摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3页 |
1 绪论 | 第6-20页 |
1.1 花的结构及花发育 | 第6-11页 |
1.1.1 花药发育 | 第7-11页 |
1.2 植物信号分子——乙烯 | 第11-17页 |
1.2.1 乙烯的生物合成 | 第11-12页 |
1.2.2 乙烯的合成调控 | 第12-13页 |
1.2.3 乙烯信号传导 | 第13-17页 |
1.3 乙烯对植株育性的影响 | 第17-20页 |
1.3.1 乙烯在性别分化中的作用 | 第18页 |
1.3.2 乙烯促进胚珠发育 | 第18-19页 |
1.3.3 乙烯信号通路成员在雄蕊中大量表达 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-33页 |
2.1 材料 | 第20-21页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 菌株和质粒载体 | 第20页 |
2.1.3 主要试剂和仪器 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-31页 |
2.2.1 拟南芥种植 | 第21页 |
2.2.2 半薄切片观察 | 第21-22页 |
2.2.3 分子克隆与构建 | 第22-26页 |
2.2.4 拟南芥转化 | 第26页 |
2.2.5 拟南芥转基因植株的筛选 | 第26-27页 |
2.2.6 RNA的抽提及反转录 | 第27页 |
2.2.7 定量PCR分析 | 第27-28页 |
2.2.8 原位杂交 | 第28-29页 |
2.2.9 GUS染色 | 第29-30页 |
2.2.10 凝胶迁移实验(EMSA) | 第30-31页 |
2.3 实验引物列表 | 第31-33页 |
第一部分:乙烯调控拟南芥雄蕊发育的机制研究 | 第33-50页 |
3 实验结果 | 第33-46页 |
3.1 对野生型拟南芥体外施加乙烯影响植株育性 | 第33-36页 |
3.1.1 体外施加乙烯后拟南芥植株表型分析 | 第33-34页 |
3.1.2 体外施加乙烯后拟南芥雄蕊表型分析 | 第34-36页 |
3.2 对ein3 eil1体外施加乙烯不影响植株育性 | 第36-37页 |
3.3 etr1-7 ers1-2 雄蕊表型分析 | 第37-38页 |
3.4 EIN3的RNA水平定位 | 第38-39页 |
3.5 乙烯处理影响花药基因的表达 | 第39-43页 |
3.5.1 乙烯处理影响绒毡层功能维持 | 第39-40页 |
3.5.2 乙烯处理影响花丝伸长基因表达 | 第40-41页 |
3.5.3 乙烯处理影响核酸酶基因表达 | 第41-42页 |
3.5.4 乙烯处理前后ERFs基因及SAGs表达变化 | 第42-43页 |
3.6 候选基因BFN1、DPD1及TDF1的功能验证 | 第43-46页 |
3.6.1 EIN3可以在体内及体外直接结合TDF1 | 第43页 |
3.6.2 乙烯处理诱导花药及花丝中BFN1的蛋白积累 | 第43-44页 |
3.6.3 can1 can2乙烯处理结果 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-50页 |
4.1 体外施加乙烯影响拟南芥雄蕊发育 | 第46-47页 |
4.2 体外施加乙烯通过EIN2/EIN3途径影响雄蕊发育 | 第47-48页 |
4.3 乙烯处理影响花器官发育基因 | 第48-50页 |
第二部分:细胞周期因子E2FA,B和C调控拟南芥雌雄配子体发育的研究 | 第50-54页 |
5 E2FA,B和C调控雌雄配子体发育 | 第50-53页 |
5.1 E2FA,B和C调控雄配子体发育 | 第50-51页 |
5.2 E2FA,B和C调控雌配子体发育 | 第51-52页 |
5.3 E2FC的蛋白定位 | 第52-53页 |
6 讨论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |