摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-25页 |
1 谷胱甘肽理化性质与分布 | 第11-12页 |
·分子结构 | 第11-12页 |
·理化性质 | 第12页 |
·谷胱甘肽的分布 | 第12页 |
2 谷胱甘肽的生理功能 | 第12-14页 |
·还原和解毒功能 | 第12-13页 |
·清除自由基和保护细胞功能 | 第13页 |
·参与细胞的各种代谢功能 | 第13-14页 |
3 谷胱甘肽的检测方法 | 第14-16页 |
·碘量法 | 第14页 |
·分光光度法 | 第14-15页 |
·高效液相色谱法(HPLC 法) | 第15页 |
·荧光法 | 第15页 |
·高效毛细管电泳法(HPCE) | 第15-16页 |
4 谷胱甘肽的生物合成途径研究 | 第16-17页 |
·谷胱甘肽的生物学合成途径 | 第16页 |
·谷胱甘肽合成途径中的已知关键酶的基因表达调控 | 第16页 |
·逆境对谷胱甘肽的合成的影响 | 第16-17页 |
5 谷胱甘肽的抽提方法 | 第17页 |
·微波辅助提取技术(MAE) | 第17页 |
·其他抽提方法 | 第17页 |
·温差破碎法 | 第17页 |
·甲酸抽提法 | 第17页 |
·乙醇抽提法 | 第17页 |
·酶破碎法 | 第17页 |
6 谷胱甘肽生产的研究进展 | 第17-22页 |
·萃取法 | 第18页 |
·化学合成法 | 第18页 |
·酶法 | 第18-19页 |
·微生物发酵法 | 第19-22页 |
7 谷胱甘肽的应用 | 第22-23页 |
·临床方面的应用 | 第22页 |
·食品加工业的应用 | 第22-23页 |
·谷胱甘肽的其他应用 | 第23页 |
8 本课题的研究目的与意义 | 第23-24页 |
9 本课题的技术路线 | 第24-25页 |
第二部分 研究内容 | 第25-53页 |
第一章 谷胱甘肽高产菌株的筛选及诱变 | 第25-29页 |
1 酵母菌的分离 | 第25-26页 |
·材料 | 第25页 |
·方法 | 第25-26页 |
2 对筛到的菌种进行诱变处理 | 第26-27页 |
·诱变材料 | 第26页 |
·诱变方法 | 第26页 |
·处理方法 | 第26-27页 |
·处理结果 | 第27页 |
3 结果与讨论 | 第27-29页 |
第二章 谷胱甘肽的含量检测 | 第29-38页 |
1 材料、设备 | 第29-30页 |
·实验材料 | 第29页 |
·主要试剂 | 第29页 |
·仪器设备 | 第29-30页 |
2 实验方法 | 第30-33页 |
·生物量的测定 | 第30页 |
·谷胱甘肽测定分析 | 第30-31页 |
·谷胱甘肽标准曲线的制备 | 第31-32页 |
·谷胱甘肽的提取 | 第32页 |
·回收率的测定 | 第32-33页 |
3 实验结果 | 第33-37页 |
·两种方法标准曲线的比较 | 第33-36页 |
·两种方法回收率的测定 | 第36-37页 |
4 结论 | 第37-38页 |
第三章 高产菌株的鉴定 | 第38-42页 |
1 材料、设备及分析方法 | 第38-39页 |
·实验材料 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38-39页 |
2 实验方法 | 第39-41页 |
·形态学特征观察 | 第39-40页 |
·生化鉴定 | 第40-41页 |
3 结果 | 第41-42页 |
第四章 酵母菌的基因组DNA 的提取 | 第42-47页 |
1 材料、设备及分析方法 | 第42-43页 |
·实验材料 | 第42页 |
·主要试剂 | 第42页 |
·仪器设备 | 第42-43页 |
2 实验方法 | 第43-45页 |
·酵母菌原生质体的制备 | 第43页 |
·酵母菌基因组 DNA 的提取 | 第43-45页 |
·琼脂糖胶电泳检测 | 第45页 |
3 结果与分析 | 第45-46页 |
·DNA 提取中应注意的问题 | 第45页 |
·DNA 提取方法的结果 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-47页 |
第五章 谷胱甘肽合成酶基因的PCR 扩增 | 第47-53页 |
1 实验材料、设备 | 第47-48页 |
·实验材料 | 第47页 |
·主要试剂 | 第47页 |
·仪器设备 | 第47-48页 |
2 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶基因gshI 的引物设计与PCR 扩增 | 第48-49页 |
·引物设计 | 第48页 |
·扩增反应体系与程序 | 第48-49页 |
3 结果与分析 | 第49-53页 |
·gshI 基因的PCR 结果 | 第49-52页 |
·结果分析 | 第52-53页 |
第三部分 结论 | 第53-55页 |
1 高产谷胱甘肽菌株 | 第53页 |
2 谷胱甘肽简便测定方法 | 第53-54页 |
3 PCR 高产菌株的谷胱甘肽合成酶基因 | 第54页 |
4 通过转基因方法提高谷胱甘肽产量的展望 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
附表 | 第61-66页 |