| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第8-24页 |
| 1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第8-9页 |
| 1.2 空间生命科学的研究进程 | 第9-12页 |
| 1.2.1 空间生物学的研究进程 | 第9-10页 |
| 1.2.2 航天医学的研究进程 | 第10-12页 |
| 1.3 微重力对细胞的生物学效应 | 第12-14页 |
| 1.4 纺锤体组装检验点及其检验点蛋白 BUB1 与 MAD2 概述 | 第14-18页 |
| 1.4.1 纺锤体组装检验点概述 | 第14-16页 |
| 1.4.2 纺锤体检验点蛋白 BUB1 概述 | 第16页 |
| 1.4.3 纺锤体检验点蛋白 MAD2 概述 | 第16-18页 |
| 1.5 染色体不稳定性概述 | 第18-19页 |
| 1.6 RNA 干扰技术的研究现状 | 第19-22页 |
| 1.6.1 RNA 干扰的作用机制及其特点 | 第19-22页 |
| 1.6.2 RNA 干扰应用概述 | 第22页 |
| 1.7 课题的研究内容以及技术路线 | 第22-24页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第24-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.1.1 菌株和细胞系 | 第24页 |
| 2.1.2 菌株培养与细胞培养用品以及相关的试剂 | 第24页 |
| 2.1.3 载体 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-28页 |
| 2.2.1 构建 siRNA-pSilencer 4.1-CMV neo vectors 表达载体 | 第24-26页 |
| 2.2.2 细胞转染及筛选稳定转染细胞 | 第26-27页 |
| 2.2.3 模拟微重力效应 | 第27页 |
| 2.2.4 流式细胞术对细胞周期及 DNA 含量的检测 | 第27页 |
| 2.2.5 免疫荧光对纺锤体变化的检测 | 第27-28页 |
| 2.3 本章小结 | 第28-29页 |
| 第3章 BUB1/MAD2 稳定沉默 U-2 OS 细胞的建立 | 第29-36页 |
| 3.1 PSILENCER 4.1 系列重组体的构建 | 第29-31页 |
| 3.1.1 BUB1 基因的 siRNA 设计与制备 | 第29-30页 |
| 3.1.2 pSilencer 4.1 与 RNA 干扰片段连接、转化 | 第30-31页 |
| 3.2 SIRNAS 重组体的测序验证 | 第31页 |
| 3.3 BUB1 SIRNAS 的沉默效果检验 | 第31-32页 |
| 3.4 MAD2 SIRNAS 的沉默效果检验 | 第32-34页 |
| 3.5 讨论 | 第34-35页 |
| 3.6 本章小结 | 第35-36页 |
| 第4章 模拟微重力效应对BUB1/MAD2沉默后U-2OS细胞多极纺锤体发生率的影响 | 第36-42页 |
| 4.1 模拟微重力效应对BUB1 沉默后的U-2 OS 细胞多极纺锤体发生率的影响 | 第36-38页 |
| 4.2 模拟微重力效应对MAD2 沉默后的U-2 OS 细胞多极纺锤体发生率的影响 | 第38-40页 |
| 4.3 讨论 | 第40-41页 |
| 4.4 本章小结 | 第41-42页 |
| 第5章 模拟微重力效应对BUB1/MAD2沉默后U-2OS细胞DNA含量及细胞周期的影响 | 第42-52页 |
| 5.1 模拟微重力效应对BUB1 稳定沉默后的U-2 OS 细胞DNA 含量与细胞周期的影响 | 第42-46页 |
| 5.1.1 模拟微重力效应对BUB1 稳定沉默后的U-2 OS 细胞DNA 含量的影响 | 第42-44页 |
| 5.1.2 模拟微重力效应对BUB1 稳定沉默后的U-2 OS 细胞细胞周期的影响 | 第44-46页 |
| 5.2 模拟微重力效应对MAD2 稳定沉默后的U-2 OS 细胞DNA 含量与细胞周期的影响 | 第46-50页 |
| 5.2.1 模拟微重力效应对MAD2 稳定沉默后的U-2 OS 细胞DNA 含量的影响 | 第47-48页 |
| 5.2.2 模拟微重力效应对MAD2 稳定沉默后的U-2 OS 细胞细胞周期的影响 | 第48-50页 |
| 5.3 讨论 | 第50页 |
| 5.4 本章小结 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52页 |
| 展望 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 附录 I | 第60-61页 |
| 附录 II | 第61-64页 |
| 附录 III | 第64-67页 |
| 附录 IV | 第67-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
