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鸡MTNR1A基因启动子克隆及活性分析

符号说明第4-7页
中文摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
1 引言第11-21页
    1.1 启动子及其研究方法第11-13页
        1.1.1 启动子概述第11页
        1.1.2 启动子构成第11-12页
        1.1.3 启动子活性检测和功能分析第12-13页
    1.2 褪黑激素及受体的研究进展第13-17页
        1.2.1 褪黑激素的发现、结构及分布第13-14页
        1.2.2 褪黑激素的合成及对生殖的调控第14-15页
        1.2.3 褪黑激素受体的发现及分类第15-16页
        1.2.4 褪黑激素受体 1A的结构与功能第16-17页
    1.3 褪黑激素受体 1A基因的研究进展第17-20页
        1.3.1 褪黑激素受体 1A基因的结构第17页
        1.3.2 褪黑激素受体 1A基因的表达第17页
        1.3.3 褪黑激素受体 1A基因SNP研究及检测方法第17-19页
        1.3.4 褪黑激素受体 1A基因在卵巢中的研究第19-20页
    1.4 目的与意义第20-21页
2 材料与方法第21-34页
    2.1 试验材料第21-23页
        2.1.1 试验动物和样品采集第21页
        2.1.2 主要仪器设备第21页
        2.1.3 主要试剂及来源第21-22页
        2.1.4 主要数据库和分析软件第22页
        2.1.5 常用试剂的配制第22-23页
    2.2 试验方法第23-34页
        2.2.1 鸡血液基因组DNA提取第23-24页
        2.2.2 MTNR1A 5’调控区启动功能分析第24-32页
            2.2.2.1 启动子预测及启动子区缺失片段PCR扩增第24-26页
            2.2.2.2 PCR产物检测及纯化回收第26-27页
            2.2.2.4 连接产物转化感受态细胞第27-28页
            2.2.2.5 菌液阳性鉴定及质粒DNA提取第28-29页
            2.2.2.6 重组质粒的酶切鉴定及测序第29页
            2.2.2.7 无内毒素质粒大提第29-30页
            2.2.2.8 提取质粒浓度及质量检测第30页
            2.2.2.9 鸡卵泡外膜细胞的分离培养第30-31页
            2.2.2.10 质粒DNA转染试验第31-32页
            2.2.2.11 双荧光素酶活性测定第32页
        2.2.3 MTNR1A基因 5’调控区SNPs检测第32-33页
            2.2.3.1 MTNR1A基因 5’调控区引物设计第32-33页
            2.2.3.2 MTNR1A基因 5’调控区SNPs检测第33页
        2.2.4 数据统计分析第33-34页
3 试验结果与分析第34-43页
    3.1 MTNR1A启动子区启动活性检测结果与分析第34-41页
        3.1.1 调控区域转录因子结合位点的预测第34-35页
        3.1.2 启动子不同长度片段的PCR扩增第35-36页
        3.1.3 启动子区片段报告基因分析载体的构建及检测第36-37页
        3.1.4 鸡MTNR1A基因启动子区片段荧光素酶活性检测结果第37-39页
        3.1.5 鸡MTNR1A基因启动子的生物信息学分析第39-41页
    3.2 海兰褐壳蛋鸡MTNR1A基因 5’调控区SNPS检测及分析第41-43页
        3.2.1 海兰褐壳蛋鸡MTNR1A基因 5’调控区SNPs检测结果第41-42页
        3.2.2 SNPs位点的TFSEARCH分析第42页
        3.2.3 MTNR1A基因 5’调控区SNPs位点群体遗传学分析第42-43页
4 讨论第43-46页
    4.1 鸡MTNR1A启动子区启动功能分析第43-44页
    4.2 鸡MTNR1A 5’调控区SNPS研究第44-46页
5 结论第46-47页
参考文献第47-56页
致谢第56页

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