| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第14-34页 |
| 1.1 甘露糖赤藓糖醇脂的研究进展 | 第14-31页 |
| 1.1.1 生物表面活性剂 | 第14页 |
| 1.1.2 甘露糖赤藓糖醇脂的发酵生产 | 第14-17页 |
| 1.1.3 甘露糖赤藓糖醇脂的结构 | 第17-19页 |
| 1.1.4 甘露糖赤藓糖醇脂的合成途径和基因调控 | 第19-23页 |
| 1.1.5 甘露糖赤藓糖醇脂的相行为 | 第23-28页 |
| 1.1.6 甘露糖赤藓糖醇脂的活性和应用 | 第28-31页 |
| 1.1.7 甘露糖赤藓糖醇脂的研究热点 | 第31页 |
| 1.2 本文的立题背景、研究意义及主要研究内容 | 第31-34页 |
| 1.2.1 论文的研究背景和意义 | 第31-32页 |
| 1.2.2 本文的主要研究内容 | 第32-34页 |
| 第二章 Pseudozyma aphidis DSM70725代谢合成甘露糖赤藓糖醇脂的发酵培养基优化研究 | 第34-46页 |
| 2.1 前言 | 第34页 |
| 2.2 材料与方法 | 第34-36页 |
| 2.2.1 菌株及试剂 | 第34-35页 |
| 2.2.2 培养基及培养条件 | 第35页 |
| 2.2.3 产物测定方法 | 第35-36页 |
| 2.2.4 试验设计和数据统计方法 | 第36页 |
| 2.2.5 优化后发酵培养基的验证及发酵动态分析 | 第36页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第36-45页 |
| 2.3.1 碳源和氮源的筛选 | 第36-37页 |
| 2.3.2 发酵培养基优化部分因子试验设计 | 第37-39页 |
| 2.3.3 中心组合试验设计及响应面分析 | 第39-43页 |
| 2.3.4 优化的发酵培养基验证及发酵动态分析 | 第43-45页 |
| 2.4 小结 | 第45-46页 |
| 第三章 甘露糖赤藓糖醇脂合成的氮源调控基因差异表达分析 | 第46-67页 |
| 3.1 前言 | 第46页 |
| 3.2 材料和试剂 | 第46页 |
| 3.3 主要方法 | 第46-50页 |
| 3.3.1 发酵条件及样品制备 | 第46-47页 |
| 3.3.2 发酵过程的研究 | 第47页 |
| 3.3.3 RNA提取步骤 | 第47-48页 |
| 3.3.4 RNA Denovo测序 | 第48-49页 |
| 3.3.5 转录本DGE测序 | 第49-50页 |
| 3.4 结果 | 第50-63页 |
| 3.4.1 氮源限制条件下MELs的代谢分泌过程 | 第50-51页 |
| 3.4.2 Denovo分析的数据过滤结果 | 第51-52页 |
| 3.4.3 Unigene的KEGG分析 | 第52-54页 |
| 3.4.4 Unigene的KOG分析 | 第54页 |
| 3.4.5 Unigene的GO分析 | 第54-55页 |
| 3.4.6 差异基因的KEGG分析 | 第55-58页 |
| 3.4.7 差异基因的GO分析 | 第58-59页 |
| 3.4.8 与代谢过程相关的其他基因 | 第59-63页 |
| 3.5 讨论 | 第63-65页 |
| 3.6 小结 | 第65-67页 |
| 第四章 甘露糖赤藓糖醇脂的分离纯化及结构鉴定 | 第67-78页 |
| 4.1 前言 | 第67页 |
| 4.2 材料与试剂 | 第67页 |
| 4.3 主要分析方法 | 第67-69页 |
| 4.3.1 表面活性剂的初分离纯化 | 第67-68页 |
| 4.3.2 表面活性剂的硅胶色谱柱组分分离 | 第68页 |
| 4.3.3 表面活性剂的结构分析 | 第68-69页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第69-77页 |
| 4.4.1 MELs的分离纯化 | 第69页 |
| 4.4.2 MELs的LC-MS分析 | 第69-72页 |
| 4.4.3 MELs的脂肪酸组成分析 | 第72-74页 |
| 4.4.4 MEL-A和MEL-B的NMR解析 | 第74-77页 |
| 4.5 小结 | 第77-78页 |
| 第五章 甘露糖赤藓糖醇脂的理化性质研究 | 第78-89页 |
| 5.1 前言 | 第78页 |
| 5.2 材料与仪器 | 第78-79页 |
| 5.3 主要方法 | 第79-80页 |
| 5.3.1 MEL-A的临界胶束浓度的测定 | 第79页 |
| 5.3.2 温度对MEL-A表面活性稳定性的影响 | 第79页 |
| 5.3.3 pH值对MEL-A表面活性稳定性的影响 | 第79页 |
| 5.3.4 NaCl浓度对MEL-A表面活性稳定性的影响 | 第79页 |
| 5.3.5 MEL-A的乳化活性 | 第79页 |
| 5.3.6 MEL-A的水相行为 | 第79-80页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第80-87页 |
| 5.4.1 MEL-A的临界胶束浓度 | 第80-81页 |
| 5.4.2 温度对MEL-A稳定性的影响 | 第81-82页 |
| 5.4.3 pH值对MEL-A稳定性的影响 | 第82-83页 |
| 5.4.4 盐浓度对MEL-A稳定性的影响 | 第83页 |
| 5.4.5 MEL-A对疏水性化合物的乳化性 | 第83-84页 |
| 5.4.6 MEL-A的水相行为 | 第84-87页 |
| 5.5 小结 | 第87-89页 |
| 第六章 MEL-A/DLPC自组装体系构建及性质研究 | 第89-97页 |
| 6.1 前言 | 第89页 |
| 6.2 试剂与仪器 | 第89-90页 |
| 6.3 主要方法 | 第90-91页 |
| 6.3.1 MEL-A/DLPC体系构建 | 第90页 |
| 6.3.2 MEL-A/DLPC体系粒径的测定 | 第90页 |
| 6.3.3 DSC测定MEL-A/DLPC体系的热稳定性 | 第90页 |
| 6.3.4 激光共聚焦显微镜观察MEL-A/DLPC体系形态 | 第90页 |
| 6.3.5 MEL-A/DLPC体系包埋白桦脂酸的研究 | 第90页 |
| 6.3.6 MEL-A/DLPC体系对α-亚麻酸和维生素E载运作用 | 第90-91页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第91-95页 |
| 6.4.1 MEL-A/DLPC体系状态及粒径 | 第91-92页 |
| 6.4.2 MEL-A/DLPC体系的热稳定性 | 第92-93页 |
| 6.4.3 MEL-A/DLPC体系形态的激光共聚焦显微镜观察 | 第93页 |
| 6.4.4 MEL-A/DLPC体系对白桦脂酸的作用 | 第93-94页 |
| 6.4.5 MEL-A/DLPC体系包埋α-亚麻酸和维生素E | 第94-95页 |
| 6.5 小结 | 第95-97页 |
| 第七章 甘露糖赤藓糖醇脂诱导黑色素瘤B16细胞凋亡的研究 | 第97-114页 |
| 7.1 前言 | 第97-98页 |
| 7.2 材料与仪器 | 第98页 |
| 7.2.1 仪器设备 | 第98页 |
| 7.2.2 试剂材料 | 第98页 |
| 7.3 主要方法 | 第98-104页 |
| 7.3.1 细胞培养 | 第98页 |
| 7.3.2 MTT法测定不同浓度的MEL-A对小鼠黑色素瘤B16细胞生长抑制的影响 | 第98-99页 |
| 7.3.3 酪氨酸酶的测定 | 第99页 |
| 7.3.4 黑色素生成量的测定 | 第99页 |
| 7.3.5 流式细胞仪分析凋亡细胞和细胞周期 | 第99-100页 |
| 7.3.6 线粒体膜电位的检测 | 第100页 |
| 7.3.7 荧光定量PCR分析细胞凋亡相关基因 | 第100-102页 |
| 7.3.8 Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白 | 第102-104页 |
| 7.4 结果与讨论 | 第104-112页 |
| 7.4.1 MEL-A抑制小鼠黑色素瘤B16细胞的生长 | 第104-106页 |
| 7.4.2 MEL-A能够引起小鼠黑色素瘤B16细胞分化 | 第106页 |
| 7.4.3 MEL-A能够引起小鼠黑色素瘤B16细胞凋亡 | 第106-107页 |
| 7.4.4 MEL-A影响小鼠黑色素瘤B16细胞周期的分布 | 第107-108页 |
| 7.4.5 MEL-A对细胞线粒体膜电位的影响 | 第108-109页 |
| 7.4.6 小鼠黑色素瘤B16细胞凋亡相关基因和蛋白的表达 | 第109-112页 |
| 7.4.7 MEL-A诱导小鼠黑色素瘤B16细胞凋亡的机制 | 第112页 |
| 7.5 小结 | 第112-114页 |
| 第八章 论文总结与研究展望 | 第114-117页 |
| 8.1 论文总结 | 第114-116页 |
| 8.2 论文的不足及后续研究展望 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-129页 |
| 致谢 | 第129-130页 |
| 个人简介 | 第130-131页 |
