中文摘要 | 第1-14页 |
英文摘要 | 第14-18页 |
1 前言 | 第18-38页 |
·白细胞介素18 的研究进展 | 第18-23页 |
·IL-18 的发现 | 第18页 |
·IL-18 的分子结构 | 第18-19页 |
·IL-18 的分布及产生 | 第19-20页 |
·IL-18 的生物学功能 | 第20-23页 |
·鸡IL-18 的研究进展 | 第23-24页 |
·鸡IL-18 的发现 | 第23-24页 |
·鸡IL-18 的研究 | 第24页 |
·传染性法氏囊病 | 第24-27页 |
·传染性法氏囊病概述 | 第24-25页 |
·IBD 的结构和分子生物学特性 | 第25-26页 |
·IBD 的免疫 | 第26-27页 |
·亚单位疫苗的研制 | 第27页 |
·禽流感研究进展 | 第27-33页 |
·禽流感概述 | 第27-28页 |
·AI 在世界范围内的流行 | 第28-29页 |
·AI 对其它动物甚至人类的影响 | 第29-30页 |
·AIV 的分子病毒学 | 第30-31页 |
·HA 的生物学功能 | 第31-32页 |
·AI 的免疫 | 第32页 |
·亚单位疫苗的研制 | 第32-33页 |
·杆状病毒表达系统研究进展 | 第33-37页 |
·杆状病毒的细胞病理效应 | 第34页 |
·杆状病毒表达载体的分类 | 第34页 |
·杆状病毒表达载体的构建 | 第34-35页 |
·重组杆状病毒的构建和筛选 | 第35-36页 |
·杆状病毒表达载体系统的优越性 | 第36-37页 |
·His 标签的引入 | 第37页 |
·本研究的目的及意义 | 第37-38页 |
2 材料与方法 | 第38-72页 |
·材料 | 第38-45页 |
·质粒、细胞、受体菌、菌株及实验动物 | 第38-40页 |
·所用试剂及耗材 | 第40-41页 |
·主要培养基及试剂的配制方法 | 第41-44页 |
·主要仪器及设备 | 第44-45页 |
·方法 | 第45-72页 |
·引物设计及合成 | 第46-47页 |
·m ChIL-18 基因重组转移载体的构建 | 第47-52页 |
·VP2 基因重组转移载体的构建 | 第52-53页 |
·HA1 基因重组转移载体的构建 | 第53-54页 |
·m ChIL-18 和VP2 基因共表达重组转移载体的构建 | 第54-56页 |
·m ChIL-18 和HA1 基因共表达重组转移载体的构建 | 第56-57页 |
·重组质粒的转座(即重组Bacmid 的构建) | 第57-59页 |
·重组Bacmid DNA 的提取及鉴定 | 第59-60页 |
·重组Bacmid 转染sf9 昆虫细胞及收获重组杆状病毒 | 第60-63页 |
·m ChIL-18、VP2 及HA1 在sf9 昆虫细胞中的单独或同时表达 | 第63-64页 |
·sf9 昆虫细胞表达蛋白的鉴定 | 第64-65页 |
·重组mChIL-18 蛋白促进鸡脾淋巴细胞增殖试验(MTT 法) | 第65-67页 |
·重组m ChIL-18 蛋白蛋白诱导鸡脾淋巴细胞产生IFN-γ | 第67页 |
·重组mChIL-18 蛋白诱导的IFN-γ对VSV 的抑制活性 | 第67页 |
·蛋白的纯化 | 第67-68页 |
·油乳剂疫苗的制备 | 第68页 |
·动物免疫 | 第68-69页 |
·细胞免疫检测(流氏细胞术) | 第69-70页 |
·抗体检测试剂盒 | 第70-71页 |
·血凝血抑 | 第71-72页 |
·攻毒试验 | 第72页 |
3 结果与分析 | 第72-94页 |
·重组转移载体的构建与鉴定 | 第72-78页 |
·m ChIL-18 基因的克隆、序列测定及其分析 | 第72-74页 |
·VP2 基因的克隆、序列测定及其分析 | 第74-75页 |
·HA1 基因的克隆、序列测定及其分析 | 第75-77页 |
·pF-IL18-VP2 共表达重组杆状病毒转移载体的构建 | 第77页 |
·pF-IL18-HA1 共表达重组杆状病毒转移载体的构建 | 第77-78页 |
·重组Bacmid 的筛选与鉴定 | 第78-80页 |
·重组杆状病毒的DNA 鉴定 | 第80页 |
·目的片段在sf9 昆虫细胞中的表达 | 第80-85页 |
·重组杆状病毒的细胞病变观察 | 第80-81页 |
·表达产物的SDS-PAGE 检测 | 第81-83页 |
·表达产物的IFA 检测 | 第83-85页 |
·表达产物的生物学活性检测 | 第85-88页 |
·蛋白促进鸡脾淋巴细胞增殖试验 | 第85-86页 |
·蛋白诱导鸡脾淋巴细胞产生IFN-γ | 第86页 |
·蛋白诱导的IFN-γ对VSV 的抑制作用 | 第86-88页 |
·表达蛋白的免疫原性研究 | 第88-94页 |
·pIL18、pVP2 与pVP2-IL18 促进细胞免疫水平检测 | 第88-89页 |
·pIL18、pHA1 与pHA1-IL18 促进细胞免疫水平检测 | 第89-91页 |
·pIL18、pVP2 与pVP2-IL18 促进抗体水平检测 | 第91页 |
·pIL18、pHA1 与pHA1-IL18 促进抗体水平检测 | 第91-93页 |
·pIL18、pHA1 与pHA1-IL18 攻毒保护试验 | 第93-94页 |
4 讨论 | 第94-99页 |
5 结论 | 第99-100页 |
6 参考文献 | 第100-117页 |
7 附录 | 第117-118页 |
8 致谢 | 第118-119页 |
9 攻读学位期间发表论文情况 | 第119-120页 |
博士学位论文内容简介及自评 | 第120页 |