中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 心肌钠离子通道及毒素研究进展 | 第11-22页 |
1.1 钠通道的发现及来源 | 第11-12页 |
1.2 钠通道的分类 | 第12-14页 |
1.3 心肌Na~+通道(Na_v1.5)的结构 | 第14-16页 |
1.4 心肌Na~+通道(Na_v1.5)的功能 | 第16-17页 |
1.4.1 Na_v1.5与心脏病 | 第16-17页 |
1.4.2 Na_v1.5与肿瘤 | 第17页 |
1.4.3 Na_v1.5与癫痫 | 第17页 |
1.5 蜘蛛毒素的生化多样性 | 第17-22页 |
1.5.1 孔道堵塞型毒素 | 第18-19页 |
1.5.2 结合膜内受体位点改变电压门控性的毒素 | 第19-20页 |
1.5.2.1 位点2毒素 | 第19-20页 |
1.5.2.2 位点5毒素 | 第20页 |
1.5.3 结合膜外受体位点改变电压门控性的毒素 | 第20-22页 |
1.5.3.1 位点3毒素 | 第20-21页 |
1.5.3.2 位点6毒素 | 第21页 |
1.5.3.3 位点4毒素 | 第21-22页 |
第二章 敬钊毒素-Ⅲ(JZTX-Ⅲ)与心肌钠通道Na_V1.5 Domain Ⅳ相互作用机制研究 | 第22-44页 |
2.1 前言 | 第22-23页 |
2.2 材料、仪器和方法 | 第23-34页 |
2.2.1 粗毒 | 第23页 |
2.2.2 试剂与仪器 | 第23页 |
2.2.2.1 试剂 | 第23页 |
2.2.2.2 仪器 | 第23页 |
2.2.3 敬钊毒素JZTX-Ⅲ的分离纯化 | 第23-26页 |
2.2.3.1 阳离子交换层析 | 第24页 |
2.2.3.2 反相脱盐 | 第24页 |
2.2.3.3 反相纯化 | 第24页 |
2.2.3.4 MALDI-TOF质谱分析 | 第24-26页 |
2.2.4 心肌钠通道Na_v1.5及Na_v1.7突变体的构建(同本室陶怀同学共同完成) | 第26-30页 |
2.2.4.1 突变体引物设计与合成 | 第26-27页 |
2.2.4.2 PCR扩增及DNA凝胶电泳鉴定 | 第27页 |
2.2.4.3 PCR产物纯化和Dpn Ⅰ酶消化PCR产物 | 第27-28页 |
2.2.4.4 感受态细胞的制备及转化 | 第28-29页 |
2.2.4.5 质粒的提取 | 第29-30页 |
2.2.5 离子通道在人胚肾细胞(human embryonic kidney 293T,HEK293T)上的表达 | 第30-33页 |
2.2.5.1 细胞的冻存 | 第30-31页 |
2.2.5.2 细胞的复苏 | 第31页 |
2.2.5.3 细胞的传代培养 | 第31-32页 |
2.2.5.4 细胞的转染 | 第32-33页 |
2.2.6 膜片钳电生理活性实验 | 第33-34页 |
2.3 结果 | 第34-42页 |
2.3.1 敬钊缨毛蛛毒素-Ⅲ(JZTX-Ⅲ)的分离纯化 | 第34-36页 |
2.3.2 质谱鉴定分析 | 第36-37页 |
2.3.3 JZTX-Ⅲ和Na_v1.5 DIV突变体相互作用 | 第37-38页 |
2.3.4 JZTX-Ⅲ和Na_V1.7突变体相互作用 | 第38-40页 |
2.3.5 JZTX-Ⅲ和Na_v1.7DIV S3-S4突变体相互作用 | 第40-42页 |
2.4 讨论 | 第42-44页 |
第三章 敬钊毒素-Ⅰ(JZTX-Ⅰ)与心肌钠通道Nav1.5 DomainⅣ相互作用机制研究 | 第44-52页 |
3.1 前言 | 第44-45页 |
3.2 材料、仪器和方法 | 第45-47页 |
3.2.1 毒素 | 第45页 |
3.2.2 试剂与仪器 | 第45页 |
3.2.2.1 试剂 | 第45页 |
3.2.2.2 仪器 | 第45页 |
3.2.3 心肌钠通道Na_v1.5突变体的构建(同本室陶怀同学共同完成) | 第45-46页 |
3.2.3.1 突变体引物设计与合成 | 第45-46页 |
3.2.3.2 PCR扩增及DNA凝胶电泳鉴定 | 第46页 |
3.2.3.3 PCR产物纯化和Dpn Ⅰ酶消化PCR产物 | 第46页 |
3.2.3.4 感受态细胞的制备及转化 | 第46页 |
3.2.3.5 质粒的提取 | 第46页 |
3.2.4 离子通道在人胚肾细胞(human embryonic kidney 293T,HEK293T)上的表达 | 第46页 |
3.2.4.1 细胞的冻存 | 第46页 |
3.2.4.2 细胞的复苏 | 第46页 |
3.2.4.3 细胞的传代培养 | 第46页 |
3.2.4.4 细胞的转染 | 第46页 |
3.2.5 膜片钳电生理活性实验 | 第46-47页 |
3.3 结果 | 第47-50页 |
3.4 讨论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
缩写表(中英文对照) | 第60-61页 |
论文发表情况 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-64页 |