摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第9-15页 |
1.1 CRH-BP基因的研究进展 | 第9-11页 |
1.1.1 促肾上腺皮质激素释放激素家族 | 第9页 |
1.1.2 CRH-BP基因的克隆与表达 | 第9-10页 |
1.1.3 CRH-BP在机体内的功能 | 第10页 |
1.1.4 CRH-BP与鱼类应激 | 第10-11页 |
1.2 鱼类应激与相关基因的研究进展 | 第11-14页 |
1.2.1 应激的概念 | 第11页 |
1.2.2 应激对鱼体的影响 | 第11-12页 |
1.2.3 应激相关基因 | 第12-13页 |
1.2.4 免疫增强剂 | 第13-14页 |
1.3 研究目的与意义 | 第14-15页 |
第二章 草鱼CRH-BP基因cDNA全长克隆与序列分析 | 第15-34页 |
2.1 材料与方法 | 第15-17页 |
2.1.1 实验材料 | 第15页 |
2.1.2 药品及试剂 | 第15页 |
2.1.3 主要实验仪器设备 | 第15-16页 |
2.1.4 引物设计 | 第16-17页 |
2.2 实验方法 | 第17-24页 |
2.2.1 动物材料获得 | 第17页 |
2.2.2 总RNA的提取 | 第17-18页 |
2.2.3 草鱼CRH-BP基因cDNA中间片段的扩增 | 第18-19页 |
2.2.4 草鱼CRH-BP基因部分片段克隆 | 第19-20页 |
2.2.5 CRH-BP 3'端和5'端片段扩增 | 第20-23页 |
2.2.6 CRH-BP 3'端和5'端克隆、测序 | 第23-24页 |
2.2.7 草鱼CRH-BP基因全长cDNA序列拼接及分析 | 第24页 |
2.3 结果与分析 | 第24-33页 |
2.3.1 总RNA提取 | 第24页 |
2.3.2 PCR扩增结果 | 第24-25页 |
2.3.3 CRH-BP基因序列分析 | 第25-26页 |
2.3.4 草鱼CRH-BP氨基酸序列分析 | 第26-33页 |
2.4 讨论 | 第33-34页 |
第三章 草鱼CRH-BP基因组织表达 | 第34-40页 |
3.1 材料与方法 | 第34页 |
3.1.1 实验材料 | 第34页 |
3.1.2 药品及试剂 | 第34页 |
3.1.3 仪器设备 | 第34页 |
3.2 实验方法 | 第34-36页 |
3.2.1 引物设计 | 第35页 |
3.2.2 应激处理 | 第35页 |
3.2.3 RNA提取 | 第35页 |
3.2.4 半定量RT-PCR | 第35-36页 |
3.2.5 荧光定量PCR | 第36页 |
3.3 结果与分析 | 第36-39页 |
3.3.1 RT-PCR测定正常情况下草鱼各组织CRH-BP基因表达量 | 第36-38页 |
3.3.2 劳光定量PCR检测应激情况下草鱼CRH-BP的表达情况 | 第38-39页 |
3.4 讨论 | 第39-40页 |
结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
作者简介 | 第48页 |