| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 符号说明 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-29页 |
| 1. GT结合蛋白 | 第12-16页 |
| 1.1 G蛋白的基本结构 | 第12-13页 |
| 1.2 G蛋白的分类 | 第13页 |
| 1.3 Gs蛋白的调节机制 | 第13-14页 |
| 1.4 G蛋白参与调节的跨膜信号转导体系 | 第14-16页 |
| 2. Gsα概述 | 第16-22页 |
| 2.1 GNAS基因背景 | 第16页 |
| 2.2 GNAS基因的其他转录产物 | 第16-18页 |
| 2.3 GNAS基因的印记 | 第18页 |
| 2.4 Gsα蛋白的功能 | 第18-19页 |
| 2.5 Gsα失活突变与人类疾病 | 第19页 |
| 2.6 Gsα完全基因敲除小鼠的研究 | 第19-22页 |
| 3. 小鼠生殖系统简介 | 第22-27页 |
| 3.1 雌性小鼠生殖系统简介 | 第22-24页 |
| 3.2 雄性小鼠生殖系统简介 | 第24-26页 |
| 3.3 受精及早期卵裂 | 第26-27页 |
| 4. 基因敲除简介 | 第27-28页 |
| 基因敲除的分类 | 第27-28页 |
| 5. 利用条件性基因敲除技术研究生殖系统中Gsα的功能 | 第28-29页 |
| 实验材料 | 第29-31页 |
| 1. 实验小鼠 | 第29页 |
| 2. 主要试剂 | 第29-31页 |
| 3. 主要仪器 | 第31页 |
| 实验方法 | 第31-38页 |
| 1. 生殖系统中特异性敲除Gsα小鼠的获得 | 第31-32页 |
| 2. 小鼠基因型的鉴定 | 第32-33页 |
| 3. 组织石蜡切片 | 第33页 |
| 4. HE染色 | 第33-34页 |
| 5. 母鼠动情周期检测 | 第34-35页 |
| 6. 卵母细胞体外成熟实验 | 第35页 |
| 7. 受精后不同时期小鼠胚胎的获得 | 第35-37页 |
| 7.1 小鼠自然交配的安排 | 第35页 |
| 7.2 收集E0.5受精卵 | 第35-36页 |
| 7.3 收集2-细胞到桑椹胚阶段的胚胎(E1.5-E2.5) | 第36-37页 |
| 7.4 收集E3.5囊胚 | 第37页 |
| 8. 小鼠2-细胞期胚胎BrUTP掺入实验 | 第37-38页 |
| 实验结果 | 第38-49页 |
| 1. Gsα~(-/-) (Zp3-Cre)小鼠实验结果 | 第38-46页 |
| 1.1 Gsα (Zp3-Cre)敲除小鼠的基因型鉴定 | 第38-39页 |
| 1.2 ROSA26R-Cre小鼠的鉴定 | 第39页 |
| 1.3 Zp3-Cre表达谱式验证 | 第39-40页 |
| 1.4 Gsα~(-/-)母鼠不育 | 第40页 |
| 1.5 Gsα~(-/-)母鼠卵巢中各级卵泡发育正常 | 第40-41页 |
| 1.6 Gsα~(-/-)母鼠动情周期正常 | 第41-42页 |
| 1.7 Gsα~(-/-)母鼠的卵母细胞成熟正常 | 第42页 |
| 1.8 来自于Gsα~(-/-)母鼠的胚胎发育停滞于2-细胞时期 | 第42-45页 |
| 1.9 Gsα~(-/-)胚胎的转录活性降低 | 第45-46页 |
| 2. Gsα (Ddx4-Cre)小鼠实验结果 | 第46-49页 |
| 2.1 Gsα(Ddx4-Cre)敲除小鼠的基因型鉴定 | 第46-47页 |
| 2.2 Ddx4-Cre表达谱式验证 | 第47-48页 |
| 2.3 Gsα~(-/-)母鼠卵巢中各级卵泡发育正常 | 第48页 |
| 2.4 Gsα~(-/-)公鼠睾丸中精子发育正常 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49页 |
| 讨论 | 第49-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第61页 |
