摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
英文缩写对照表 | 第12-13页 |
一、综述 | 第13-19页 |
1.1 锌指蛋白的结构与功能 | 第13-14页 |
1.2 RLRs受体在天然免疫应答中的作用 | 第14-16页 |
1.3 NDV研究进展 | 第16-17页 |
1.4 AIV研究进展 | 第17-18页 |
1.5 开展本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
二、新城疫病毒感染对多种鸡源锌指蛋白表达的影响 | 第19-36页 |
2.1 实验材料 | 第19-22页 |
2.1.1 毒株、菌种、细胞 | 第19页 |
2.1.2 引物设计 | 第19-20页 |
2.1.3 试剂 | 第20-21页 |
2.1.4 培养基的配制 | 第21页 |
2.1.5 核酸电泳液的配制 | 第21页 |
2.1.6 仪器设备 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-25页 |
2.2.1 细胞复苏 | 第22页 |
2.2.2 细胞传代与培养 | 第22页 |
2.2.3 病毒的扩增 | 第22页 |
2.2.4 病毒感染 | 第22-23页 |
2.2.5 RNA提取与反转录 | 第23-24页 |
2.2.6 qPCR复证高通量测序结果 | 第24页 |
2.2.7 PCR扩增及序列测定 | 第24-25页 |
2.2.8 生物信息学比对与分析 | 第25页 |
2.3 结果 | 第25-33页 |
2.3.1 数据分析 | 第25页 |
2.3.2 qPCR复证结果 | 第25-26页 |
2.3.3 PCR扩征结果 | 第26-28页 |
2.3.4 生物信息学比对与分析 | 第28-33页 |
2.4 讨论 | 第33-35页 |
2.5 小结 | 第35-36页 |
三、鸡锌锌指蛋白chZC3HAV1、chZC3H6和chZEB1抗病毒功能的初步鉴定 | 第36-49页 |
3.1 实验材料 | 第36-37页 |
3.1.1 细胞、病毒、表达载体 | 第36-37页 |
3.1.2 试剂及仪器 | 第37页 |
3.1.3 SDS-PAGE电泳液的配制 | 第37页 |
3.2 实验方法 | 第37-41页 |
3.2.1 原代细胞CEF的制备与感染 | 第37-38页 |
3.2.2 淋巴细胞的制备 | 第38页 |
3.2.3 病毒感染 | 第38页 |
3.2.4 真核表达载体的构建 | 第38-39页 |
3.2.5 真核表达 | 第39页 |
3.2.6 锌指蛋白的组织分布 | 第39-40页 |
3.2.7 抗病毒功能的研究 | 第40-41页 |
3.3 结果 | 第41-46页 |
3.3.1 真核表达载体的构建 | 第41页 |
3.3.2 真核表达 | 第41-42页 |
3.3.3 锌指蛋白在鸡组织中的差异表达 | 第42-43页 |
3.3.4 病毒感染CEF或淋巴细胞后锌指蛋白表达量的变化 | 第43-44页 |
3.3.5 锌指蛋白在病毒感染中的作用 | 第44-46页 |
3.4 讨论 | 第46-48页 |
3.5 小结 | 第48-49页 |
四、chZC3HAV1抑制病毒增殖的机制研究 | 第49-59页 |
4.1 实验材料 | 第49页 |
4.1.1 毒株、菌种、细胞 | 第49页 |
4.1.2 试剂及仪器 | 第49页 |
4.2 实验方法 | 第49-51页 |
4.2.1 病毒感染 | 第49页 |
4.2.2 荧光定量检测细胞因子 | 第49页 |
4.2.3 鸡细胞基因组的提取 | 第49-50页 |
4.2.4 双报告基因的检测的细胞转染 | 第50-51页 |
4.3 结果 | 第51-55页 |
4.3.1 病毒感染对chZC3HAV1表达的影响 | 第51-52页 |
4.3.2 过表达chZC3HAV1对AIV增殖的影响 | 第52页 |
4.3.3 细胞因子的检测 | 第52-53页 |
4.3.4 双荧光素酶报告基因的检测 | 第53-55页 |
4.4 讨论 | 第55-58页 |
4.5 小结 | 第58-59页 |
五、结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
研究生期间发表论文情况 | 第67页 |