| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 英文缩略词表 | 第13-14页 |
| 1 前言 | 第14-30页 |
| 1.1 植物次生代谢物质概述 | 第15-18页 |
| 1.1.1 植物次生代谢物质 | 第15-16页 |
| 1.1.2 烟草次生代谢物质 | 第16-17页 |
| 1.1.3 植物次生代谢物质的应用及研究现状 | 第17-18页 |
| 1.2 ABC 转运蛋白 | 第18-23页 |
| 1.2.1 ABC 转运蛋白的结构与进化 | 第19-20页 |
| 1.2.2 ABC 转运蛋白的高级结构及作用机理 | 第20-21页 |
| 1.2.3 植物 ABC 转运蛋白 | 第21-23页 |
| 1.3 植物次生代谢物质的转运 | 第23-27页 |
| 1.3.1 ABC 转运蛋白对植物次生代谢物的转运 | 第23-26页 |
| 1.3.2 MATE 转运蛋白对植物次生代谢物的转运 | 第26-27页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第27-28页 |
| 1.5 本文研究的主要内容和技术路线 | 第28-30页 |
| 1.5.1 研究的主要内容 | 第28-29页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第29-30页 |
| 2 烟草 ABC 转运蛋白的鉴定及生物信息学分析 | 第30-50页 |
| 2.1 材料与方法 | 第30-31页 |
| 2.1.1 物种的基因组数据库 | 第30页 |
| 2.1.2 分析软件 | 第30页 |
| 2.1.3 分析方法 | 第30-31页 |
| 2.2 结果与分析 | 第31-48页 |
| 2.2.1 烟草 ABC 转运蛋白的鉴定与分类 | 第31-32页 |
| 2.2.2 烟草 ABC 转运蛋白结构特点 | 第32-39页 |
| 2.2.3 烟草 ABC 转运蛋白的亚细胞定位 | 第39页 |
| 2.2.4 烟草 ABC 转运蛋白的进化分析 | 第39-48页 |
| 2.3 结论与讨论 | 第48-50页 |
| 3 烟草烟碱转运蛋白候选基因 NtWBC13 的筛选与克隆 | 第50-74页 |
| 3.1 实验材料与试剂 | 第50-60页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第50页 |
| 3.1.2 分析软件 | 第50页 |
| 3.1.3 主要试剂及配制方法 | 第50-52页 |
| 3.1.4 主要实验仪器 | 第52页 |
| 3.1.5 方法与步骤 | 第52-60页 |
| 3.2 结果与分析 | 第60-71页 |
| 3.2.1 烟碱转运蛋白候选基因 NtWBC13 的表达分析 | 第60-62页 |
| 3.2.2 烟碱转运蛋白候选基因 NtWBC13 的克隆 | 第62-63页 |
| 3.2.3 烟草 NtWBC13 基因的序列分析 | 第63-66页 |
| 3.2.4 烟草 NtWBC13 基因的不同组织表达模式分析 | 第66-67页 |
| 3.2.5 烟草 NtWBC13 基因启动子的克隆与调控元件分析 | 第67-68页 |
| 3.2.6 pNtWBC13/GUS 表达载体构建与组织特异性表达分析 | 第68-71页 |
| 3.3 结论与讨论 | 第71-74页 |
| 4 烟碱转运蛋白候选基因 NtWBC13 的功能研究 | 第74-90页 |
| 4.1 材料与方法 | 第74-82页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第74页 |
| 4.1.2 主要试剂及配制方法 | 第74-75页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第75页 |
| 4.1.4 方法与步骤 | 第75-82页 |
| 4.2 结果与分析 | 第82-88页 |
| 4.2.1 NtWBC13 异源表达酵母的烟碱转运功能检测 | 第82-83页 |
| 4.2.2 NtWBC13 干扰载体的构建和农杆菌转化 | 第83-85页 |
| 4.2.3 NtWBC13-RNAi 转基因株的阳性鉴定 | 第85-86页 |
| 4.2.4 NtWBC13-RNAi 植株中烟碱含量的分析 | 第86-87页 |
| 4.2.5 NtWBC13-RNAi 植株中烟碱合成关键酶基因 PMT 的表达量分析 | 第87-88页 |
| 4.2.6 外源烟碱对 NtWBC13-RNAi 植株生长的影响分析 | 第88页 |
| 4.3 结论与讨论 | 第88-90页 |
| 5 烟草独脚金内酯转运蛋白基因 NtPDR6 的克隆与功能研究 | 第90-112页 |
| 5.1 材料与方法 | 第92-96页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第92页 |
| 5.1.2 主要试剂及配制方法 | 第92-93页 |
| 5.1.3 主要实验仪器 | 第93页 |
| 5.1.4 方法与步骤 | 第93-96页 |
| 5.2 结果与分析 | 第96-110页 |
| 5.2.1 烟草 NtPDR6 基因的克隆及序列分析 | 第96-98页 |
| 5.2.2 烟草 NtPDR6 基因的多序列比对和进化分析 | 第98-100页 |
| 5.2.3 烟草 NtPDR6 基因的诱导表达分析 | 第100-101页 |
| 5.2.4 烟草 NtPDR6 基因启动子克隆与调控元件分析 | 第101-102页 |
| 5.2.5 烟草 NtPDR6 基因的组织表达分析 | 第102-104页 |
| 5.2.6 烟草 NtPDR6-RNAi 载体的构建和农杆菌转化 | 第104-106页 |
| 5.2.7 NtPDR6-RNAi 转基因株的阳性鉴定和表型分析 | 第106-110页 |
| 5.3 结论与讨论 | 第110-112页 |
| 6 结论与展望 | 第112-116页 |
| 致谢 | 第116-118页 |
| 参考文献 | 第118-128页 |
| 附录 | 第128页 |
