内容提要 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-8页 |
abstract | 第8-11页 |
第一章 前言 | 第16-18页 |
第二章 文献综述 | 第18-34页 |
2.1 缺血性脑卒中内源性抗损伤机制研究进展 | 第18-27页 |
2.2 激活素A在神经系统的研究进展 | 第27-34页 |
第三章 缺血性脑损伤的体外细胞模型建立 | 第34-44页 |
3.1 材料 | 第34-35页 |
3.2 实验方法 | 第35-38页 |
3.3 结果 | 第38-41页 |
3.3.1 PC12细胞培养 | 第38-39页 |
3.3.2 MTT法细胞存活率检测 | 第39页 |
3.3.3 Hoechst染色细胞凋亡检测 | 第39-40页 |
3.3.4 流式细胞术细胞凋亡检测 | 第40-41页 |
3.4 讨论 | 第41-43页 |
3.5 小结 | 第43-44页 |
第四章 Act A高表达的PC12细胞系建立 | 第44-70页 |
4.1 材料 | 第44-46页 |
4.2 实验方法 | 第46-60页 |
4.3 结果 | 第60-66页 |
4.3.1 Act beta-A/p GH质粒的设计合成 | 第60-62页 |
4.3.2 Act A-p IRES2-EGFP重组载体的构建 | 第62-64页 |
4.3.3 Real-time RT-PCR检测Act A m RNA的表达 | 第64页 |
4.3.4 Western blot检测Act A蛋白水平的表达 | 第64-65页 |
4.3.5 ELISA检测Act A在细胞外的动态变化 | 第65-66页 |
4.4 讨论 | 第66-68页 |
4.5 小结 | 第68-70页 |
第五章 Act A环路作用模式及其抗缺血功能研究 | 第70-86页 |
5.1 材料 | 第70-72页 |
5.2 实验方法 | 第72-76页 |
5.3 结果 | 第76-81页 |
5.3.1 Act A细胞外积累触发Act A/Smads通路短时活化 | 第76-79页 |
5.3.2 Act A通路的正反馈环路作用模式 | 第79-80页 |
5.3.3 提高Act A环路信号强度促进PC12增殖 | 第80页 |
5.3.4 提高Act A环路信号强度降低细胞对OGD损伤的敏感性 | 第80-81页 |
5.3.5 提高Act A环路信号强度减轻OGD损伤所致的细胞凋亡 | 第81页 |
5.4 讨论 | 第81-85页 |
5.4.1 非经典的Act A信号环路 | 第81-83页 |
5.4.2 Act A环路特点及功能 | 第83-85页 |
5.5 小结 | 第85-86页 |
第六章 SARA参与Act A/Smads环路自限性的调控 | 第86-96页 |
6.1 材料 | 第86-87页 |
6.2 实验方法 | 第87-89页 |
6.3 结果 | 第89-93页 |
6.3.1 SARA表达的动态变化 | 第89-90页 |
6.3.2 sh RNA瞬时转染下调SARA表达水平 | 第90-91页 |
6.3.3 SARA表达水平调控Act A/Smads环路活性 | 第91-93页 |
6.4 讨论 | 第93-95页 |
6.5 小结 | 第95-96页 |
第七章 结论 | 第96-98页 |
创新点和展望 | 第98-100页 |
参考文献 | 第100-124页 |
攻读博士期间获得的成果 | 第124-126页 |
致谢 | 第126页 |