摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-14页 |
1.1 镁元素的生物学功能 | 第11页 |
1.2 微生物中镁离子转运蛋白的研究 | 第11-12页 |
1.3 拟南芥中镁离子转运蛋白的研究 | 第12-13页 |
1.4 本文的研究目的及意义 | 第13-14页 |
第二章 材料与方法 | 第14-39页 |
2.1 实验材料 | 第14-18页 |
2.1.1 实验仪器 | 第14页 |
2.1.2 缓冲液和培养基 | 第14-16页 |
2.1.3 质粒和菌株 | 第16页 |
2.1.4 酶类和试剂盒 | 第16页 |
2.1.5 其它试剂 | 第16页 |
2.1.6 生物信息学分析所需软件及数据库 | 第16-18页 |
2.2 实验方法 | 第18-39页 |
2.2.1 AtMGT4亚细胞定位 | 第18-24页 |
2.2.2 AtMGT4基因组织表达模式分析 | 第24-28页 |
2.2.3 AtMGT4 T-DNA插入突变体鉴定 | 第28-31页 |
2.2.4 GK-366F02株系表型观察与分析 | 第31-34页 |
2.2.5 35S:AtMGT4转基因植株表型观察 | 第34-35页 |
2.2.6 AtMGT4相互作用蛋白的筛选 | 第35-39页 |
第三章 结果与分析 | 第39-54页 |
3.1 AtMGT4蛋白定位于细胞核 | 第39-41页 |
3.1.1 pEGAD-GFP-AtMGT4载体构建 | 第39-40页 |
3.1.2 GFP-AtMGT4融合蛋白的绿色荧光观察 | 第40-41页 |
3.2 AtMGT4基因组织表达模式分析 | 第41-43页 |
3.2.1 AtMGT4启动子双元表达载体构建 | 第41-42页 |
3.2.2 pBI101.2-AtMGT4_(pro)-GUS转化根瘤土壤农杆菌株GV3101 | 第42页 |
3.2.3 AtMGT4_(pro)-GUS转基因植株的筛选 | 第42-43页 |
3.2.4 AtMGT4_(pro)-GUS转基因植株GUS活性检测 | 第43页 |
3.3 AtMGT4 T-DNA插入突变体鉴定 | 第43-46页 |
3.3.1 AtMGT4 T-DNA插入突变纯合体鉴定 | 第43-44页 |
3.3.2 各突变体中T-DNA插入位点确定 | 第44-45页 |
3.3.3 各突变体中AtMGT4转录水平检测 | 第45-46页 |
3.4 35S:AtMGT4转基因植株及GK-366F02植株表型观察与分析 | 第46-51页 |
3.4.1 GK-366F02植株及35S:AtMGT4转基因植株表型观察 | 第46-48页 |
3.4.2 低镁条件下生长的GK-366F02植株Mg~(2+)含量测定 | 第48-50页 |
3.4.3 受低镁诱导GK-366F02植株MGTs各成员转录水平检测 | 第50-51页 |
3.5 AtMGT4相互作用蛋白的筛选 | 第51-54页 |
3.5.1 pGBKT7-AtMGT4筛选拟南芥cDNA文库结果 | 第51-52页 |
3.5.2 AtMGT4相互作用蛋白的初步验证 | 第52-54页 |
第四章 讨论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-59页 |
附录 | 第59-62页 |
致谢 | 第62-63页 |