| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 主要英文缩略词对照表 | 第8-9页 |
| 第1章 前言 | 第9-25页 |
| 1.1 miRNA的研究进展 | 第9-18页 |
| 1.1.1 miRNA的简介 | 第9页 |
| 1.1.2 miRNA的形成过程 | 第9-11页 |
| 1.1.3 miRNA的调控机制 | 第11-13页 |
| 1.1.4 miRNA的靶点预测 | 第13-15页 |
| 1.1.5 miRNA的功能 | 第15-16页 |
| 1.1.6 miRNA的与低氧 | 第16-17页 |
| 1.1.7 miR-147a | 第17-18页 |
| 1.2 低氧诱导因子（HIF）的研究进展 | 第18-24页 |
| 1.2.1 HIF-1α 的结构与功能 | 第18-20页 |
| 1.2.2 HIF-2α 的结构与功能 | 第20-21页 |
| 1.2.3 HIF-3α 的结构与功能 | 第21-22页 |
| 1.2.4 HIF-1α 与miRNA | 第22-23页 |
| 1.2.5 HIF-1α 与细胞生长 | 第23-24页 |
| 1.3 研究目的与研究内容 | 第24-25页 |
| 1.3.1 研究目的 | 第24页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第24-25页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第25-36页 |
| 2.1 实验材料和试剂 | 第25-29页 |
| 2.1.1 分子生物学材料与试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.2 细胞生物学材料与试剂 | 第26页 |
| 2.1.3 细胞生长检测试剂 | 第26页 |
| 2.1.4 蛋白免疫印迹材料与试剂 | 第26-29页 |
| 2.2 实验仪器与设备 | 第29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-36页 |
| 2.3.1 细胞的培养 | 第29-30页 |
| 2.3.2 细胞的转染 | 第30-31页 |
| 2.3.3 mRNA的提取 | 第31页 |
| 2.3.4 mRNA的反转录及Q-PCR | 第31-32页 |
| 2.3.5 miRNA的反转录及Q-PCR | 第32-33页 |
| 2.3.6 蛋白印迹 | 第33-34页 |
| 2.3.7 荧光报告载体的构建及检测 | 第34页 |
| 2.3.8 细胞生长实验 | 第34-35页 |
| 2.3.9 细胞克隆的形成实验 | 第35页 |
| 2.3.10 靶点预测方法 | 第35页 |
| 2.3.11 动物实验 | 第35页 |
| 2.3.12 统计学分析 | 第35-36页 |
| 第3章 低氧诱导的miR-147a抑制细胞的生长 | 第36-41页 |
| 3.1 低氧诱导miR-147a的表达 | 第36页 |
| 3.2 HIF-1α 调控miR-147a的表达 | 第36-37页 |
| 3.3 低氧诱导的miR-147a抑制细胞的生长 | 第37-40页 |
| 3.3.1 低氧下细胞生长受抑制 | 第38页 |
| 3.3.2 常氧下miR-147a抑制细胞生长与克隆的形成 | 第38-39页 |
| 3.3.3 低氧下miR-147a抑制细胞生长 | 第39-40页 |
| 3.4 本章小结 | 第40-41页 |
| 第4章 miR-147a促进HIF-1α 蛋白的积累 | 第41-47页 |
| 4.1 miR-147a促进HIF-1α 蛋白的积累 | 第41-44页 |
| 4.1.1 miR-147a在常氧和低氧下都可促进HIF-1α 的积累 | 第41-42页 |
| 4.1.2 miR-147a可以增强药物抑制HIF-1α 的降解 | 第42-43页 |
| 4.1.3 抑制低氧下miR-147a不积累HIF-1α | 第43-44页 |
| 4.2 过表达miR-147a不影响HIF-1α 的mRNA表达水平 | 第44-45页 |
| 4.3 miR-147a积累的HIF-1α 可以靶向下游基因的表达 | 第45-46页 |
| 4.4 本章小结 | 第46-47页 |
| 第5章 miR-147a通过靶向HIF-3α 影响细胞的生长 | 第47-57页 |
| 5.1 HIF-3α 是miR-147a的靶点 | 第47-51页 |
| 5.1.1 miR-147a靶基因的筛选与双荧光验证 | 第47-48页 |
| 5.1.2 miR-147a对靶基因的转录与翻译水平的调控 | 第48-49页 |
| 5.1.3 抑制内源性的miR-147a上调靶基因HIF-3α 蛋白水平 | 第49-50页 |
| 5.1.4 miR-147a靶基因敲除可以积累HIF-1α | 第50页 |
| 5.1.5 miR-147a通过靶向HIF-3α 积累HIF-1α | 第50-51页 |
| 5.2 靶基因的敲除抑制细胞的增殖 | 第51-53页 |
| 5.2.1 siHIF-3α 抑制HeLa细胞克隆的形成 | 第51-52页 |
| 5.2.2 siHIF-3α 抑制HeLa细胞的生长 | 第52-53页 |
| 5.3 miR-147a通过靶向HIF-3α 调节HIF-1α 抑制细胞生长 | 第53-55页 |
| 5.3.1 过表达HIF-1α 抑制HeLa细胞的生长 | 第53-54页 |
| 5.3.2 siHIF-1α 部分恢复siHIF-3α 引起的细胞生长抑制 | 第54-55页 |
| 5.4 本章小结 | 第55-57页 |
| 第6章 miR-147a抑制体内移植瘤的生长 | 第57-61页 |
| 6.1 miR-147a、siHIF-3α 抑制移植瘤的生长 | 第57-59页 |
| 6.1.1 miR-147a抑制移植瘤的生长 | 第57-58页 |
| 6.1.2 siHIF-3α 抑制移植瘤的生长 | 第58-59页 |
| 6.2 miR-147a、siHIF-3α 促进移植瘤中HIF-1α 蛋白的积累 | 第59-60页 |
| 6.3 本章小结 | 第60-61页 |
| 第7章 讨论与展望 | 第61-64页 |
| 7.1 HIF-1α 与miR-147a的正反馈调节作用 | 第62页 |
| 7.2 低氧诱导的miR-147a的多靶点性 | 第62-63页 |
| 7.3 HIF-1α 与肿瘤、细胞生长 | 第63页 |
| 7.4 展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第77页 |
