| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 前言 | 第10-22页 |
| 1.1 水稻耐冷机理研究进展 | 第10-14页 |
| 1.1.1 水稻低温冷害的定义 | 第10页 |
| 1.1.2 水稻低温冷害的分类 | 第10-11页 |
| 1.1.3 水稻耐冷性鉴定评价方法 | 第11页 |
| 1.1.4 水稻各生育期耐冷性间的关系 | 第11-12页 |
| 1.1.5 水稻低温冷害生理变化机制 | 第12-14页 |
| 1.2 活性氧清除系统与低温胁迫的关系 | 第14-16页 |
| 1.2.1 活性氧的定义及分类 | 第14-15页 |
| 1.2.2 低温胁迫下活性氧清除系统的作用 | 第15-16页 |
| 1.3 GST在植物抗逆中的作用 | 第16-20页 |
| 1.3.1 植物GST的存在及分类 | 第16-17页 |
| 1.3.2 GST的结构 | 第17页 |
| 1.3.3 GST的功能 | 第17-20页 |
| 1.3.4 GST酶促反应及反应机制 | 第20页 |
| 1.4 水稻耐冷基因工程的现状 | 第20-21页 |
| 1.5 实验研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 第2章 材料与方法 | 第22-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 供试植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 菌株及质粒载体 | 第22页 |
| 2.1.3 实验试剂及试剂盒 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-38页 |
| 2.2.1 实验技术路线 | 第23-24页 |
| 2.2.2 相关实验培养基及试剂配制 | 第24页 |
| 2.2.3 水稻品种不同生育期耐冷性鉴定及相关性分析 | 第24页 |
| 2.2.4 Os GST基因的克隆及生物信息学分析 | 第24-30页 |
| 2.2.5 水稻品种Os GST基因表达分析 | 第30-32页 |
| 2.2.6 低温胁迫下水稻谷胱甘肽S-转移酶酶活的测定 | 第32-33页 |
| 2.2.7 低温胁迫下水稻生理指标的测定 | 第33-35页 |
| 2.2.8 Os GST基因植物表达载体的构建 | 第35-36页 |
| 2.2.9 农杆菌介导的遗传转化及转基因愈伤组织的初步鉴定 | 第36-38页 |
| 第3章 结果与分析 | 第38-62页 |
| 3.1 水稻品种耐冷性鉴定及相关性分析 | 第38-40页 |
| 3.1.1 水稻品种芽期耐冷性鉴定 | 第38-39页 |
| 3.1.2 水稻芽期耐冷性与苗、孕穗期耐冷性的关系 | 第39-40页 |
| 3.2 Os GST基因的克隆 | 第40-42页 |
| 3.2.1 水稻芽期总RNA的提取 | 第40-41页 |
| 3.2.2 Os GST基因全长的扩增 | 第41-42页 |
| 3.2.3 Os GST基因克隆载体的构建 | 第42页 |
| 3.3 Os GST生物信息学分析 | 第42-52页 |
| 3.3.1 Os GST基因c DNA全长序列分析 | 第42-47页 |
| 3.3.2 Os GST蛋白多重系列比对 | 第47-48页 |
| 3.3.3 Os GST蛋白的系统发育分析 | 第48-49页 |
| 3.3.4 Os GST蛋白的理化性质及跨膜结构预测 | 第49-51页 |
| 3.3.5 Os GST蛋白信号肽及亚细胞定位预测 | 第51-52页 |
| 3.4 水稻品种Os GST基因表达分析 | 第52-54页 |
| 3.4.1 目的基因实时荧光定量PCR引物 | 第52-53页 |
| 3.4.2 低温胁迫下Os GST表达量 | 第53-54页 |
| 3.5 低温胁迫下水稻GST酶活 | 第54页 |
| 3.6 低温胁迫下水稻生理指标 | 第54-57页 |
| 3.6.1 脯氨酸含量 | 第54-55页 |
| 3.6.2 低温胁迫下水稻丙二醛含量 | 第55-56页 |
| 3.6.3 低温胁迫下水稻过氧化物酶和过氧化氢酶活性 | 第56-57页 |
| 3.7 Os GST基因植物表达载体构建 | 第57-58页 |
| 3.7.1 超表达载体构建 | 第57-58页 |
| 3.7.2 重组质粒导入农杆菌 | 第58页 |
| 3.8 遗传转化 | 第58-62页 |
| 3.8.1 农杆菌对水稻愈伤组织的转化 | 第58-59页 |
| 3.8.2 龙粳11遗传转化 | 第59页 |
| 3.8.3 转基因抗性愈伤组织鉴定 | 第59-62页 |
| 第4章 讨论 | 第62-64页 |
| 4.1 水稻耐冷性种质的鉴定筛选 | 第62页 |
| 4.2 Os GST序列核酸差异对低温胁迫的调节作用 | 第62-63页 |
| 4.3 下一步的工作展望 | 第63-64页 |
| 第5章 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 附录 | 第73-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
