| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 线粒体通透性转换孔与线粒体磷酸盐载体 | 第11-15页 |
| 1.1.1 线粒体与细胞凋亡 | 第11页 |
| 1.1.2 线粒体通透性转换孔 | 第11-13页 |
| 1.1.3 线粒体通透性转换与细胞凋亡 | 第13页 |
| 1.1.4 线粒体磷酸盐载体 | 第13-15页 |
| 1.2 NO与MPTP | 第15-16页 |
| 1.2.1 NO与植物代谢 | 第15页 |
| 1.2.2 NO调控线粒体功能 | 第15-16页 |
| 1.3 人工磷脂双分子层膜 | 第16-17页 |
| 1.3.1 磷脂囊泡的性质、结构与应用 | 第16页 |
| 1.3.2 磷脂囊泡的制备 | 第16-17页 |
| 1.4 蛋白质间相互作用及酵母菌双杂交技术 | 第17-19页 |
| 1.4.1 蛋白质相互作用及检测方法 | 第17-18页 |
| 1.4.2 酵母双杂交技术的基本原理 | 第18页 |
| 1.4.3 酵母双杂交技术的应用 | 第18-19页 |
| 1.5 研究内容及意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 仪器与试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.2 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.3 实验菌株及质粒 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-36页 |
| 2.2.1 线粒体磷酸盐载体（PiC）cDNA全长的克隆及生物学分析 | 第21-28页 |
| 2.2.2 体外重组PiC蛋白 | 第28-31页 |
| 2.2.3 一氧化氮对PiC基因表达及蛋白质结构的影响 | 第31-33页 |
| 2.2.4 人工磷脂双分子膜模拟MPTP功能 | 第33页 |
| 2.2.5 PiC与CypD蛋白质相互作用的研究 | 第33-35页 |
| 2.2.6 数据处理 | 第35-36页 |
| 3.结果与分析 | 第36-52页 |
| 3.1 线粒体磷酸盐载体（PiC）全长cDNA的克隆 | 第36-38页 |
| 3.1.1 桃果实总RNA的提取及完整性 | 第36页 |
| 3.1.2 PiC中间片段的克隆 | 第36页 |
| 3.1.3 RACE及基因全长的获得 | 第36-38页 |
| 3.2 PiC序列分析 | 第38-43页 |
| 3.2.1 PiC序列开放阅读框分析 | 第38-40页 |
| 3.2.2 PiC生物学分析 | 第40-43页 |
| 3.3 PiC重组蛋白体外表达与纯化 | 第43-45页 |
| 3.3.1 PiC克隆载体的构建 | 第43-45页 |
| 3.3.2 PiC蛋白的表达 | 第45页 |
| 3.4 一氧化氮对PiC基因表达及蛋白质结构的影响 | 第45-48页 |
| 3.4.1 NO对PiC基因表达量的影响 | 第45-46页 |
| 3.4.2 NO与PiC蛋白的荧光猝灭作用 | 第46-47页 |
| 3.4.3 SPR检测PiC蛋白巯基亚硝基化 | 第47-48页 |
| 3.5 重组磷脂双分子膜模拟MPTP功能 | 第48-49页 |
| 3.6 酵母菌双杂交法检测PiC与CypD蛋白质相互作用 | 第49-52页 |
| 3.6.1 重组酵母载体的构建和酶切鉴定 | 第49-50页 |
| 3.6.2 重组酵母质粒转化酵母感受态及互作检验 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-55页 |
| 4.1 桃果实PiC基因的克隆及生物学分析 | 第52页 |
| 4.2 PiC重组蛋白的表达、纯化和复性 | 第52-53页 |
| 4.3 NO对PiC基因表达及蛋白的影响 | 第53页 |
| 4.4 人工磷脂双分子层体外模拟MPTP | 第53-54页 |
| 4.5 PiC蛋白与CypD的相互作用 | 第54-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 6 创新之处 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 硕士期间论文发表情况 | 第69页 |
