摘要 | 第4-6页 |
第一章 前言 | 第6-26页 |
1. 基本介绍 | 第6-7页 |
2. FGF8 在脊椎动物胚胎发育过程中的作用 | 第7-11页 |
3. FGF8a 的作用机制及其影响因素 | 第11-16页 |
4. FGF8 对治疗DA 能神经元的功能障碍疾病的意义 | 第16-19页 |
5. rhFGF8a 的研究意义 | 第19-22页 |
6. rhFGF8a 课题已取得的进展 | 第22-24页 |
7. rhFGF8a 高效表达载体的克隆及表达在rhFGF8a 课题中的意义 | 第24-26页 |
第二章 技术路线 | 第26-29页 |
第三章 材料和方法 | 第29-43页 |
1. 主要仪器 | 第29-30页 |
2. 实验材料 | 第30-32页 |
3. 实验方法 | 第32-43页 |
第四章 结果与分析 | 第43-56页 |
1. 新质粒载体的构建与鉴定 | 第43-50页 |
2. 比较各载体在不同的表达宿主中对rhFGF8a 多肽的表达效果 | 第50-53页 |
3. Western 印迹鉴定rhFGF8a-pET28a 及rhFGF8a 原质粒表达产物结果分析 | 第53-55页 |
4. MTT(噻唑蓝)摄取试验结果分析 | 第55-56页 |
第五章 于上游提高rhFGF8a 表达量的策略 | 第56-65页 |
1. 以点突变进行基因改造 | 第56-58页 |
2. 克隆策略 | 第58页 |
3. 表达载体的选择 | 第58-60页 |
4. 表达宿主的选择 | 第60-63页 |
5. 合适的培养、诱导体系的初步摸索 | 第63页 |
6. 本章内容小结 | 第63-65页 |
第六章 rhFGF8a 蛋白初步分析和后续工作探索 | 第65-71页 |
1. rhFGF8a-pET226 载体所表达蛋白的初步分析 | 第65-67页 |
2. rhFGF8a-pET28a 载体所表达蛋白的初步分析 | 第67-69页 |
3. 关于分离纯化rhFGF8a 蛋白的讨论 | 第69-70页 |
4. 本章小结 | 第70-71页 |
第七章 对rhFGF8a 课题的展望 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-87页 |
附录一:GENE BANK 提供的hFGF8a 基因序列 | 第87-88页 |
附录二:rhFGF8a 原质粒测序结果 | 第88-89页 |
附录三:rhFGF8a-pET226 重组子质粒测序结果 | 第89-93页 |
致谢 | 第93页 |