摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第12-24页 |
1.1 2-苯乙醇的合成方法 | 第12-13页 |
1.2 2-苯乙醇产物抑菌作用是酵母生物合成2-苯乙醇的瓶颈之一 | 第13-14页 |
1.3 2-苯乙醇对微生物的毒力机制 | 第14-15页 |
1.3.1 对细胞膜的影响 | 第14-15页 |
1.3.2 抑制生物大分子的合成 | 第15页 |
1.3.3 抑制代谢活力 | 第15页 |
1.3.4 对其他生理反应 | 第15页 |
1.4 酵母酒精耐受性机理的研究进展 | 第15-19页 |
1.4.1 细胞膜和细胞壁 | 第16页 |
1.4.2 氨基酸 | 第16-17页 |
1.4.3 海藻糖 | 第17页 |
1.4.4 V-ATP酶和过氧化物酶 | 第17-18页 |
1.4.5 热激蛋白 | 第18页 |
1.4.6 转录因子和信号传导途径 | 第18-19页 |
1.5 诱变育种提高酵母酒精耐受性 | 第19-21页 |
1.6 提高酵母菌酒精耐受性的分子方法 | 第21-23页 |
1.6.1 染色体重排 | 第21-22页 |
1.6.2 原生质体融合技术 | 第22-23页 |
1.7 选题背景和意义 | 第23-24页 |
第二章 紫外诱变提高酵母2-PE耐受性和产量 | 第24-38页 |
2.1 材料 | 第24-25页 |
2.1.1 菌株 | 第24页 |
2.1.2 培养基 | 第24-25页 |
2.1.3 主要试剂和仪器 | 第25页 |
2.2 方法 | 第25-28页 |
2.2.1 CWY132致死率曲线的制作 | 第25-26页 |
2.2.2 诱变处理及耐受性突变菌株的液体筛选方法 | 第26-27页 |
2.2.3 耐受性菌株的固体筛选模型 | 第27页 |
2.2.4 耐受性与2-PE产量关系的考察 | 第27-28页 |
2.3 结果与讨论 | 第28-36页 |
2.3.1 CWY132的紫外诱变致死率曲线 | 第28-29页 |
2.3.2 耐受性突变菌株的筛选结果 | 第29-33页 |
2.3.3 2-PE耐受性突变菌株的遗传稳定性 | 第33-35页 |
2.3.4 耐受性与2-PE产量关系的考察 | 第35-36页 |
2.4 小结 | 第36-38页 |
第三章 氯化锂紫外复合诱变筛选耐受性高产菌株 | 第38-48页 |
3.1 材料与方法: | 第38-39页 |
3.1.1 菌株 | 第38页 |
3.1.2 培养基 | 第38-39页 |
3.1.3 主要试剂和仪器 | 第39页 |
3.2 方法 | 第39-41页 |
3.2.1 致死率曲线的制作 | 第39-40页 |
3.2.2 氯化锂浓度的确定 | 第40页 |
3.2.3 氯化锂紫外复合诱变 | 第40-41页 |
3.2.4 耐受性与2-PE产量关系的考察 | 第41页 |
3.3 结果 | 第41-46页 |
3.3.1 最佳氯化锂浓度和紫外照射时间的确定结果 | 第41-42页 |
3.3.2 氯化锂紫外诱变筛选结果 | 第42-45页 |
3.3.3 耐受性突变菌株的产量考察 | 第45-46页 |
3.4 小结 | 第46-48页 |
第四章 ~(60)Coγ射线诱变育种 | 第48-56页 |
4.1 材料 | 第48-49页 |
4.1.1 菌株 | 第48页 |
4.1.2 仪器 | 第48页 |
4.1.3 药品 | 第48-49页 |
4.2 方法 | 第49-50页 |
4.2.1 样品处理 | 第49页 |
4.2.2 ~(60)Coγ射线注入 | 第49页 |
4.2.3 耐受性突变菌株筛选 | 第49-50页 |
4.2.4 耐受性突变菌株的产量考察 | 第50页 |
4.3 结果与讨论 | 第50-55页 |
4.3.1 耐受性突变菌株的产量考察结果 | 第54-55页 |
4.4 小结 | 第55-56页 |
第五章 易错PCR法提高酵母对2-PE的耐受性 | 第56-66页 |
5.1 材料与方法 | 第56-57页 |
5.1.1 材料 | 第56页 |
5.1.2 培养基 | 第56-57页 |
5.1.3 引物 | 第57页 |
5.1.4 主要试剂和仪器 | 第57页 |
5.2 方法 | 第57-61页 |
5.2.1 酵母基因组的提取 | 第57-59页 |
5.2.2 易错PCR条件探索 | 第59-60页 |
5.2.3 PCR结果电泳分析 | 第60页 |
5.2.4 基因片段转化进入酵母菌株---醋酸锂法酵母转化 | 第60-61页 |
5.2.5 耐受性突变菌株的产量考察 | 第61页 |
5.3 结果与分析 | 第61-65页 |
5.3.1 基因组DNA电泳结果 | 第61-62页 |
5.3.2 易错PCR电泳结果 | 第62-63页 |
5.3.3 酵母转化筛选结果 | 第63-65页 |
5.3.4 耐受性突变菌株的产量考察结果 | 第65页 |
5.4 小结 | 第65-66页 |
第六章 总结与展望 | 第66-69页 |
6.1 总结 | 第66-67页 |
6.2 展望 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第73页 |