| 符号说明 | 第6-12页 |
| 中文摘要 | 第12-15页 |
| Abstract | 第15-17页 |
| 1 前言 | 第18-33页 |
| 1.1 布拉酵母菌概述 | 第18-22页 |
| 1.1.1 布拉酵母菌与酿酒酵母 | 第18-19页 |
| 1.1.2 布拉酵母菌的作用 | 第19-21页 |
| 1.1.3 布拉酵母菌的临床应用 | 第21-22页 |
| 1.2 其它益生菌对溃疡性结肠炎作用 | 第22-24页 |
| 1.2.1 诱导缓解作用 | 第22-23页 |
| 1.2.2 维持缓解作用 | 第23-24页 |
| 1.3 益生菌在溃疡性结肠炎中的使用指导 | 第24页 |
| 1.4 酵母 β-葡聚糖 | 第24-26页 |
| 1.4.1 酵母 β-葡聚糖 | 第24页 |
| 1.4.2 β-葡聚糖益生作用 | 第24-26页 |
| 1.5 酵母 β-葡聚糖含量变化酵母突变株的构建 | 第26页 |
| 1.6 益生菌的安全性评价 | 第26-29页 |
| 1.6.1 益生菌的分类 | 第27页 |
| 1.6.2 致病性 | 第27-28页 |
| 1.6.3 抗生素的抗性 | 第28页 |
| 1.6.4 毒性试验 | 第28页 |
| 1.6.5 临床研究和流行病学调查 | 第28-29页 |
| 1.7 DSS肠炎模型概述 | 第29-30页 |
| 1.8 调节性T细胞 | 第30-31页 |
| 1.8.1 调节性T细胞概述 | 第30页 |
| 1.8.2 调节性T细胞表面标志 | 第30页 |
| 1.8.3 调节性T细胞作用机制 | 第30-31页 |
| 1.8.4 调节性T细胞对肠炎的作用 | 第31页 |
| 1.9 研究意义 | 第31-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-52页 |
| 2.1 试验材料 | 第33-36页 |
| 2.1.1 试验菌株与载体 | 第33页 |
| 2.1.2 试验动物 | 第33页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第33页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第33-34页 |
| 2.1.5 试剂的配制 | 第34-36页 |
| 2.2 试验方法 | 第36-52页 |
| 2.2.1 试验设计 | 第36-37页 |
| 2.2.2 引物设计与合成 | 第37-38页 |
| 2.2.3 基因敲除试验设计 | 第38-39页 |
| 2.2.4 PZC1质粒的提取 | 第39页 |
| 2.2.5 布拉酵母菌基因组DNA的提取 | 第39页 |
| 2.2.6 VRP1基因缺失株的筛选 | 第39-40页 |
| 2.2.7 布拉酵母菌及其变异株生长速度测定 | 第40-41页 |
| 2.2.8 布拉酵母菌及其变异株细胞壁敏感性测定 | 第41页 |
| 2.2.9 布拉酵母菌及其变异株体外对人工胃酸和胆盐的耐受性 | 第41-42页 |
| 2.2.10 布拉酵母菌及其变异株的电镜观察 | 第42-43页 |
| 2.2.11 布拉酵母菌及其变异株小鼠体内滞留试验 | 第43-44页 |
| 2.2.12 布拉酵母菌变异株安全性评价 | 第44-46页 |
| 2.2.13 DSS急性结肠炎动物模型的建立 | 第46-48页 |
| 2.2.14 布拉酵母菌及其突变株对DSS结肠炎预防作用 | 第48-51页 |
| 2.2.15 数据处理 | 第51-52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-109页 |
| 3.1 布拉酵母菌VRP1基因缺失株的构建 | 第52-57页 |
| 3.1.1 第一个等位基因的敲除 | 第52-55页 |
| 3.1.2 删除筛选标记 | 第55页 |
| 3.1.3 第二个VRP1等位基因的敲除 | 第55-57页 |
| 3.2 布拉酵母菌及其变异株表型分析 | 第57-65页 |
| 3.2.1 布拉酵母菌及其变异株生长速度 | 第57页 |
| 3.2.2 布拉酵母菌及其变异株细胞壁敏感性 | 第57-58页 |
| 3.2.3 布拉酵母菌及其变异株体外对人工胃酸耐受性 | 第58-59页 |
| 3.2.4 布拉酵母菌及其变异株体外对人工胆盐耐受性 | 第59-61页 |
| 3.2.5 布拉酵母菌及其变异株细胞形态和细胞壁结构 | 第61-63页 |
| 3.2.6 布拉酵母菌及其变异株小鼠体内滞留时间 | 第63-65页 |
| 3.3 布拉酵母菌变异株安全性评价 | 第65-74页 |
| 3.3.1 急性毒性试验 | 第65-68页 |
| 3.3.2 慢性重复性毒性试验 | 第68-74页 |
| 3.4 DSS急性结肠炎动物模型建立 | 第74-88页 |
| 3.4.1 小鼠的临床观察 | 第74页 |
| 3.4.2 DSS对小鼠体重的影响 | 第74-76页 |
| 3.4.3 DSS对小鼠疾病活动指数的影响 | 第76-81页 |
| 3.4.4 DSS对小鼠机体和脏器的影响 | 第81-84页 |
| 3.4.5 DSS对小鼠结肠病理组织学的影响 | 第84-85页 |
| 3.4.6 DSS对小鼠死亡率的影响 | 第85页 |
| 3.4.7 DSS对小鼠血常规指标的影响 | 第85-87页 |
| 3.4.8 DSS对小鼠血生化指标的影响 | 第87-88页 |
| 3.5 布拉酵母菌及其突变株对DSS结肠炎预防作用 | 第88-109页 |
| 3.5.1 布拉酵母菌及其变异株对小鼠疾病活动指数的影响 | 第88-92页 |
| 3.5.2 布拉酵母菌及其变异株对小鼠结肠病理组织的影响 | 第92-94页 |
| 3.5.3 布拉酵母菌及其变异株对小鼠结肠和脾脏的影响 | 第94-96页 |
| 3.5.4 布拉酵母菌及其变异株对小鼠饮食的影响 | 第96页 |
| 3.5.5 布拉酵母菌及其变异株对小鼠结肠MPO的影响 | 第96-97页 |
| 3.5.6 布拉酵母菌及其变异株对小鼠肠道屏障和炎症因子相关基因表达的影响 | 第97-98页 |
| 3.5.7 布拉酵母菌及其变异株对外周血IgA、IgE和IgG及结肠SIgA的影响 | 第98-99页 |
| 3.5.8 布拉酵母菌及其变异株对小鼠脾脏和肠系膜淋巴结免疫细胞的影响 | 第99-109页 |
| 4 讨论 | 第109-115页 |
| 4.1 布拉酵母菌VRP1基因缺失突变株构建 | 第109-110页 |
| 4.2 布拉酵母菌及其变异株预防DSS肠炎的作用 | 第110-111页 |
| 4.3 布拉酵母菌及其变异株益生机制 | 第111-115页 |
| 4.3.1 布拉酵母菌及其突变株的益生性生物表型 | 第111-112页 |
| 4.3.2 布拉酵母菌及其突变株能加强肠壁黏膜屏障作用 | 第112-113页 |
| 4.3.3 布拉酵母菌及其突变株对炎症因子调节作用 | 第113-114页 |
| 4.3.4 布拉酵母菌及其突变株免疫调节作用 | 第114-115页 |
| 5 结论 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-135页 |
| 致谢 | 第135-137页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第137页 |
