| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 前言 | 第15-20页 |
| 第一章 ARK5在HCC组织中的表达及意义 | 第20-41页 |
| 一 材料与方法 | 第20-34页 |
| 1 材料 | 第20-24页 |
| 1.1 组织样本采集 | 第20-21页 |
| 1.2 样本来源患者临床资料 | 第21页 |
| 1.3 引物的设计与合成 | 第21页 |
| 1.4 主要实验试剂 | 第21-22页 |
| 1.5 主要实验仪器 | 第22页 |
| 1.6 主要实验试剂配制 | 第22-24页 |
| 2 方法 | 第24-34页 |
| 2.1 荧光定量PCR检测ARK5 mRNA的表达 | 第24-28页 |
| 2.2 western blot检测 | 第28-32页 |
| 2.3 免疫组织化学法检测样品中ARK5蛋白的表达 | 第32-33页 |
| 2.4 统计学分析 | 第33-34页 |
| 二 结果 | 第34-38页 |
| 1 琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性 | 第34页 |
| 2 荧光定量PCR检测各样品中ARK5 mRNA表达 | 第34-35页 |
| 3 western blot检测各样品中ARK5蛋白表达结果 | 第35页 |
| 4 各样品组织切片中ARK5蛋白的表达情况 | 第35-37页 |
| 5 ARK5蛋白表达与患者生存率的相关性 | 第37-38页 |
| 三 讨论 | 第38-40页 |
| 四 小结 | 第40-41页 |
| 第二章 ARK5对肝癌细胞增殖、凋亡和侵袭作用机制的研究 | 第41-62页 |
| 一 材料与方法 | 第41-52页 |
| 1 材料 | 第41-44页 |
| 1.1 细胞株 | 第41-42页 |
| 1.2 细胞培养液 | 第42页 |
| 1.3 siRNA | 第42页 |
| 1.4 主要实验试剂 | 第42页 |
| 1.5 主要实验仪器 | 第42-43页 |
| 1.6 主要实验试剂配制 | 第43-44页 |
| 2 方法 | 第44-52页 |
| 2.1 细胞培养 | 第44页 |
| 2.2 细胞冻存 | 第44-45页 |
| 2.3 细胞计数 | 第45页 |
| 2.4 细胞分组 | 第45页 |
| 2.5 细胞转染 | 第45-46页 |
| 2.6 荧光定量PCR和western blot法检测转染后ARK5 mRNA及其相应蛋白的表达 | 第46-48页 |
| 2.7 MTT法检测转染后AMMC-7721细胞的增殖活性 | 第48页 |
| 2.8 流式细胞术（Annexin V-FITC/PI双染色法）检测转染后对细胞凋亡的影响 | 第48-49页 |
| 2.9 Transwe II小室法检测转染后U87细胞的侵袭能力 | 第49-50页 |
| 2.10 Caspase-3 活性检测 | 第50-51页 |
| 2.11 细胞划痕实验 | 第51页 |
| 2.12 统计学分析 | 第51-52页 |
| 二 结果 | 第52-57页 |
| 1 转染后ARK5在AMMC-7721细胞中的表达 | 第52-53页 |
| 2 ARK5对AMMC-7721细胞增殖的影响 | 第53-54页 |
| 3 ARK5对AMMC-7721细胞凋亡的影响 | 第54页 |
| 4 ARK5对AMMC-7721细胞侵袭能力的影响 | 第54-55页 |
| 5 ARK5对AMMC-7721细胞迁移能力的影响 | 第55-57页 |
| 6 ARK5对AMMC-7721细胞Caspase-3 活性的影响 | 第57页 |
| 三 讨论 | 第57-61页 |
| 四 小结 | 第61-62页 |
| 第三章 ARK5与肝癌细胞增殖和侵袭作用机制的研究 | 第62-74页 |
| 一 材料与方法 | 第63-66页 |
| 1 材料 | 第63-64页 |
| 1.1 细胞株 | 第63页 |
| 1.2 细胞培养液 | 第63页 |
| 1.3 TGF-β1 抑制剂 | 第63页 |
| 1.4 主要实验试剂 | 第63页 |
| 1.5 主要实验仪器 | 第63-64页 |
| 2 方法 | 第64-66页 |
| 2.1 细胞培养基冻存 | 第64页 |
| 2.2 实验分组 | 第64页 |
| 2.3 BrdU细胞增殖实验 | 第64-65页 |
| 2.4 Transwe II小室法检测加入抑制剂后对细胞的侵袭能力 | 第65页 |
| 2.5 细胞划痕实验检测加入抑制剂后对细胞的迁移能力 | 第65-66页 |
| 2.6 western blot检测加入抑制剂后细胞中TGF-β1、Akt、ARK5蛋白的表达 | 第66页 |
| 2.7 统计学分析 | 第66页 |
| 二 结果 | 第66-69页 |
| 1 RrdU细胞增殖实验结果 | 第66-67页 |
| 2 Transwe II小室法实验结果 | 第67-68页 |
| 3 细胞划痕实验结果 | 第68-69页 |
| 4 western blot检测结果 | 第69页 |
| 三 讨论 | 第69-73页 |
| 四 小结 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 综述 | 第82-98页 |
| 综述参考文献 | 第91-98页 |
| 附录 英文缩略词表 | 第98-100页 |
| 个人简历、在校期间发表的学术论文与研究成果 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
