摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
文献综述 | 第11-24页 |
第一章 hTNF-α、hIFN-γ、CVH和鸡DAZL基因研究进展 | 第11-24页 |
1.1 肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的研究进展 | 第11-13页 |
1.1.1 肿瘤坏死因子-α的概述 | 第11页 |
1.1.2 肿瘤坏死因子-α的生化特性 | 第11-13页 |
1.1.3 肿瘤坏死因子-α基因组结构及表达 | 第13页 |
1.2 人γ干扰素(hIFN-γ)的研究进展 | 第13-16页 |
1.2.1 人γ干扰素(hIFN-γ)的概述 | 第13-14页 |
1.2.2 hIFN-γ的分子生物学特性 | 第14-15页 |
1.2.3 hIFN-γ的生物学作用 | 第15-16页 |
1.3 CVH基因研究进展 | 第16-19页 |
1.3.1 Vasa基因概述 | 第16-17页 |
1.3.2 Vasa基因功能及作用机理 | 第17-18页 |
1.3.3 Vasa基因的应用 | 第18页 |
1.3.4 CVH基因表达 | 第18-19页 |
1.4 DAZL基因研究进展 | 第19-22页 |
1.4.1 DAZL基因概述 | 第19页 |
1.4.2 DAZL基因的时空表达 | 第19-20页 |
1.4.3 鸡DAZL基因的保守表达 | 第20-21页 |
1.4.4 DAZL基因与分子标记 | 第21页 |
1.4.5 DAZL与生殖细胞调控 | 第21-22页 |
1.5 研究的目的与意义 | 第22-24页 |
实验研究 | 第24-59页 |
第二章 hTNF-α、hIFN-γ、CVH、鸡 DAZL 基因克隆 | 第24-47页 |
2.1 前言 | 第24页 |
2.2 材料与方法 | 第24-34页 |
2.2.1 仪器设备 | 第24页 |
2.2.2 实验试剂 | 第24-25页 |
2.2.3 常用溶液配制 | 第25页 |
2.2.4 hTNF-α、hIFN-γ基因克隆 | 第25-33页 |
2.2.5 CVH和鸡DAZL基因的克隆 | 第33-34页 |
2.3 结果与分析 | 第34-44页 |
2.3.1 hTNF-α、hIFN-γ基因的RT-PCR | 第34-36页 |
2.3.2 pMD18-T-hTNF-α重组质粒的构建 | 第36页 |
2.3.3 TNF-α基因测序结果 | 第36-37页 |
2.3.4 hTNF-α点突变PCR扩增 | 第37-38页 |
2.3.5 CVH和鸡DAZL基因PCR扩增 | 第38-39页 |
2.3.6 入门载体构建 | 第39-44页 |
2.4 讨论 | 第44-46页 |
2.5 小结 | 第46-47页 |
第三章 慢病毒表达载体构建及体外表达 | 第47-59页 |
3.1 前言 | 第47页 |
3.2 材料与方法 | 第47-53页 |
3.2.1 仪器设备 | 第47页 |
3.2.2 实验试剂 | 第47-48页 |
3.2.3 常用溶液配制 | 第48页 |
3.2.4 慢病毒表达载体构建 | 第48-49页 |
3.2.5 慢病毒表达载体去内毒素质粒中提 | 第49-50页 |
3.2.6 慢病毒包装及表达检测 | 第50-53页 |
3.3 结果与分析 | 第53-56页 |
3.3.1 慢病毒载体酶切鉴定与测序结果 | 第53-54页 |
3.3.2 去内毒素慢病毒载体质粒浓度及纯度测定 | 第54页 |
3.3.2 慢病毒载体表达检测 | 第54-56页 |
3.4 讨论 | 第56-58页 |
3.5 小结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简介 | 第67-68页 |
攻读硕士期间发表论文情况 | 第68页 |