| 中文摘要 | 第1-16页 |
| ABSTRACT | 第16-20页 |
| 1 引言 | 第20-41页 |
| ·禽白血病病毒（ALV）病原特性 | 第20-25页 |
| ·ALV 的形态学、理化特性等常规生物学特性 | 第20-22页 |
| ·ALV 的分子生物学特性 | 第22-25页 |
| ·ALV 的致病性及致病机制 | 第25-30页 |
| ·ALV 的致病性 | 第25-26页 |
| ·禽白血病的临床症状 | 第26-28页 |
| ·禽白血病病毒的致肿瘤机制 | 第28-29页 |
| ·禽白血病病毒引起的免疫抑制 | 第29-30页 |
| ·禽白血病的检测和诊断 | 第30-35页 |
| ·病毒分离和鉴定 | 第31-32页 |
| ·血清学检测 | 第32-33页 |
| ·ELISA 法 | 第32-33页 |
| ·荧光抗体检测方法 | 第33页 |
| ·血清中和试验 | 第33页 |
| ·其他血清学检测方法 | 第33页 |
| ·生物学试验 | 第33-34页 |
| ·分子生物学方法 | 第34-35页 |
| ·检测抗体 | 第35页 |
| ·禽白血病在我国的流行现状及发展趋势 | 第35-36页 |
| ·禽白血病的预防和控制 | 第36页 |
| ·单克隆抗体在畜禽疫病诊断及防治中的应用 | 第36-39页 |
| ·检测病原微生物 | 第37-38页 |
| ·检测肿瘤特异性抗原和肿瘤相关抗原 | 第38页 |
| ·检测机体内的微量成分 | 第38-39页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第39-41页 |
| 2 ALV-A-SDAU09C1 ENV-GP85 基因的克隆与表达 | 第41-60页 |
| ·材料与方法 | 第42-54页 |
| ·材料 | 第42-44页 |
| ·病毒与细胞来源 | 第42页 |
| ·菌株与载体 | 第42页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第42-43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·主要试剂的配制 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-54页 |
| ·病毒增殖与定量 | 第44-45页 |
| ·细胞基因组DNA 的提取 | 第45页 |
| ·ALV ENV-GP85 基因扩增引物的设计与合成 | 第45-46页 |
| ·聚合酶链式反应（PCR） | 第46页 |
| ·目的条带的回收 | 第46-47页 |
| ·感受态大肠杆菌DH5Α的制备 | 第47页 |
| ·PCR 回收产物的连接 | 第47-48页 |
| ·连接产物的转化 | 第48页 |
| ·阳性克隆细菌的筛选 | 第48页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第48页 |
| ·重组质粒DNA 的PCR 鉴定 | 第48-49页 |
| ·序列测定与分析 | 第49页 |
| ·重组表达载体PET-SDAU09C1-GP85 的构建与鉴定 | 第49-50页 |
| ·诱导表达条件的筛选及优化 | 第50-51页 |
| ·重组成熟蛋白ENV-GP85 的大量表达 | 第51页 |
| ·菌体的超声波裂解及纯化 | 第51-52页 |
| ·重组菌菌体裂解物SDS-PAGE 分析 | 第52-53页 |
| ·重组蛋白特异性WESTERN-BLOT分析 | 第53-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-57页 |
| ·PCR 扩增SDAU09C1 株ENV-GP85 基因的效果 | 第54-55页 |
| ·重组质粒PET32A-SDAU09C1-GP85 的筛选和鉴定 | 第55页 |
| ·重组质粒PET-SDAU09C1-GP85 转化菌裂解物的SDS-PAGE | 第55-57页 |
| ·WESTERN-BLOT | 第57页 |
| ·讨论 | 第57-60页 |
| 3 A 亚群禽白血病病毒单克隆抗体的研制及其特性 | 第60-83页 |
| ·材料与方法 | 第61-75页 |
| ·材料 | 第61-65页 |
| ·实验动物 | 第61页 |
| ·细胞系及病毒毒株 | 第61页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第61-62页 |
| ·主要试剂的配制 | 第62-63页 |
| ·间接ELISA 方法试剂配制 | 第63-65页 |
| ·主要仪器 | 第65页 |
| ·方法 | 第65-75页 |
| ·间接ELISA 检测方法的建立 | 第65-67页 |
| ·间接ELISA 检测方法的基本操作 | 第65-66页 |
| ·ELISA 最佳反应条件的确定 | 第66-67页 |
| ·特异性实验 | 第67页 |
| ·重复性试验 | 第67页 |
| ·免疫抗原的制备 | 第67页 |
| ·免疫动物 | 第67-68页 |
| ·SP2/0 骨髓瘤细胞的制备 | 第68页 |
| ·饲养层细胞的制备 | 第68-69页 |
| ·脾细胞悬液的制备 | 第69页 |
| ·细胞混合 | 第69-70页 |
| ·细胞培养与观察 | 第70页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的筛选 | 第70页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的克隆化 | 第70-71页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存 | 第71页 |
| ·杂交瘤细胞的复苏 | 第71页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备 | 第71-72页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第72-73页 |
| ·单抗的粗提 | 第72页 |
| ·单抗的亲和层析纯化 | 第72-73页 |
| ·单克隆抗体特性的鉴定 | 第73-75页 |
| ·间接ELISA 法测定单抗效价 | 第73页 |
| ·抗体分泌稳定性的测定 | 第73页 |
| ·WESTERN BLOTTING分析单克隆抗体生物活性 | 第73-74页 |
| ·间接免疫荧光(IFA) 检测单抗的特异性 | 第74-75页 |
| ·结果与分析 | 第75-80页 |
| ·间接ELISA 检测方法的建立 | 第75-76页 |
| ·ELISA 最佳反应条件的确定 | 第75-76页 |
| ·重复性及特异性 | 第76页 |
| ·杂交瘤融合和筛选效果 | 第76-77页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第77-80页 |
| ·腹水单抗的纯化 | 第77页 |
| ·单抗的效价测定 | 第77-78页 |
| ·抗体分泌稳定性 | 第78页 |
| ·单抗的WESTERN BLOTTING分析 | 第78-79页 |
| ·间接免疫荧光分析 | 第79-80页 |
| ·讨论 | 第80-83页 |
| 4 A LV-A 与ALV-J 共感染对病毒血症及抗体反应的相互影响 | 第83-99页 |
| ·材料和方法 | 第83-89页 |
| ·材料 | 第83-85页 |
| ·病毒及细胞系 | 第83-84页 |
| ·试验动物 | 第84页 |
| ·异硫氰酸荧光素（FITC）标记的羊抗鼠二抗 | 第84页 |
| ·单克隆抗体 | 第84页 |
| ·ELISA 检测试剂盒 | 第84页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第84页 |
| ·主要试剂配制 | 第84页 |
| ·主要仪器设备 | 第84-85页 |
| ·方法 | 第85-89页 |
| ·病毒的扩增 | 第85页 |
| ·病毒TCID50的测定 | 第85-86页 |
| ·实验动物的感染 | 第86页 |
| ·实验动物的免疫 | 第86页 |
| ·病毒血症的检测 | 第86-88页 |
| ·鸡胚成纤维细胞（CEF）的制备 | 第86-87页 |
| ·病毒蚀斑的培养 | 第87页 |
| ·间接免疫荧光试验（IFA） | 第87-88页 |
| ·血清中特异性抗体的检测 | 第88-89页 |
| ·结果与分析 | 第89-95页 |
| ·病毒TCID50的测定结果 | 第89页 |
| ·病毒血症检测结果 | 第89-92页 |
| ·ALV-A 单独感染病毒血症 | 第91页 |
| ·ALV-J 单独感染病毒血症 | 第91页 |
| ·ALV-J 共感染时对ALV-A 病毒血症的影响 | 第91页 |
| ·ALV-A 共感染时对ALV-J 病毒血症的影响 | 第91-92页 |
| ·共感染对特异性抗体反应的影响 | 第92-95页 |
| ·ALV-J 共感染时对ALV-A 特异性抗体的影响 | 第92-93页 |
| ·ALV-A 共感染时对ALV-J 特异性抗体的影响 | 第93页 |
| ·病毒血症及相应抗体反应的相关性 | 第93-95页 |
| ·讨论 | 第95-99页 |
| 结论 | 第99-100页 |
| 创新点 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-118页 |
| 致谢 | 第118-119页 |
| 攻读博士学位期间发表、录用的论文 | 第119-120页 |
| 博士学位论文内容简介及自评 | 第120-121页 |
