| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第13-23页 |
| 第一章 NATs的生物学功能及作用机制 | 第13-18页 |
| 1.1 NATs的概述 | 第13-15页 |
| 1.1.1 NATs的定义 | 第13页 |
| 1.1.2 NATs的分类 | 第13-14页 |
| 1.1.3 NATs的特性 | 第14-15页 |
| 1.2 NATs的生物学功能 | 第15页 |
| 1.2.1 BCMA、HIF-1α 和DHPS反义转录本可调控肿瘤癌症发生 | 第15页 |
| 1.2.2 IFN-α1 和IL-1β 的反义转录本调控免疫 | 第15页 |
| 1.2.3 IFITM5和Dlx1的反义转录本调控发育 | 第15页 |
| 1.3 NATs主要调控机制 | 第15-18页 |
| 1.3.1 NATs与表观遗传水平调控 | 第15-16页 |
| 1.3.2 NATs与转录后水平调控 | 第16-18页 |
| 第二章 Sirt1的表达调控 | 第18-23页 |
| 2.1 Sirt1的概述 | 第18页 |
| 2.2 Sirt1的时空表达模式 | 第18页 |
| 2.3 Sirt1表达的调控因子 | 第18-21页 |
| 2.3.1 转录因子调控Sirt1表达 | 第19页 |
| 2.3.2 MiRNA调控Sirt1表达 | 第19-21页 |
| 2.3.3 其他因子调控Sirt1的表达 | 第21页 |
| 2.4 Sirt1与成肌调控 | 第21-23页 |
| 实验研究 | 第23-48页 |
| 前言 | 第23-24页 |
| 第三章 Sirt1 AS lncRNA的鉴定与表达 | 第24-33页 |
| 3.1 材料 | 第24-25页 |
| 3.2 方法 | 第25-26页 |
| 3.2.1 生物信息分析预测Sirt1 AS lncRNA | 第25页 |
| 3.2.2 采集小鼠组织样 | 第25页 |
| 3.3.3 C2C12细胞的培养及诱导成肌分化 | 第25页 |
| 3.2.4 小鼠组织样品及细胞总RNA提取 | 第25页 |
| 3.2.5 链特异性反转PCR | 第25-26页 |
| 3.2.6 实时定量qPCR | 第26页 |
| 3.3 结果与分析 | 第26-32页 |
| 3.3.1 生物信息学分析鉴定Sirt1 AS lncRNA | 第26-29页 |
| 3.3.2 Sirt1 AS lncRNA的克隆鉴定 | 第29页 |
| 3.3.3 Sirt1 AS lncRNA的小鼠组织表达 | 第29-30页 |
| 3.3.4 Sirt1 AS lncRNA在C2C12成肌细胞分化时序中的表达 | 第30-32页 |
| 3.4 讨论 | 第32-33页 |
| 第四章 Sirt1 AS lncRNA作用mi R-34a调控Sirt1表达及机制 | 第33-43页 |
| 4.1 材料 | 第33-34页 |
| 4.2 方法 | 第34-36页 |
| 4.2.1 RNA稳定性分析 | 第34页 |
| 4.2.2 Sirt1 AS lncRNA和miR-34a pCDNA3.1 真核表达载体构建 | 第34页 |
| 4.2.3 表达载体转染C2C12细胞 | 第34-35页 |
| 4.2.4 细胞总RNA的提取 | 第35页 |
| 4.2.5 RNA的反转录和RT-PCR | 第35页 |
| 4.2.6 细胞及组织蛋白提取 | 第35页 |
| 4.2.7 Western Blot | 第35页 |
| 4.2.8 psiCHECK-Sirt1-3 `UTR荧光素酶载体的构建 | 第35-36页 |
| 4.2.9 Sirt1 AS lncRNA双荧光素酶报告检测分析 | 第36页 |
| 4.2.10 统计分析 | 第36页 |
| 4.3 结果与分析 | 第36-42页 |
| 4.3.1 在C2C12成肌细胞中Sirt1 AS lncRNA比Sirt1 mRNA稳定 | 第36-37页 |
| 4.3.2 成功构建Sirt1 AS lncRNA pCDNA3.1 真核表达载体 | 第37-38页 |
| 4.3.3 成功构建miR-34a pCDNA3.1 真核表达载体 | 第38-39页 |
| 4.3.4 Sirt1 AS lncRNA在C2C12成肌细胞中促进Sirt1表达 | 第39-40页 |
| 4.3.5 Sirt AS lncRNA提高Sirt1 mRNA的稳定性 | 第40-41页 |
| 4.3.6 荧光素酶分析Sirt1 AS lncRNA抵抗miR-34a作用 | 第41-42页 |
| 4.4 讨论 | 第42-43页 |
| 第五章 Sirt1 AS lncRNA与mi R-34a调控C2C12细胞增殖 | 第43-48页 |
| 5.1 材料 | 第43页 |
| 5.2 方法 | 第43页 |
| 5.2.1 C2C12细胞的转染 | 第43页 |
| 5.2.2 细胞总RNA的提取 | 第43页 |
| 5.2.3 RNA反转录和实时定量PCR | 第43页 |
| 5.2.4 Western Blot分析 | 第43页 |
| 5.2.5 CCK8检测细胞活性 | 第43页 |
| 5.2.6 流式细胞术检测C2C12细胞增殖 | 第43页 |
| 5.2.7 EDU检测细胞增殖 | 第43页 |
| 5.3 结果与分析 | 第43-47页 |
| 5.3.1 Sirt1 AS lncRNA、Sirt1和mi R-34a在C2C12增殖过程中的时序表达 | 第43-44页 |
| 5.3.2 C2C12增殖过程中Sirt1 AS lncRNA通过拮抗mi R-34a上调Sirt1表达 . 325.3.3 Sirt1 AS lncRNA促进C2C12增殖标志基因表达 | 第44-46页 |
| 5.3.4 Sirt1 AS lncRNA促进C2C12细胞增殖 | 第46-47页 |
| 5.4 讨论 | 第47-48页 |
| 结论、创新点及进一步研究内容 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 附录 | 第53-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 个人简介 | 第68-69页 |
