符号说明 | 第4-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
1 引言 | 第11-21页 |
1.1 启动子及其研究方法 | 第11-13页 |
1.1.1 启动子概述 | 第11页 |
1.1.2 启动子构成 | 第11-12页 |
1.1.3 启动子活性检测和功能分析 | 第12-13页 |
1.2 褪黑激素及受体的研究进展 | 第13-17页 |
1.2.1 褪黑激素的发现、结构及分布 | 第13-14页 |
1.2.2 褪黑激素的合成及对生殖的调控 | 第14-15页 |
1.2.3 褪黑激素受体的发现及分类 | 第15-16页 |
1.2.4 褪黑激素受体 1A的结构与功能 | 第16-17页 |
1.3 褪黑激素受体 1A基因的研究进展 | 第17-20页 |
1.3.1 褪黑激素受体 1A基因的结构 | 第17页 |
1.3.2 褪黑激素受体 1A基因的表达 | 第17页 |
1.3.3 褪黑激素受体 1A基因SNP研究及检测方法 | 第17-19页 |
1.3.4 褪黑激素受体 1A基因在卵巢中的研究 | 第19-20页 |
1.4 目的与意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-34页 |
2.1 试验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 试验动物和样品采集 | 第21页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第21页 |
2.1.3 主要试剂及来源 | 第21-22页 |
2.1.4 主要数据库和分析软件 | 第22页 |
2.1.5 常用试剂的配制 | 第22-23页 |
2.2 试验方法 | 第23-34页 |
2.2.1 鸡血液基因组DNA提取 | 第23-24页 |
2.2.2 MTNR1A 5’调控区启动功能分析 | 第24-32页 |
2.2.2.1 启动子预测及启动子区缺失片段PCR扩增 | 第24-26页 |
2.2.2.2 PCR产物检测及纯化回收 | 第26-27页 |
2.2.2.4 连接产物转化感受态细胞 | 第27-28页 |
2.2.2.5 菌液阳性鉴定及质粒DNA提取 | 第28-29页 |
2.2.2.6 重组质粒的酶切鉴定及测序 | 第29页 |
2.2.2.7 无内毒素质粒大提 | 第29-30页 |
2.2.2.8 提取质粒浓度及质量检测 | 第30页 |
2.2.2.9 鸡卵泡外膜细胞的分离培养 | 第30-31页 |
2.2.2.10 质粒DNA转染试验 | 第31-32页 |
2.2.2.11 双荧光素酶活性测定 | 第32页 |
2.2.3 MTNR1A基因 5’调控区SNPs检测 | 第32-33页 |
2.2.3.1 MTNR1A基因 5’调控区引物设计 | 第32-33页 |
2.2.3.2 MTNR1A基因 5’调控区SNPs检测 | 第33页 |
2.2.4 数据统计分析 | 第33-34页 |
3 试验结果与分析 | 第34-43页 |
3.1 MTNR1A启动子区启动活性检测结果与分析 | 第34-41页 |
3.1.1 调控区域转录因子结合位点的预测 | 第34-35页 |
3.1.2 启动子不同长度片段的PCR扩增 | 第35-36页 |
3.1.3 启动子区片段报告基因分析载体的构建及检测 | 第36-37页 |
3.1.4 鸡MTNR1A基因启动子区片段荧光素酶活性检测结果 | 第37-39页 |
3.1.5 鸡MTNR1A基因启动子的生物信息学分析 | 第39-41页 |
3.2 海兰褐壳蛋鸡MTNR1A基因 5’调控区SNPS检测及分析 | 第41-43页 |
3.2.1 海兰褐壳蛋鸡MTNR1A基因 5’调控区SNPs检测结果 | 第41-42页 |
3.2.2 SNPs位点的TFSEARCH分析 | 第42页 |
3.2.3 MTNR1A基因 5’调控区SNPs位点群体遗传学分析 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-46页 |
4.1 鸡MTNR1A启动子区启动功能分析 | 第43-44页 |
4.2 鸡MTNR1A 5’调控区SNPS研究 | 第44-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-56页 |
致谢 | 第56页 |