| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略语录 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-20页 |
| 1.1 逆转录病毒 | 第10页 |
| 1.2 绵羊肺腺瘤病毒JSRV | 第10-12页 |
| 1.3 内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV) | 第12页 |
| 1.4 地方性鼻腔肿瘤病毒ENTV | 第12-13页 |
| 1.5 绵羊肺腺瘤病毒的信号转导通路 | 第13-14页 |
| 1.6 绵羊肺腺瘤OPA的概况 | 第14-16页 |
| 1.6.1 绵羊肺腺瘤的流行病学 | 第14-15页 |
| 1.6.2 绵羊肺腺瘤的临床病理学 | 第15-16页 |
| 1.6.3 绵羊肺腺瘤的病理组织学观察 | 第16页 |
| 1.7 绵羊肺腺瘤病毒的检测方法 | 第16-17页 |
| 1.8 绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白JSRV ENV | 第17页 |
| 1.9 OPA实验模型 | 第17-19页 |
| 1.9.1 细胞模型 | 第17-18页 |
| 1.9.2 羊模型 | 第18页 |
| 1.9.3 鼠模型 | 第18-19页 |
| 1.9.4 离体肺切片模型 | 第19页 |
| 1.10 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 实验一 绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白真核表达质粒pcDNA3.1(+)/exJSRV-env构建及鉴定 | 第20-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 实验样品与实验试剂 | 第20页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第20页 |
| 2.1.3 溶液配制方法 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-23页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第21页 |
| 2.2.2 总RNA的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.3 JSRV-env基因的扩增 | 第22页 |
| 2.2.4 DNA的纯化 | 第22-23页 |
| 2.2.5 pcDNA3.1(+)/exJSRV-env真核表达质粒的构建 | 第23页 |
| 2.2.6 真核表达质粒pcDNA3.1(+)/exJSRV-env的鉴定 | 第23页 |
| 2.3 结果 | 第23-26页 |
| 2.3.1 JSRV-env基因的扩增 | 第23-24页 |
| 2.3.2 真核表达质粒pcDNA3.1(+)/exJSRV-env的构建与鉴定 | 第24-26页 |
| 2.4 讨论 | 第26-27页 |
| 3 实验pcDNA3.1(+)/exJSRV-env体外转染NIH3T3细胞 | 第27-31页 |
| 3.1 实验材料 | 第27页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第27页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第27页 |
| 3.1.3 溶液配置方法 | 第27页 |
| 3.2 实验方法 | 第27-28页 |
| 3.3 实验结果 | 第28-30页 |
| 3.3.1 转染细胞exJSRV-env基因检测 | 第28页 |
| 3.3.2 转化灶实验 | 第28-30页 |
| 3.4 讨论 | 第30-31页 |
| 4 实验三 exJSRV囊膜蛋白的体内转染实验 | 第31-42页 |
| 4.1 实验材料 | 第31页 |
| 4.2 实验方法 | 第31-33页 |
| 4.2.1 裸鼠致瘤实验 | 第31-32页 |
| 4.2.2 pcDNA3.1(+)/exJSRV-env在小鼠体内表达 | 第32-33页 |
| 4.3 实验结果 | 第33-39页 |
| 4.3.1 JSRV-env基因引起NIH3T3细胞发生癌变 | 第33-34页 |
| 4.3.2 JSRV-ENV蛋白在小鼠体内不同脏器中的mRNA的表达检测 | 第34-35页 |
| 4.3.3 JSRV-ENV蛋白引起小鼠体内不同脏器发生变化的检测 | 第35-38页 |
| 4.3.4 转染小鼠肺免疫组化染色 | 第38-39页 |
| 4.4 讨论 | 第39-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
