| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 乙型肝炎病毒(HBV) | 第13-34页 |
| 1.1 HBV的分子生物学特征 | 第13-14页 |
| 1.2 乙型肝炎病毒的转录与复制 | 第14-17页 |
| 1.2.1 乙型肝炎病毒的转录 | 第14-16页 |
| 1.2.2 乙型肝炎病毒的复制 | 第16-17页 |
| 1.3 乙型肝炎病毒(HBV)编码的蛋白质 | 第17-20页 |
| 1.3.1 外膜蛋白 | 第17-18页 |
| 1.3.2 核壳蛋白 | 第18-19页 |
| 1.3.3 P蛋白 | 第19页 |
| 1.3.4 X蛋白 | 第19-20页 |
| 1.4 乙型肝炎病毒(HBV)的感染与发病机制 | 第20-27页 |
| 1.4.1 乙型肝炎感染的病程 | 第20-25页 |
| 1.4.2 慢性乙型肝炎病毒感染的后遗症 | 第25-27页 |
| 1.5 乙型病毒肝炎的治疗 | 第27-34页 |
| 1.5.1 干扰素 | 第28-30页 |
| 1.5.2 核苷类似物 | 第30-32页 |
| 1.5.3 乙型肝炎治疗展望 | 第32-34页 |
| 第二章 MVP(主要穹窿蛋白) | 第34-41页 |
| 2.1 主要穹窿蛋白(MVP)的结构 | 第34-35页 |
| 2.2 主要穹窿体蛋白(MVP)的启动子 | 第35-36页 |
| 2.3 主要穹窿蛋白(MVP)的主要功能 | 第36-40页 |
| 2.4 穹窿体与免疫 | 第40-41页 |
| 第三章 信号转导和转录活化因子 | 第41-52页 |
| 3.1 STATs家族 | 第41-42页 |
| 3.2 STAT信号转导途径的激活 | 第42-43页 |
| 3.2.1 JAK/STAT3信号转导途径 | 第42页 |
| 3.2.2 JAK/STAT信号转导途径的受体 | 第42页 |
| 3.2.3 JAK家族分类 | 第42页 |
| 3.2.4 其他可以激活STAT3信号转导途径的蛋白 | 第42-43页 |
| 3.3 STAT的激活与肿瘤发生 | 第43页 |
| 3.4 STAT信号通路的结构与功能的联系 | 第43-46页 |
| 3.5 STAT信号通路的激活 | 第46-47页 |
| 3.6 STAT调控的基因与细胞的恶性转化 | 第47-48页 |
| 3.7 与STAT相互作用的分子 | 第48-50页 |
| 3.8 STAT信号与癌症的治疗 | 第50-52页 |
| 第四章 病毒与干扰素诱导的基因 | 第52-58页 |
| 4.1 干扰素诱导的基因 | 第52-55页 |
| 4.1.1 PKR | 第53-54页 |
| 4.1.2 RNaseL和2’-5’OAS | 第54页 |
| 4.1.3 MxA | 第54-55页 |
| 4.2 病毒对PKR的干扰 | 第55-56页 |
| 4.3 病毒对RNaseL的抑制 | 第56-58页 |
| 第五章 乙型肝炎病毒感染与MVP | 第58-65页 |
| 5.1 前言 | 第58页 |
| 5.2 材料 | 第58-59页 |
| 5.2.1 研究对象 | 第58-59页 |
| 5.2.2 质粒与细胞 | 第59页 |
| 5.2.3 试剂盒 | 第59页 |
| 5.3 方法 | 第59-60页 |
| 5.3.1 血清中MVP的检测 | 第59-60页 |
| 5.4 HBV对MVP的调控 | 第60-61页 |
| 5.4.1 细胞转染 | 第60页 |
| 5.4.2 荧光素酶活性的测定 | 第60-61页 |
| 5.5 结果 | 第61-63页 |
| 5.5.1 血清结果 | 第61-62页 |
| 5.5.2 HBV对MVP启动子的调控 | 第62-63页 |
| 5.5.3 HBV可以提高MVP蛋白的表达量 | 第63页 |
| 5.6 讨论 | 第63-65页 |
| 第六章 MVP对HBV的复制有正调控作用 | 第65-90页 |
| 6.1 前言 | 第65页 |
| 6.2 实验材料及仪器 | 第65-66页 |
| 6.2.1 菌种和质粒 | 第65页 |
| 6.2.2 细胞 | 第65页 |
| 6.2.3 试剂盒、主要的酶系统、转染试剂 | 第65-66页 |
| 6.2.4 细菌细胞培养所用试剂(见附录) | 第66页 |
| 6.2.5 仪器设备 | 第66页 |
| 6.3 实验方法 | 第66-82页 |
| 6.3.1 MVP基因的获得及克隆 | 第66-70页 |
| 6.3.2 细胞转染(见5.4.1) | 第70页 |
| 6.3.3 乙肝表面抗原,e抗原的检测 | 第70-71页 |
| 6.3.4 乙肝病毒复制中间体(core associated DNA)荧光定量PCR检测 | 第71-76页 |
| 6.3.5 Northern Blot检测HBV RNA水平 | 第76-82页 |
| 6.4 MVP干扰RNA的构建 | 第82-83页 |
| 6.5 结果 | 第83-88页 |
| 6.5.1 pCMV-Tag2B-MVP克隆的构建与鉴定 | 第83-85页 |
| 6.5.2 HBeAg检测结果 | 第85页 |
| 6.5.3 HBsAg检测结果 | 第85-86页 |
| 6.5.4 HBV DNA水平检测 | 第86-87页 |
| 6.5.5 HBV RNA水平检测 | 第87页 |
| 6.5.6 沉默MVP表达对HBV S蛋白和E蛋白的合成的影响 | 第87-88页 |
| 6.6 讨论 | 第88-90页 |
| 第七章 MVP通过STAT3信号来调控HBV全长启动子的活性 | 第90-107页 |
| 7.1 前言 | 第90页 |
| 7.2 材料 | 第90-91页 |
| 7.2.1 质粒,菌种及细胞系 | 第90页 |
| 7.2.2 试剂盒 | 第90-91页 |
| 7.2.3 其他试剂 | 第91页 |
| 7.3 方法 | 第91-93页 |
| 7.3.1 转染实验所用质粒的提取 | 第91-92页 |
| 7.3.2 细胞培养 | 第92-93页 |
| 7.4 细胞转染实验 | 第93-94页 |
| 7.4.1 脂质体转染 | 第93页 |
| 7.4.2 电转染法 | 第93-94页 |
| 7.5 荧光素酶活性的测定 | 第94-95页 |
| 7.6 染色质免疫沉淀分析(Chromatin immuno-precipitation,ChIP) | 第95-99页 |
| 7.6.1 主要试剂及其配制 | 第96页 |
| 7.6.2 免疫沉淀反应 | 第96-98页 |
| 7.6.3 PCR分析 | 第98-99页 |
| 7.7 Western blot检测 | 第99-102页 |
| 7.8 结果与讨论 | 第102-105页 |
| 7.8.1 主要穹窿蛋白MVP可以激活HBV的全长启动子 | 第102-103页 |
| 7.8.2 Stat3的干扰RNA可以减弱主要穹窿蛋白对HBV全长启动子的激活 | 第103页 |
| 7.8.3 MVP可以增强Stat3在乙型肝炎病毒全长启动子上的结合 | 第103-104页 |
| 7.8.4 主要穹窿蛋白MVP可以促进Stat3入核,并增加其总的表达量 | 第104-105页 |
| 7.9 讨论 | 第105-107页 |
| 第八章 MVP与干扰素诱导的基因 | 第107-113页 |
| 8.1 前言 | 第107-108页 |
| 8.2 材料与方法 | 第108页 |
| 8.2.1 质粒,菌株,细胞,酶及试剂 | 第108页 |
| 8.2.2 转染用质粒的提取(见7.2.1) | 第108页 |
| 8.2.3 细胞培养(见7.2.2) | 第108页 |
| 8.2.4 细胞转染实验(见7.3) | 第108页 |
| 8.3 结果 | 第108-111页 |
| 8.4 讨论 | 第111-113页 |
| 第九章 研究总结 | 第113-115页 |
| 参考文献 | 第115-131页 |
| 附录Ⅰ 试剂及其配制一览表 | 第131-135页 |
| 附录II博士研究生期间发表及待发表的论文 | 第135页 |
