| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 英文缩写及全文和中文对照表 | 第9-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-12页 |
| 第2章 材料与方法 | 第12-30页 |
| 2.1 主要材料与试剂 | 第12-14页 |
| 2.2 实验主要仪器和设备 | 第14-15页 |
| 2.3 实验方法 | 第15-29页 |
| 2.3.1 构建靶向 DJ-1 基因的 shRNA 表达载体 | 第15-19页 |
| 2.3.2 H9c2细胞的培养 | 第19-20页 |
| 2.3.3 重组质粒 pGPU6/GFP/Neo-DJ-1瞬时转染 H9c2 细胞检测干扰效率 | 第20-21页 |
| 2.3.4 RT-PCR检测H9c2细胞内DJ-1 mRNA表达水平 | 第21-24页 |
| 2.3.5 Western Blot测定 H9c2 细胞内DJ-1蛋白表达的变化 | 第24-26页 |
| 2.3.6 H9c2细胞缺氧/复氧损伤模型以及缺氧预适应延迟保护模型的建立 | 第26-27页 |
| 2.3.7 H9c2细胞存活率和乳酸脱氢酶(LDH)活性的测定 | 第27页 |
| 2.3.8 硫代巴比妥酸法检测 H9c2 细胞内丙二醛(MDA)的含量 | 第27-28页 |
| 2.3.9 比色法测定 H9c2 细胞内抗氧化物酶SOD、CAT、GSH-Px的活性 | 第28-29页 |
| 2.3.10 流式细胞术检测H9c2细胞内ROS含量的变化 | 第29页 |
| 2.4 数据处理 | 第29-30页 |
| 第3章 实验结果 | 第30-41页 |
| 3.1 重组质粒PGPU6/GFP/NEO-SHDJ-1的酶切鉴定 | 第30-31页 |
| 3.2 重组质粒PGPU6/GFP/NEO-DJ-1的测序鉴定 | 第31-32页 |
| 3.3 最有效抑制DJ-1表达的重组质粒的筛选结果 | 第32-34页 |
| 3.4 缺氧预适应对DJ-1 MRNA及蛋白表达的影响 | 第34-36页 |
| 3.5 RNAI沉默DJ-1表达后，APC对A/R细胞的生存率及LDH活性的影响 | 第36-37页 |
| 3.6 RNAI沉默DJ-1表达后，APC对A/R细胞中MDA水平的影响 | 第37-38页 |
| 3.7 RNAI沉默DJ-1表达后，APC对A/R细胞中抗氧化物酶SOD、CAT、GSH-PX水平的影响 | 第38-39页 |
| 3.8 RNAI沉默 DJ-1表达后，APC对A/R细胞中ROS产生的影响 | 第39-41页 |
| 第4章 讨论 | 第41-44页 |
| 第5章 结论 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 综述 | 第50-58页 |
| 参考文献 | 第56-58页 |
