摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
第1章 相关背景与文献综述 | 第9-21页 |
1.1 细胞周期与胞质分裂 | 第9-14页 |
1.1.1 引言 | 第9-10页 |
1.1.2 胞质分裂的起始 | 第10-11页 |
1.1.3 胞质分裂的机制概要 | 第11-14页 |
1.2 Arf GTP酶的激活蛋白Arf GAPs | 第14-19页 |
1.2.1 Arf GAPs | 第14-15页 |
1.2.2 Arf6和它的GAPs | 第15-17页 |
1.2.3 ACAP4/ASAP3的相关研究和发现 | 第17-19页 |
1.3 展望与设想 | 第19-21页 |
第2章 ACAP4在胞质分裂的影响和分析 | 第21-39页 |
2.1 ACAP4的RNA干扰对胞质分裂产生的影响 | 第21-26页 |
2.1.1 实验方法 | 第21-22页 |
2.1.2 免疫荧光的结果和分析 | 第22-24页 |
2.1.3 用内源性抗体标记的各个时期的ACAP4在细胞内的定位 | 第24-26页 |
2.2 过表达ACAP4和它的突变体对胞质分裂的影响 | 第26-32页 |
2.2.1 实验方法 | 第26-27页 |
2.2.2 免疫荧光的结果和分析 | 第27-32页 |
2.3 过表达ACAP4对胞质分裂时期的微丝结构的影响 | 第32-35页 |
2.3.1 实验方法 | 第32页 |
2.3.2 免疫荧光的结果和分析 | 第32-35页 |
2.4 活细胞观察ACAP4在有丝分裂时期的HeLa细胞内的分布变化 | 第35-37页 |
2.5 预期和展望 | 第37-39页 |
第3章 实验材料与方法 | 第39-48页 |
3.1 质粒构建基本技术 | 第39-42页 |
3.1.1 引言 | 第39页 |
3.1.2 聚合链式反应PCR | 第39-40页 |
3.1.3 琼脂糖凝胶电泳及DNA片段回收 | 第40页 |
3.1.4 酶切反应与连接反应 | 第40-41页 |
3.1.5 质粒的转化与抽提 | 第41-42页 |
3.2 生化与细胞相关技术 | 第42-48页 |
3.2.1 引言 | 第42页 |
3.2.2 细胞的质粒转染技术 | 第42-43页 |
3.2.3 蛋白免疫印记法(Western Blotting) | 第43-44页 |
3.2.4 免疫荧光技术 | 第44-45页 |
3.2.5 免疫共沉淀技术 | 第45-46页 |
3.2.6 酵母双杂交技术 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-51页 |
附录1 | 第51-55页 |
表2.1.2.1 对照组细胞表型统计 | 第51-52页 |
表2.1.2.2 实验组细胞表型统计 | 第52-53页 |
表2.2.2 ACAP4突变体和野生型对胞质分裂影响的表型统计 | 第53-55页 |
附录2 | 第55-58页 |
致谢 | 第58页 |