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转Bt基因水稻根际微生物的遗传多样性分析

致谢第1-9页
目录第9-12页
摘要第12-14页
Abstract第14-18页
第一章 文献综述第18-30页
   ·转基因作物外源基因及其表达产物进入土壤中的途径第18-19页
   ·外源基因与土壤微生物的作用第19-20页
     ·土壤中DNA的固定第19页
     ·土壤中DNA的持留第19-20页
     ·外源基因的水平转移第20页
   ·外源基因表达产物的降解和持留第20-21页
   ·转基因植物对土壤微生物多样性的影响第21-23页
     ·转基因植物对土壤微生物数量、结构、功能的影响第21-22页
     ·转基因植物对土壤微生物遗传多样性的影响第22-23页
   ·分析土壤微生物多样性的方法第23-29页
     ·ARDRA技术第25-26页
     ·16S rDNA的RFLP和T-RFLP分析方法第26-27页
     ·AFLP技术第27页
     ·RAPD技术第27-28页
     ·DGGE技术第28页
     ·宏基因组克隆技术第28-29页
   ·本研究立题依据和主要内容第29-30页
第二章 土壤微生物遗传多样性研究新方法的创建第30-56页
   ·材料与方法第32-38页
     ·试验材料第32-33页
       ·根际土样第32-33页
       ·植物材料第33页
       ·质粒第33页
     ·方法第33-38页
       ·土壤微生物总DNA的提取第33-34页
       ·SRAP扩增与检测第34页
       ·SRAP电泳结果的数据统计与处理第34-35页
       ·芹菜CEL Ⅰ酶的提取第35页
       ·CEL Ⅰ粗提物中的蛋白含量测定第35-36页
       ·PCR扩增第36-37页
       ·杂合DNA双链的形成第37页
       ·CEL Ⅰ粗提物酶切条件的优化与切割产物的检测第37页
       ·自建方法与试剂盒SurveyorTM检测点突变效果的比较第37-38页
   ·结果与分析第38-51页
     ·可用于土壤微生物遗传多样性分析的SRAP技术的建立第38-46页
       ·SRAP-PCR体系的建立和引物的筛选第38-39页
       ·SRAP标记多态性第39-41页
       ·不同植物根际土壤微生物的遗传多样性第41-44页
       ·品种、种植地点和发育时期对根际土壤微生物遗传多样性的影响第44-45页
       ·聚类分析第45-46页
     ·可用于土壤微生物特定基因多样性分析的Eco-TILLING技术的建立第46-51页
       ·CEL Ⅰ粗提物的酶活性鉴定第46页
       ·CEL Ⅰ粗提物用量对切割效果的影响第46-47页
       ·缓冲液及其pH值对CEL Ⅰ粗提物切割效果的影响第47-48页
       ·Zn~(2+)浓度的影响第48-49页
       ·酶切反应时间的影响第49页
       ·自建方法与试剂盒检测点突变效果的比较第49-50页
       ·16S rDNA片段扩增第50页
       ·水稻根际土壤微生物16S rDNA片段的CEL Ⅰ酶切第50-51页
   ·讨论第51-56页
第三章 SRAP标记研究转基因水稻根际土壤微生物的遗传多样性第56-63页
   ·材料与方法第56-57页
     ·试验材料第56-57页
     ·方法第57页
   ·结果与分析第57-61页
     ·两个转基因水稻品种间根际土壤微生物遗传多样性差异比较第57-59页
     ·转基因水稻与对照间根际土壤微生物的遗传多样性差异比较第59-60页
     ·聚类分析第60-61页
   ·讨论第61-63页
第四章 Eco-TILLING技术研究转基因水稻对土壤微生物遗传多样性影响第63-71页
   ·材料与方法第63-65页
     ·试验材料第63-64页
     ·方法第64-65页
   ·结果与分析第65-70页
     ·16S rDNA片段扩增第65页
     ·Eco-TILLING分析转基因水稻根际土壤微生物16S rDNA基因多样性第65-70页
   ·讨论第70-71页
参考文献第71-78页
个人简历第78页

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