| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第14-22页 |
| 1.1 研究背景及意义 | 第14-15页 |
| 1.1.1 研究背景 | 第14页 |
| 1.1.2 研究意义 | 第14-15页 |
| 1.2 微孢子虫研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2.1 微孢子虫形态结构 | 第15页 |
| 1.2.2 家蚕微孢子虫孢子特征 | 第15-16页 |
| 1.2.3 微孢子生活史及侵染模式 | 第16-17页 |
| 1.3 水通道蛋白研究进展 | 第17-22页 |
| 1.3.1 水通道蛋白的发现与分类 | 第17-18页 |
| 1.3.2 水通道蛋白的分子结构与通透性机制 | 第18-19页 |
| 1.3.3 水通道蛋白的生物学功能 | 第19-22页 |
| 第2章 家蚕微孢子虫NbAQP基因的克隆、鉴定与转录分析 | 第22-38页 |
| 2.1 主要材料与仪器试剂 | 第22-24页 |
| 2.1.1 主要仪器与设备 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂及配制 | 第22-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-30页 |
| 2.2.1 家蚕微孢子虫纯化 | 第24-25页 |
| 2.2.2 家蚕微孢子虫基因组DNA的提取 | 第25页 |
| 2.2.3 家蚕微孢子虫NbAQP基因的克隆 | 第25-26页 |
| 2.2.4 重组质粒pMD-19T-NbAQP的构建及序列测定 | 第26-27页 |
| 2.2.5 家蚕微孢子虫NbAQP的序列分析 | 第27页 |
| 2.2.6 家蚕微孢子虫NbAQP基因的转录分析 | 第27-30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-35页 |
| 2.3.1 家蚕微孢子虫NbAQP基因的PCR扩增 | 第30-31页 |
| 2.3.2 家蚕微孢子虫NbAQP序列分析 | 第31-34页 |
| 2.3.3 家蚕微孢子虫NbAQP转录分析 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-38页 |
| 第3章 家蚕微孢子虫NbAQP的真核表达 | 第38-53页 |
| 3.1 主要材料与仪器试剂 | 第38-41页 |
| 3.1.1 主要仪器与设备 | 第38页 |
| 3.1.2 主要试剂及配制 | 第38-41页 |
| 3.2 实验方法 | 第41-48页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第41页 |
| 3.2.2 目的基因的扩增与产物回收 | 第41-42页 |
| 3.2.3 重组质粒pMD-19T-NbAQP的构建及序列测定 | 第42页 |
| 3.2.4 重组质粒pMD-19T-NbAQP的抽提 | 第42-43页 |
| 3.2.5 重组表达载体pYES2-NTC-NbAQP的构建 | 第43-44页 |
| 3.2.6 重组表达质粒的扩增转化 | 第44页 |
| 3.2.7 重组表达质粒的抽提与鉴定 | 第44页 |
| 3.2.8 酵母转化（LiAc转化） | 第44-45页 |
| 3.2.9 重组表达质粒的筛选与鉴定 | 第45-46页 |
| 3.2.10 重组蛋白的诱导表达和蛋白提取 | 第46页 |
| 3.2.11 SDS-PAGE检测 | 第46-47页 |
| 3.2.12 Western blot免疫印记 | 第47-48页 |
| 3.3 结果与分析 | 第48-51页 |
| 3.3.1 含酶切位点的NbAQP基因的PCR扩增 | 第48-49页 |
| 3.3.2 重组表达质粒pYES2-NTC-NbAQP的构建与鉴定 | 第49-50页 |
| 3.3.3 融合蛋白His-NbAQP的诱导表达及鉴定 | 第50-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-53页 |
| 第4章 家蚕微孢子虫NbAQP的定位和功能初探 | 第53-63页 |
| 4.1 主要材料与仪器试剂 | 第53-54页 |
| 4.1.1 主要仪器与设备 | 第53页 |
| 4.1.2 主要试剂及配制 | 第53-54页 |
| 4.2 实验方法 | 第54-57页 |
| 4.2.1 多克隆抗体的制备 | 第54页 |
| 4.2.2 多克隆抗体的检测 | 第54-55页 |
| 4.2.3 免疫胶体金电镜 | 第55-56页 |
| 4.2.4 抗体封闭实验 | 第56-57页 |
| 4.3 结果与分析 | 第57-60页 |
| 4.3.1 多克隆抗体的效价和特异性 | 第57-58页 |
| 4.3.2 免疫电镜结果 | 第58-59页 |
| 4.3.3 抗体封闭实验 | 第59-60页 |
| 4.4 讨论 | 第60-63页 |
| 结论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 附录 | 第71-73页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
