| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 前言 | 第13-25页 |
| 1.1 棉花概述 | 第13-14页 |
| 1.2 植物激素对棉花纤维起始及伸长的影响 | 第14-16页 |
| 1.2.1 赤霉素(Gibberellins,GA) | 第14页 |
| 1.2.2 生长素(Auxin,IAA) | 第14页 |
| 1.2.3 油菜素内酯(Brassinosteroid,BR) | 第14-15页 |
| 1.2.4 乙烯(Ethylene) | 第15页 |
| 1.2.5 细胞分裂素(Cytokinin) | 第15页 |
| 1.2.6 脱落酸(ABA) | 第15-16页 |
| 1.2.7 茉莉酸(Jasmonic acid,JA) | 第16页 |
| 1.3 棉花纤维伸长机制的研究 | 第16-18页 |
| 1.3.1 膨胀压影响纤维伸长 | 第16-17页 |
| 1.3.2 细胞骨架相关基因影响纤维伸长 | 第17页 |
| 1.3.3 细胞壁相关基因影响纤维伸长 | 第17-18页 |
| 1.4 棉花纤维起始与伸长相关转录因子的研究 | 第18-20页 |
| 1.4.1 棉花MYB蛋白与纤维发育 | 第18-19页 |
| 1.4.2 棉花HD-Zip蛋白与纤维发育 | 第19-20页 |
| 1.4.3 棉花WD40蛋白与纤维发育 | 第20页 |
| 1.4.4 棉花bHLH蛋白与纤维发育 | 第20页 |
| 1.5 bHLH转录因子与细胞伸长 | 第20-24页 |
| 1.6 立题依据和研究意义 | 第24-25页 |
| 第二章 GhFP1基因克隆鉴定及其表达分析 | 第25-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 GhFP1基因的cDNA | 第25页 |
| 2.1.3 菌种和载体 | 第25页 |
| 2.1.4 工具酶及试剂盒 | 第25页 |
| 2.1.5 常用存储液及缓冲液 | 第25页 |
| 2.1.6 DNA抽提试剂 | 第25页 |
| 2.1.7 RNA抽提试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.8 GUS染液配法 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-31页 |
| 2.2.1 GhFP1基因及其编码蛋白序列分析 | 第26页 |
| 2.2.2 感受态的制备及转化 | 第26-27页 |
| 2.2.3 棉花基因组DNA提取 | 第27-28页 |
| 2.2.4 棉花各组织RNA提取 | 第28-29页 |
| 2.2.5 棉花各组织RNA纯化 | 第29页 |
| 2.2.6 RNA的反转录 | 第29页 |
| 2.2.7 实时定量PCR分析 | 第29-30页 |
| 2.2.8 GhFP1启动子的分离 | 第30页 |
| 2.2.9 转基因棉花遗传转化 | 第30-31页 |
| 2.2.10 GUS染色及观察 | 第31页 |
| 2.3 实验结果 | 第31-35页 |
| 2.3.1 GhFP1蛋白序列分析 | 第31页 |
| 2.3.2 GhFP1基因在棉花组织中的表达分析 | 第31-32页 |
| 2.3.3 GhFP1P：：GUS转基因棉花组织化学染色分析 | 第32-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-36页 |
| 2.4.1 GhFP1编码一个bHLH蛋白 | 第35页 |
| 2.4.2 GhFP1在棉花各组织中均有表达 | 第35-36页 |
| 第三章 GhFP1蛋白亚细胞定位及其过量表达转基因拟南芥表型分析 | 第36-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第36页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第36页 |
| 3.1.2 菌种及质粒 | 第36页 |
| 3.1.3 工具酶及试剂盒 | 第36页 |
| 3.1.4 常用存储液及缓冲液 | 第36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-38页 |
| 3.2.1 载体构建 | 第36页 |
| 3.2.2 农杆菌感受态制备及转化 | 第36页 |
| 3.2.3 拟南芥的培养及转化 | 第36-37页 |
| 3.2.4 拟南芥基因组DNA的提取及转基因拟南芥鉴定 | 第37页 |
| 3.2.5 拟南芥表皮毛形态观察 | 第37-38页 |
| 3.3 实验结果 | 第38-42页 |
| 3.3.1 GhFP1：eGFP融合表达及GhFP1过量表达载体的构建 | 第38页 |
| 3.3.2 GhFP1蛋白在拟南芥中的亚细胞定位 | 第38-40页 |
| 3.3.3 GhFP1过量表达影响拟南芥表皮毛发育 | 第40-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-43页 |
| 第四章 GhFP1在棉花纤维发育中的功能分析 | 第43-64页 |
| 4.1 实验材料 | 第43-44页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第43页 |
| 4.1.2 菌种 | 第43页 |
| 4.1.3 工具酶及试剂盒 | 第43页 |
| 4.1.4 常用存储液及缓冲液 | 第43-44页 |
| 4.2 实验方法 | 第44-48页 |
| 4.2.1 载体构建 | 第44页 |
| 4.2.2棉花转化 | 第44页 |
| 4.2.3 转基因棉花鉴定 | 第44页 |
| 4.2.4 大肠杆菌BL2.1感受态制备 | 第44页 |
| 4.2.5 GhFP1蛋白原核表达纯化 | 第44页 |
| 4.2.6 GhFP1抗体制备及纯化 | 第44-45页 |
| 4.2.7 棉花纤维蛋白的提取及Western检测 | 第45页 |
| 4.2.8 酵母感受态的制备及转化 | 第45-46页 |
| 4.2.9 GhFP1转录激活分析 | 第46页 |
| 4.2.10 EMSA实验 | 第46-47页 |
| 4.2.11 染色质免疫共沉淀 | 第47-48页 |
| 4.2.12 转录组测序分析 | 第48页 |
| 4.3 实验结果 | 第48-61页 |
| 4.3.1 GhFP1过量表达及RNAi载体的构建 | 第48-49页 |
| 4.3.2 转基因棉花鉴定 | 第49-53页 |
| 4.3.3 成熟纤维长度比较 | 第53-54页 |
| 4.3.4 GhFP1过量表达影响纤维中BR相关基因的表达 | 第54-55页 |
| 4.3.5 GhFP1过量增强了对BR合成抑制剂BRZ的耐受 | 第55-56页 |
| 4.3.6 GhFP1具有转录激活能力 | 第56页 |
| 4.3.7 GhFP1能与GhCPD、GhDWF4启动子上的E-box结合 | 第56-59页 |
| 4.3.8 转录组分析 | 第59-61页 |
| 4.4 讨论 | 第61-64页 |
| 4.4.1 获得了GhFP1 RNAi转基因植株,但没有收获到T1代种子 | 第61页 |
| 4.4.2 GhFP1对纤维发育的调控 | 第61-64页 |
| 第五章 棉花bHLH/HLH家族蛋白的相互作用分析 | 第64-75页 |
| 5.1 实验材料 | 第64页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第64页 |
| 5.1.2 菌种 | 第64页 |
| 5.1.3 工具酶及试剂盒 | 第64页 |
| 5.1.4 常用存储液及缓冲液 | 第64页 |
| 5.2 实验方法 | 第64-65页 |
| 5.2.1 转录激活分析 | 第64页 |
| 5.2.2 蛋白的原核表达 | 第64页 |
| 5.2.3 酵母双杂交试验 | 第64-65页 |
| 5.2.4 Pull-down实验 | 第65页 |
| 5.3 实验结果 | 第65-71页 |
| 5.3.1 GhFP1蛋白通过形成同源二聚体与G-box发生相互作用 | 第65-66页 |
| 5.3.2 棉花中可能与GhFP1有关的其他bHLH/HLH基因 | 第66-68页 |
| 5.3.3 棉花bHLH/HLH基因在纤维中的表达分析 | 第68-69页 |
| 5.3.4 棉花bHLH/HLH蛋白间的相互作用 | 第69-70页 |
| 5.3.5 GhIBH2、GhIBH3对GhFP1功能的影响 | 第70-71页 |
| 5.4 讨论 | 第71-75页 |
| 5.4.1 棉花bHLH/HLH家族基因参与纤维发育 | 第71-72页 |
| 5.4.2 棉花bHLH/HLH蛋白间的相互作用影响其功能发挥 | 第72-75页 |
| 结论 | 第75-76页 |
| 本论文的主要创新点 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-88页 |
| 附录 | 第88-96页 |
| 博士期间撰写及已发表的论文 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
