摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第1章 绪论 | 第8-17页 |
1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第8-9页 |
1.1.1 课题研究背景 | 第8-9页 |
1.1.2 课题研究目的和意义 | 第9页 |
1.2 国内外在该方向的研究现状及分析 | 第9-16页 |
1.2.1 原癌基因 Sall4 与多种肿瘤发生的关系 | 第10-11页 |
1.2.2 miRNA 与脑胶质瘤的关系 | 第11-14页 |
1.2.3 miR-107 与多种肿瘤发生的关系 | 第14-16页 |
1.3 技术路线 | 第16-17页 |
第2章 材料与方法 | 第17-33页 |
2.1 实验材料 | 第17-22页 |
2.1.1 细胞系 | 第17页 |
2.1.2 载体及重组体 | 第17页 |
2.1.3 实验试剂与试剂配方 | 第17-21页 |
2.1.4 实验仪器 | 第21-22页 |
2.1.5 分析软件 | 第22页 |
2.2 实验方法与步骤 | 第22-32页 |
2.2.1 细胞培养及转染 | 第22-23页 |
2.2.2 qRT-PCR | 第23-26页 |
2.2.3 Sall43'UTR-pMIR-reportor 质粒的构建 | 第26-27页 |
2.2.4 双荧光素酶报告载体系统的检测 | 第27-28页 |
2.2.5 Western blot 检测蛋白水平 | 第28-29页 |
2.2.6 MTT 增殖曲线实验 | 第29-30页 |
2.2.7 软琼脂集落形成实验 | 第30页 |
2.2.8 细胞周期实验 | 第30-31页 |
2.2.9 细胞流式检测凋亡实验 | 第31页 |
2.2.10 细胞凋亡酶 caspase3/7 酶活性检测实验 | 第31-32页 |
2.2.11 裸鼠成瘤实验 | 第32页 |
2.2.12 TUNEL 检测肿瘤组织细胞的凋亡情况 | 第32页 |
2.3 本章小结 | 第32-33页 |
第3章 hsa-miR-107靶向调控Sall4表达 | 第33-41页 |
3.1 Sall4 为 miR-107 的靶基因 | 第33-35页 |
3.2 miR-107 抑制 Sall4 mRNA 的稳定性及其蛋白的翻译 | 第35页 |
3.2.1 miR-107 抑制 Sall4 mRNA 的稳定性 | 第35页 |
3.2.2 miR-107 抑制 Sall4 蛋白的翻译 | 第35页 |
3.3 miR-107 和 Sall4 的表达呈负相关 | 第35-39页 |
3.3.1 miR-107 在脑胶质瘤组织和细胞系中的表达 | 第35-37页 |
3.3.2 Sall4 mRNA 在脑胶质瘤组织中的表达 | 第37-39页 |
3.3.3 miR-107 和 Sall4 表达的相关性分析 | 第39页 |
3.4 讨论 | 第39-40页 |
3.5 本章小结 | 第40-41页 |
第4章 miR-107诱导细胞凋亡抑制脑胶质瘤细胞的增殖 | 第41-52页 |
4.1 miR-107 在体外诱导凋亡抑制脑胶质瘤细胞的增殖 | 第41-46页 |
4.1.1 MTT 增殖曲线分析 | 第41页 |
4.1.2 软琼脂集落形成实验 | 第41-42页 |
4.1.3 miR-107 对脑胶质瘤细胞周期时相的影响 | 第42-44页 |
4.1.4 miR-107 诱导脑胶质瘤细胞凋亡 | 第44-46页 |
4.2 miR-107 体内诱导细胞凋亡抑制脑胶质瘤细胞的增殖 | 第46-50页 |
4.2.1 miR-107 抑制裸鼠肿瘤的生长 | 第46-49页 |
4.2.2 miR-107 诱导裸鼠肿瘤细胞的凋亡 | 第49-50页 |
4.3 讨论 | 第50-51页 |
4.4 本章小结 | 第51-52页 |
结论 | 第52-53页 |
展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
附录 | 第58-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
个人简历 | 第61页 |