摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-17页 |
1.1 猪嵴病毒概述 | 第11-12页 |
1.1.1 猪嵴病毒危害 | 第11页 |
1.1.2 猪嵴病毒理化和生物学特性 | 第11页 |
1.1.3 猪嵴病毒基因组及其编码的蛋白质 | 第11-12页 |
1.1.4 猪嵴病毒研究现状 | 第12页 |
1.2 小RNA病毒逃逸天然免疫机制研究进展 | 第12-16页 |
1.2.1 天然免疫概述 | 第12-13页 |
1.2.2 I型干扰素受体通路概述 | 第13-15页 |
1.2.3 抑制IFN-β 介导的信号通路 | 第15-16页 |
1.3 研究的目的与意义 | 第16-17页 |
第二章 抑制IFN-β信号通路活化的猪嵴病毒蛋白筛选 | 第17-31页 |
2.1 材料与试剂 | 第17-18页 |
2.1.1 细胞、质粒、猪嵴病毒cDNA和细胞因子 | 第17-18页 |
2.1.2 主要仪器和设备 | 第18页 |
2.2 实验方法 | 第18-27页 |
2.2.1 PKV重组表达质粒的构建与鉴定 | 第18-22页 |
2.2.2 蛋白免疫印迹分析 | 第22-24页 |
2.2.3 双荧光素酶报告基因实验 | 第24页 |
2.2.4 实时荧光定量PCR实验 | 第24-26页 |
2.2.5 蛋白免疫印迹实验 | 第26-27页 |
2.2.6 病毒空斑实验和流式细胞仪分析 | 第27页 |
2.3 实验结果 | 第27-30页 |
2.3.1 PKV重组表达质粒的构建 | 第27-28页 |
2.3.2 PKV VP3抑制IFN-β 诱导的STAT1/STAT2/IRF9启动子的活化 | 第28页 |
2.3.3 PKV VP3抑制IFN-β 诱导的RIG-I及其下游基因的转录 | 第28-29页 |
2.3.4 PKV VP3降低IFN-α 对病毒复制的抑制作用 | 第29-30页 |
2.4 小结 | 第30-31页 |
第三章 PKV VP3抑制IFN-β诱导的信号通路活化的分子机制 | 第31-42页 |
3.1 材料与试剂 | 第31-32页 |
3.1.1 细胞、质粒及细胞因子 | 第31页 |
3.1.2 主要试剂 | 第31-32页 |
3.1.3 主要仪器 | 第32页 |
3.2 实验方法 | 第32-34页 |
3.2.1 核质分离与免疫印迹实验 | 第32-33页 |
3.2.2 间接免疫荧光实验 | 第33页 |
3.2.3 免疫共沉淀及免疫印迹实验 | 第33-34页 |
3.3 实验结果 | 第34-40页 |
3.3.1 PKV VP3影响STAT2与IRF9的入核 | 第34-36页 |
3.3.2 PKV VP3影响STAT2-IRF9与STAT2-STAT2复合物形成 | 第36-37页 |
3.3.3 PKV VP3作用于内源性STAT2和IRF9 | 第37-38页 |
3.3.4 PKV VP3与STAT2和IRF9功能性结构域相互作用 | 第38-40页 |
3.4 讨论 | 第40-41页 |
3.5 小结 | 第41-42页 |
第四章 全文总结 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-49页 |
附录 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51页 |