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一氧化氮对肥城桃果实线粒体腺嘌呤核苷酸转位酶的调控机理

符号说明第4-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-12页
1 引言第13-22页
    1.1 腺嘌呤核苷酸转位酶第13-17页
        1.1.1 线粒体与细胞凋亡第13-14页
        1.1.2 线粒体通透性转换孔道和腺嘌呤核苷酸转位酶的结构与功能第14-16页
        1.1.3 ANT的研究前景第16-17页
    1.2 一氧化氮与植物线粒体的生理代谢第17-21页
        1.2.1 线粒体的抗氧化系统第17-18页
        1.2.2 丙二醛第18-19页
        1.2.3 N-乙酰-L-半胱氨酸第19页
        1.2.4 一氧化氮第19-21页
    1.3 研究内容及意义第21-22页
2 材料与方法第22-44页
    2.1 实验材料第22-23页
        2.1.1 仪器与试剂第22-23页
        2.1.2 实验材料第23页
        2.1.3 质粒与菌种第23页
    2.2 实验方法第23-44页
        2.2.1 线粒体腺嘌呤转位酶(ANT)全长cDNA的克隆第23-31页
        2.2.2 体外表达ANT蛋白第31-36页
        2.2.3 ANT与PiC蛋白质的相互作用第36-38页
        2.2.4 NO与ANT蛋白的作用第38页
        2.2.5 NO对ANT基因表达量的影响第38-39页
        2.2.6 NO处理对桃果实线粒体功能的影响第39-44页
3 结果与分析第44-67页
    3.1 线粒体腺嘌呤转位酶(ANT)全长cDNA的克隆第44-46页
        3.1.1 提取桃果实总RNA第44页
        3.1.2 兼并引物的PCR第44页
        3.1.3 RACE第44-46页
    3.2 ANT全序列分析第46-51页
        3.2.1 ANT序列的开放阅读框分析第46-48页
        3.2.2 ANT基因序列比对分析第48页
        3.2.3 ANT蛋白结构的模拟预测第48-51页
    3.3 ANT蛋白体外表达、纯化与复性第51-55页
        3.3.1 ANT表达载体的构建第51-53页
        3.3.2 ANT蛋白的表达、纯化与复性第53-55页
    3.4 ANT与PiC蛋白质的相互作用第55-56页
        3.4.1 构建酵母载体第55页
        3.4.2 ANT与PiC蛋白质相互检验第55-56页
    3.5 NO与ANT的相互作用第56-59页
        3.5.1 NO与ANT相互作用的荧光光谱第56-57页
        3.5.2 NO对ANT蛋白溶液的荧光猝灭作用第57-59页
    3.6 NO对ANT基因表达量的影响第59-60页
    3.7 NO处理对桃果实线粒体功能的影响第60-67页
        3.7.1 线粒体中ROS含量的测定第60-61页
        3.7.2 线粒体中SOD活性的检测第61-62页
        3.7.3 线粒体中POD活性的检测第62-63页
        3.7.4 线粒体中CAT活性的检测第63页
        3.7.5 线粒体内MDA含量的检测第63-64页
        3.7.6 线粒体膜电势的测定第64-65页
        3.7.7 线粒体呼吸的测定第65页
        3.7.8 NAC对线粒体各生理指标的影响第65-67页
4 讨论第67-71页
    4.1 ANT基因序列的克隆与蛋白序列的分析第67页
    4.2 ANT蛋白的表达、纯化与复性第67-68页
    4.3 NO与ANT蛋白的相互作用第68页
    4.4 NO对ANT表达量的影响第68-69页
    4.5 ANT蛋白与PiC蛋白的相互作用第69页
    4.6 NO对桃果实线粒体功能的影响第69-71页
5 结论第71-72页
创新之处第72-73页
参考文献第73-86页
致谢第86-87页
硕士期间论文发表情况第87页

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