| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-21页 |
| ·植酸酶及其种类 | 第10页 |
| ·植酸酶的来源 | 第10页 |
| ·植酸酶的特性 | 第10-11页 |
| ·植酸酶作用机理 | 第11-12页 |
| ·植酸酶的应用 | 第12-13页 |
| ·植酸酶在食品工业中的应用 | 第12-13页 |
| ·植酸酶在饲料工业中的应用 | 第13页 |
| ·植酸酶在医药行业中的应用 | 第13页 |
| ·植酸酶的基因工程 | 第13-20页 |
| ·植酸酶在原核微生物中的表达 | 第14页 |
| ·植酸酶在真核微生物中的表达 | 第14-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 实验内容 | 第21-41页 |
| ·实验材料与仪器 | 第21-25页 |
| ·菌种 | 第21页 |
| ·质粒 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·酶和试剂 | 第21-22页 |
| ·试验仪器 | 第22页 |
| ·实验用溶液的配制 | 第22-24页 |
| ·实验用植酸钙的配制 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-41页 |
| ·植酸酶重组毕赤酵母总DNA 提取 | 第25页 |
| ·植酸酶phyA 基因的克隆 | 第25-26页 |
| ·解脂耶氏酵母po1g 表达载体PT14-phyA 的构建 | 第26-29页 |
| ·解脂耶氏酵母po1g 的转化 | 第29-30页 |
| ·重组解脂耶氏酵母的筛选 | 第30页 |
| ·重组植酸酶的诱导表达 | 第30-33页 |
| ·重组植酸酶的酶学性质研究 | 第33-34页 |
| ·解脂耶氏酵母表达载体pINA1297-phyA 的构建 | 第34-35页 |
| ·重组解脂耶氏酵母的转化及筛选 | 第35-36页 |
| ·重组酵母菌株的表达 | 第36-38页 |
| ·SDS-PAGE 凝胶的制备及发酵液上清液的蛋白质电泳 | 第38-39页 |
| ·重组植酸酶酶活性研究 | 第39页 |
| ·重组植酸酶的胰蛋白酶和胃蛋白酶抗性研究 | 第39-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-53页 |
| ·植酸酶重组毕赤酵母总DNA 提取 | 第41页 |
| ·植酸酶phyA 基因片段的克隆 | 第41页 |
| ·解脂耶氏酵母重组表达载体的构建 | 第41-44页 |
| ·解脂耶氏酵母po1g 重组表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·解脂耶氏酵母po1h 重组表达载体的构建 | 第42-44页 |
| ·重组表达载体的线性化 | 第44-45页 |
| ·酵母的转化与筛选 | 第45-46页 |
| ·重组植酸酶phyA 的诱导表达 | 第46-48页 |
| ·重组解脂耶氏酵母表达产物的SDS-PAGE 鉴定 | 第48页 |
| ·表达产物的酶学性质研究 | 第48-51页 |
| ·重组植酸酶phyA 的最适pH 值 | 第48-49页 |
| ·重组植酸酶phyA 的最适反应温度 | 第49页 |
| ·重组植酸酶的pH 耐受性 | 第49-50页 |
| ·重组植酸酶phyA 的耐热性研究 | 第50-51页 |
| ·重组植酸酶米氏常数(Km)的测定 | 第51页 |
| ·酶的胃蛋白酶和胰蛋白酶抗性研究 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-56页 |
| ·植酸酶phyA 基因的克隆 | 第53页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第53-54页 |
| ·重组解脂耶氏酵母的表达 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 研究生在校期间的研究成果 | 第62页 |
