列缺失启动子对不同光质的响应 | 第87-88页 |
| 3.1.7 CsPsy1a基因启动子对激素,非生物逆境等的响应 | 第88-90页 |
| 3.2 CsPsy1b基因启动子的克隆与功能分析 | 第90-97页 |
| 3.2.1 CsPsy1b基因启动子的克隆 | 第90-91页 |
| 3.2.2 CsPsy1b基因启动子序列的分析 | 第91-93页 |
| 3.2.3 CsPsy1b基因启动子表达载体的构建 | 第93页 |
| 3.2.4 CsPsy1b基因全长启动子的表达模式 | 第93-94页 |
| 3.2.5 CsPsy1基因启动子对不同光质的响应 | 第94-95页 |
| 3.2.6 CsPsy1基因启动子对不同光强和光周期的响应 | 第95-97页 |
| 4 讨论 | 第97-102页 |
| 4.1 光信号是CsPsy1基因启动子重要的激活因子 | 第97-99页 |
| 4.2 CsPsy1a基因启动子与糖信号 | 第99页 |
| 4.3 Psyl等位基因启动子与柑橘不同品种进化形成的关系 | 第99-100页 |
| 4.4 后续研究设想与展望 | 第100-102页 |
| 参考文献 | 第102-118页 |
| 附录Ⅰ 引物与探针 | 第118-120页 |
| 附录Ⅱ 攻读博士期间发表的论文 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
