| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 低温胁迫对植物的影响 | 第12-14页 |
| 1.1.1 低温胁迫对植物膜系统的影响 | 第12-13页 |
| 1.1.2 低温胁迫对植物体内光合作用的影响 | 第13页 |
| 1.1.3 低温胁迫对代谢的影响 | 第13-14页 |
| 1.2 水稻冷害的类型 | 第14页 |
| 1.3 水稻不同生育时期耐冷性评价及鉴定方法 | 第14-16页 |
| 1.3.1 发芽期耐冷性 | 第14-15页 |
| 1.3.2 芽期耐冷性 | 第15页 |
| 1.3.3 幼苗期耐冷性 | 第15页 |
| 1.3.4 移栽期耐冷性 | 第15页 |
| 1.3.5 孕穗期耐冷性 | 第15-16页 |
| 1.3.6 开花期耐冷性 | 第16页 |
| 1.3.7 成熟期耐冷性 | 第16页 |
| 1.4 植物耐冷生理机制 | 第16-18页 |
| 1.4.1 Ca~(2+)在冷信号转导中的作用 | 第16-17页 |
| 1.4.2 ABA在冷信号转导中的作用 | 第17页 |
| 1.4.3 植物低温信号转导过程 | 第17-18页 |
| 1.5 Rubisco | 第18-19页 |
| 1.5.1 Rubisco的结构及功能 | 第18-19页 |
| 1.5.2 Rubisco小亚基基因Osrbc S在植物抗逆中的应用 | 第19页 |
| 1.6 基因工程在提高植物抗逆性上的应用 | 第19-20页 |
| 1.7 Gateway克隆技术 | 第20页 |
| 1.8 研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第2章 材料与方法 | 第22-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 实验菌株 | 第22页 |
| 2.2 主要试剂及仪器 | 第22-24页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.2 实验仪器与设备 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-38页 |
| 2.3.1 相关实验试剂配制 | 第24-25页 |
| 2.3.2 供试水稻品种苗期耐冷性鉴定 | 第25页 |
| 2.3.3 供试水稻品种孕穗期耐冷性鉴定 | 第25页 |
| 2.3.4 Real-Time PCR验证 | 第25-26页 |
| 2.3.5 水稻K131苗期耐低温候选基因的确定 | 第26-27页 |
| 2.3.6 Osrbc S3基因的克隆 | 第27-31页 |
| 2.3.7 Real-Time PCR分析Osrbc S3基因 | 第31-32页 |
| 2.3.8 水稻K131和L11苗期各生理指标测定 | 第32-34页 |
| 2.3.9 Osrbc S3基因植物表达载体的构建 | 第34-35页 |
| 2.3.10 水稻的遗传转化及转基因植株的鉴定 | 第35-38页 |
| 第3章 结果与分析 | 第38-64页 |
| 3.1 供试水稻品种苗期耐冷性 | 第38-40页 |
| 3.1.1 苗期耐冷性 | 第38页 |
| 3.1.2 孕穗期耐冷性 | 第38-39页 |
| 3.1.3 苗期和芽期、孕穗期耐冷性的相关关系 | 第39-40页 |
| 3.2 水稻K131苗期耐冷响应基因的确定 | 第40页 |
| 3.2.1 水稻低温响应基因的确定 | 第40页 |
| 3.2.2 Real-Time PCR验证 | 第40页 |
| 3.3 Osrbcs3基因的克隆和分析 | 第40-53页 |
| 3.3.1 水稻苗期RNA的提取及反转录 | 第40-41页 |
| 3.3.2 Osrbc S3基因CDS全长的扩增 | 第41-42页 |
| 3.3.3 Osrbc S3基因克隆载体的构建 | 第42-44页 |
| 3.3.4 Osrbc S3基因生物信息学分析 | 第44-53页 |
| 3.4 Osrbc S3基因的Real-Time PCR检测 | 第53-55页 |
| 3.4.1 Real-Time PCR引物的确定 | 第53-54页 |
| 3.4.2 Osrbc S3基因在低温胁迫下的表达量 | 第54-55页 |
| 3.5 水稻K131和L11苗期在低温条件下各生理指标的测定结果 | 第55-58页 |
| 3.5.1 Rubisco活性 | 第55页 |
| 3.5.2 总叶绿素、叶绿素a、叶绿素b含量 | 第55-57页 |
| 3.5.3 MDA含量 | 第57页 |
| 3.5.4 脯氨酸含量 | 第57-58页 |
| 3.5.5 POD活性 | 第58页 |
| 3.6 Osrbc S3基因对水稻L11的遗传转化及转基因植株的鉴定 | 第58-64页 |
| 3.6.1 表达载体的构建 | 第58-60页 |
| 3.6.2 重组质粒导入根瘤农杆菌 | 第60页 |
| 3.6.3 L11愈伤组织的诱导及转化 | 第60-61页 |
| 3.6.4 转基因植株的PCR鉴定 | 第61-64页 |
| 第4章 讨论 | 第64-67页 |
| 4.1 水稻品种苗期耐冷性 | 第64页 |
| 4.2 K131和L11在低温胁迫下的生理指标 | 第64-65页 |
| 4.3 水稻耐冷响应基因的选择 | 第65页 |
| 4.4 Osrbc S3基因的克隆及在低温下的表达量 | 第65-66页 |
| 4.5 下一步的工作展望 | 第66-67页 |
| 第5章 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 附录 | 第76-81页 |
| 附录1 培养基的配制 | 第76-79页 |
| 附录2 Real-time PCR验证 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
