| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 术语及符号说明 | 第10-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-27页 |
| 1.1 木聚糖 | 第11-12页 |
| 1.2 木聚糖酶 | 第12-18页 |
| 1.2.1 木聚糖酶家族分类 | 第13-14页 |
| 1.2.2 木聚糖酶基因的来源 | 第14-15页 |
| 1.2.3 木聚糖酶的结构 | 第15-16页 |
| 1.2.4 木聚糖酶的克隆表达 | 第16-18页 |
| 1.3 木聚糖酶基因体外定向进化 | 第18-22页 |
| 1.3.1 突变文库的构建 | 第18-21页 |
| 1.3.2 突变文库的筛选 | 第21-22页 |
| 1.4 嗜极木聚糖酶 | 第22-24页 |
| 1.4.1 嗜酸/嗜碱木聚糖酶 | 第22-23页 |
| 1.4.2 嗜热/嗜冷木聚糖酶 | 第23页 |
| 1.4.3 嗜盐木聚糖酶 | 第23-24页 |
| 1.5 嗜极木聚糖酶的应用 | 第24-26页 |
| 1.5.1 在食品工业中的应用 | 第24-25页 |
| 1.5.2 在造纸工业中的应用 | 第25页 |
| 1.5.3 在其它领域中的应用 | 第25-26页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 重组木聚糖酶XynAGN16的异源表达及酶学性质 | 第27-57页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-30页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第27页 |
| 2.1.2 主要试剂与仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.3 常用溶液与培养基 | 第28-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-37页 |
| 2.2.1 木聚糖酶基因xyn AGN16序列与结构分析 | 第30-31页 |
| 2.2.2 重组酶在大肠杆菌中的异源表达 | 第31页 |
| 2.2.3 重组酶的纯化与鉴定 | 第31-33页 |
| 2.2.4 重组酶酶活测定方法 | 第33-35页 |
| 2.2.5 酶学特性分析 | 第35-37页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第37-54页 |
| 2.3.1 木聚糖酶基因xyn AGN16序列与结构分析 | 第37-41页 |
| 2.3.2 重组酶的异源表达与纯化 | 第41-43页 |
| 2.3.3 重组酶的酶学性质研究 | 第43-54页 |
| 2.4 讨论 | 第54-56页 |
| 2.5 本章小结 | 第56-57页 |
| 第三章 木聚糖酶XynAGN16L的定向进化 | 第57-75页 |
| 3.1 实验材料 | 第57-59页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第57页 |
| 3.1.2 主要试剂与仪器 | 第57-58页 |
| 3.1.3 常用溶液与培养基 | 第58-59页 |
| 3.2 实验方法 | 第59-67页 |
| 3.2.1 重组突变文库构建策略 | 第59-60页 |
| 3.2.2 四种GH10木聚糖酶基因的亚克隆 | 第60-61页 |
| 3.2.3 易错PCR | 第61-62页 |
| 3.2.4 家族重排(Family shuffling) | 第62-63页 |
| 3.2.5 DNA重排产物重扩增 | 第63-64页 |
| 3.2.6 原核表达载体pEASY-E2质粒提取 | 第64页 |
| 3.2.7 重组突变文库的构建 | 第64-65页 |
| 3.2.8 木聚糖酶突变体的筛选 | 第65-66页 |
| 3.2.9 木聚糖酶突变子盐抗性验证 | 第66-67页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第67-74页 |
| 3.3.1 重组突变文库的构建 | 第67-70页 |
| 3.3.2 木聚糖酶突变子的筛选 | 第70-71页 |
| 3.3.3 木聚糖酶突变子的NaCl抗性 | 第71-74页 |
| 3.4 讨论 | 第74页 |
| 3.5 本章小结 | 第74-75页 |
| 第四章 木聚糖酶突变子酶学性质研究 | 第75-88页 |
| 4.1 实验材料 | 第75页 |
| 4.1.1 主要试剂与仪器 | 第75页 |
| 4.1.2 常用溶液与培养基 | 第75页 |
| 4.2 实验方法 | 第75-77页 |
| 4.2.1 重组酶在大肠杆菌中的异源表达 | 第75页 |
| 4.2.2 重组酶的纯化与鉴定 | 第75-76页 |
| 4.2.3 酶学特性分析 | 第76-77页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第77-83页 |
| 4.3.1 重组酶的异源表达及纯化 | 第77-78页 |
| 4.3.2 重组酶的酶学特性研究 | 第78-83页 |
| 4.3.3 重组酶的序列和结构分析 | 第83页 |
| 4.4 讨论 | 第83-87页 |
| 4.5 本章小结 | 第87-88页 |
| 第五章 总结与展望 | 第88-90页 |
| 5.1 总结 | 第88-89页 |
| 5.2 创新 | 第89页 |
| 5.3 展望 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-101页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文和研究成果 | 第101-102页 |
| 附录 | 第102-104页 |
| 附录A 常用缓冲溶液的配制方法 | 第102-104页 |
| 附录B 氨基酸中英文对照及缩写表 | 第104页 |
