摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-16页 |
图表清单 | 第16-18页 |
英文缩略表 | 第18-20页 |
第一章 引言 | 第20-39页 |
·病原学研究进展 | 第21-29页 |
·PRRSV 的病毒粒子分类及其形态学结构 | 第21页 |
·PRRSV 的基因组结构及蛋白表达 | 第21-22页 |
·PRRSV 的主要结构蛋白 | 第22-25页 |
·GP5 蛋白 | 第23页 |
·M 蛋白 | 第23-25页 |
·N 蛋白 | 第25页 |
·PRRSV 的次要结构蛋白 | 第25-28页 |
·GP2a 蛋白 | 第26-27页 |
·E(GP2b)蛋白 | 第27页 |
·GP3 蛋白 | 第27-28页 |
·GP4 蛋白 | 第28页 |
·我国 PRRSV 的流行情况及流行株的分子生物学特点 | 第28-29页 |
·PRRSV 的感染 | 第29-31页 |
·PRRSV 感染的细胞生物学 | 第29-30页 |
·PRRSV 感染的模式及机体的免疫应答 | 第30-31页 |
·PRRSV 感染后的免疫应答 | 第31-34页 |
·PRRSV 感染后的先天性免疫应答 | 第31-32页 |
·PRRSV 感染后的体液免疫应答 | 第32-33页 |
·PRRSV 感染后的细胞免疫应答 | 第33-34页 |
·流式细胞技术 | 第34-36页 |
·流式细胞技术简介 | 第34页 |
·流式细胞技术在病毒研究中的应用 | 第34-36页 |
·细胞表面分子的检测和分析 | 第34-35页 |
·细胞内或者细胞核内抗原的检测和分析 | 第35页 |
·细胞凋亡的检测与分析 | 第35页 |
·DNA 含量检测与细胞周期的分析 | 第35页 |
·细胞增殖的检测与分析 | 第35-36页 |
·细胞毒的检测与分析 | 第36页 |
·ELISPOT 技术 | 第36-38页 |
·ELISPOT 技术概述 | 第36-37页 |
·ELISPOT 技术应用 | 第37-38页 |
·疫苗开发 | 第37页 |
·临床疾病的诊断 | 第37页 |
·基础免疫学研究 | 第37-38页 |
·研究的目的与意义 | 第38-39页 |
第二章 PRRSV 感染后猪体内细胞因子变化研究 | 第39-55页 |
·实验材料 | 第40页 |
·毒株 | 第40页 |
·实验动物 | 第40页 |
·试剂与仪器 | 第40页 |
·实验方法 | 第40-46页 |
·病毒 TCID50 的测定 | 第40-41页 |
·试验用仔猪的检测 | 第41-42页 |
·血清的采集 | 第41页 |
·血清中 RNA 的提取 | 第41页 |
·RNA 反转录成 DNA | 第41页 |
·PCR 检测 | 第41页 |
·ELISA 检测 | 第41-42页 |
·试验仔猪的分组和接毒 | 第42页 |
·体温的测定及状态的观察 | 第42页 |
·血清及病料的采集 | 第42页 |
·血清中病毒含量的检测 | 第42-43页 |
·血清中细胞因子的检测 | 第43-46页 |
·血清中 IL-1β含量的检测 | 第43页 |
·血清中 IL-4 含量的检测 | 第43-44页 |
·血清中 IL-6 含量的检测 | 第44页 |
·血清中 IL-8 含量的检测 | 第44-45页 |
·血清中 IL-10 含量的检测 | 第45页 |
·血清中 TNF-α含量的检测 | 第45-46页 |
·实验结果 | 第46-51页 |
·体温的测定及仔猪的状态 | 第46-47页 |
·血清中病毒含量检测结果 | 第47页 |
·血清中 IL-1β含量检测结果 | 第47-48页 |
·血清中 IL-4 含量检测结果 | 第48页 |
·血清中 IL-6 含量检测结果 | 第48-49页 |
·血清中 IL-8 含量检测结果 | 第49-50页 |
·血清中 IL-10 含量检测结果 | 第50页 |
·血清中 TNF-α含量检测结果 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51-55页 |
第三章 PRRS 强弱毒对不同 PBMCs 细胞嗜性差异的研究 | 第55-72页 |
·实验材料 | 第56-57页 |
·毒株 | 第56页 |
·抗体 | 第56-57页 |
·实验动物 | 第57页 |
·试剂与仪器 | 第57页 |
·实验方法 | 第57-59页 |
·病毒 TCID50 的测定 | 第57页 |
·试验用仔猪的检测 | 第57页 |
·试验仔猪的分组和接毒 | 第57-58页 |
·体温的测定及状态的观察 | 第58页 |
·血清及病料的采集 | 第58页 |
·血清中病毒含量的检测 | 第58页 |
·外周血细胞的分离 | 第58-59页 |
·采血 | 第58页 |
·分离 PBMCs | 第58-59页 |
·免疫双染色法及流式分析 | 第59页 |
·实验结果 | 第59-69页 |
·体温的测定及仔猪的状态 | 第59页 |
·血清中病毒含量检测结果 | 第59-60页 |
·PRRSV 强弱毒对 CD3+T 细胞细胞嗜性的差异 | 第60-61页 |
·PRRSV 强弱毒对 CD4+T 细胞细胞嗜性的差异 | 第61-62页 |
·PRRSV 强弱毒对 CD8+T 细胞细胞嗜性的差异 | 第62页 |
·PRRSV 强弱毒对 B 细胞细胞嗜性的差异 | 第62-64页 |
·PRRSV 强弱毒对单核细胞细胞嗜性的差异 | 第64-65页 |
·炎性细胞的产生情况 | 第65-69页 |
·讨论 | 第69-72页 |
第四章 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 M 蛋白 T 细胞表位的初步鉴定 | 第72-96页 |
·实验材料 | 第73-74页 |
·毒株 | 第73页 |
·实验动物 | 第73-74页 |
·试剂与仪器 | 第74页 |
·肽的设计与合成 | 第74页 |
·实验方法 | 第74-80页 |
·病毒 TCID50 的测定 | 第74页 |
·试验用仔猪的检测 | 第74-76页 |
·试验仔猪的分组和接毒 | 第76页 |
·体温的测定及状态的观察 | 第76页 |
·PRRSV 抗体的检测 | 第76页 |
·外周血细胞的分离 | 第76-77页 |
·采血 | 第76-77页 |
·分离 PBMCs | 第77页 |
·PBMCs 的冻存 | 第77页 |
·肽的分组 | 第77-79页 |
·第一轮 ELISPOT 实验分组 | 第77-78页 |
·第二轮 ELISPOT 实验分组 | 第78-79页 |
·第三轮 ELISPOT 实验 | 第79页 |
·ELISPOT 实验 | 第79页 |
·数据分析 | 第79页 |
·用 Taq Man-MGB 荧光定量 RT-PCR 方法检测 IFN-γ的含量 | 第79-80页 |
·实验结果 | 第80-91页 |
·体温的测定及仔猪的状态 | 第80-81页 |
·PRRSV 抗体的检测结果 | 第81-82页 |
·ELISPOT 技术删选具有潜在 T 细胞表位的短肽 | 第82-83页 |
·用 IFN-γ Real-time PCR 方法进一步验证鉴定出的肽段 | 第83页 |
·鉴定出的 M 蛋白上含有潜在 T 细胞表位的肽段在北美型 PRRSV株间的保守性分析 | 第83-91页 |
·讨论 | 第91-96页 |
参考文献 | 第96-112页 |
致谢 | 第112-114页 |
作者简介 | 第114页 |