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敬钊缨毛蛛毒素-Ⅰ和Ⅲ抑制Na_v1.5快速失活的分子机制研究

中文摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 心肌钠离子通道及毒素研究进展第11-22页
    1.1 钠通道的发现及来源第11-12页
    1.2 钠通道的分类第12-14页
    1.3 心肌Na~+通道(Na_v1.5)的结构第14-16页
    1.4 心肌Na~+通道(Na_v1.5)的功能第16-17页
        1.4.1 Na_v1.5与心脏病第16-17页
        1.4.2 Na_v1.5与肿瘤第17页
        1.4.3 Na_v1.5与癫痫第17页
    1.5 蜘蛛毒素的生化多样性第17-22页
        1.5.1 孔道堵塞型毒素第18-19页
        1.5.2 结合膜内受体位点改变电压门控性的毒素第19-20页
            1.5.2.1 位点2毒素第19-20页
            1.5.2.2 位点5毒素第20页
        1.5.3 结合膜外受体位点改变电压门控性的毒素第20-22页
            1.5.3.1 位点3毒素第20-21页
            1.5.3.2 位点6毒素第21页
            1.5.3.3 位点4毒素第21-22页
第二章 敬钊毒素-Ⅲ(JZTX-Ⅲ)与心肌钠通道Na_V1.5 Domain Ⅳ相互作用机制研究第22-44页
    2.1 前言第22-23页
    2.2 材料、仪器和方法第23-34页
        2.2.1 粗毒第23页
        2.2.2 试剂与仪器第23页
            2.2.2.1 试剂第23页
            2.2.2.2 仪器第23页
        2.2.3 敬钊毒素JZTX-Ⅲ的分离纯化第23-26页
            2.2.3.1 阳离子交换层析第24页
            2.2.3.2 反相脱盐第24页
            2.2.3.3 反相纯化第24页
            2.2.3.4 MALDI-TOF质谱分析第24-26页
        2.2.4 心肌钠通道Na_v1.5及Na_v1.7突变体的构建(同本室陶怀同学共同完成)第26-30页
            2.2.4.1 突变体引物设计与合成第26-27页
            2.2.4.2 PCR扩增及DNA凝胶电泳鉴定第27页
            2.2.4.3 PCR产物纯化和Dpn Ⅰ酶消化PCR产物第27-28页
            2.2.4.4 感受态细胞的制备及转化第28-29页
            2.2.4.5 质粒的提取第29-30页
        2.2.5 离子通道在人胚肾细胞(human embryonic kidney 293T,HEK293T)上的表达第30-33页
            2.2.5.1 细胞的冻存第30-31页
            2.2.5.2 细胞的复苏第31页
            2.2.5.3 细胞的传代培养第31-32页
            2.2.5.4 细胞的转染第32-33页
        2.2.6 膜片钳电生理活性实验第33-34页
    2.3 结果第34-42页
        2.3.1 敬钊缨毛蛛毒素-Ⅲ(JZTX-Ⅲ)的分离纯化第34-36页
        2.3.2 质谱鉴定分析第36-37页
        2.3.3 JZTX-Ⅲ和Na_v1.5 DIV突变体相互作用第37-38页
        2.3.4 JZTX-Ⅲ和Na_V1.7突变体相互作用第38-40页
        2.3.5 JZTX-Ⅲ和Na_v1.7DIV S3-S4突变体相互作用第40-42页
    2.4 讨论第42-44页
第三章 敬钊毒素-Ⅰ(JZTX-Ⅰ)与心肌钠通道Nav1.5 DomainⅣ相互作用机制研究第44-52页
    3.1 前言第44-45页
    3.2 材料、仪器和方法第45-47页
        3.2.1 毒素第45页
        3.2.2 试剂与仪器第45页
            3.2.2.1 试剂第45页
            3.2.2.2 仪器第45页
        3.2.3 心肌钠通道Na_v1.5突变体的构建(同本室陶怀同学共同完成)第45-46页
            3.2.3.1 突变体引物设计与合成第45-46页
            3.2.3.2 PCR扩增及DNA凝胶电泳鉴定第46页
            3.2.3.3 PCR产物纯化和Dpn Ⅰ酶消化PCR产物第46页
            3.2.3.4 感受态细胞的制备及转化第46页
            3.2.3.5 质粒的提取第46页
        3.2.4 离子通道在人胚肾细胞(human embryonic kidney 293T,HEK293T)上的表达第46页
            3.2.4.1 细胞的冻存第46页
            3.2.4.2 细胞的复苏第46页
            3.2.4.3 细胞的传代培养第46页
            3.2.4.4 细胞的转染第46页
        3.2.5 膜片钳电生理活性实验第46-47页
    3.3 结果第47-50页
    3.4 讨论第50-52页
参考文献第52-60页
缩写表(中英文对照)第60-61页
论文发表情况第61-62页
致谢第62-64页

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