| 摘要 | 第7-8页 |
| 文献综述 | 第8-14页 |
| 1 Myomaker基因的研究进展 | 第8-10页 |
| 1.1 Myomaker基因的发现和功能 | 第8页 |
| 1.2 Myomaker基因的结构 | 第8-9页 |
| 1.3 Myomaker基因表达调控的相关研究 | 第9-10页 |
| 2 真核生物基因的转录调控模式 | 第10-11页 |
| 2.1 顺式作用元件 | 第10-11页 |
| 2.2 反式作用因子 | 第11页 |
| 3 糖皮质激素对肌肉相关基因转录和表达调控的影响 | 第11-14页 |
| 本课题的立项依据及研究意义 | 第14-15页 |
| 试验一 绵羊Myomaker基因5'调控区的克隆及其序列分析 | 第15-26页 |
| 1.1 材料与方法 | 第15-19页 |
| 1.1.1 动物材料、菌株和质粒载体 | 第15页 |
| 1.1.2 分子试验生化试剂 | 第15页 |
| 1.1.3 引物设计及其序列分析软件和公司 | 第15页 |
| 1.1.4 主要试验仪器 | 第15页 |
| 1.1.5 主要试剂及缓冲液的配制 | 第15-16页 |
| 1.1.6 基本试验方法 | 第16-19页 |
| 1.2 结果与分析 | 第19-23页 |
| 1.2.1 绵羊Myomaker基因5'调控区(1585bp)的克隆 | 第19-20页 |
| 1.2.2 载体pT-MyomakerPro~W(1585bp)的酶切及测序鉴定 | 第20-23页 |
| 1.3 讨论 | 第23-26页 |
| 1.3.1 关于聚合酶链式反应(PCR) | 第23-24页 |
| 1.3.2 绵羊Myomaker基因5'调控区一些重要调控元件的作用 | 第24-26页 |
| 试验二 野生型和(n)GRE突变型绵羊MyomakerPro-EGFP真核表达载体的构建 | 第26-34页 |
| 2.1 材料与方法 | 第26-31页 |
| 2.1.1 试验菌株、质粒载体 | 第26页 |
| 2.1.2 分子和细胞试验生化试剂 | 第26页 |
| 2.1.3 引物设计及其序列分析软件和公司 | 第26页 |
| 2.1.4 主要仪器与设备 | 第26页 |
| 2.1.5 主要试剂及缓冲液的配制 | 第26页 |
| 2.1.6 基本试验方法 | 第26-31页 |
| 2.2 结果与分析 | 第31-33页 |
| 2.2.1 野生型Myomaker基因5调控区-报告基因表达载体MyomakerPro~W-EGFP的构建 | 第31页 |
| 2.2.2 (n)GRE元件突变型Myomaker基因5'调控区-报告基因表达载体MyomakerPro~(XM)-EGFP的构建 | 第31-33页 |
| 2.3 讨论 | 第33-34页 |
| 2.3.1 关于表达载体的选择 | 第33页 |
| 2.3.2 关于表达载体的构建 | 第33页 |
| 2.3.3 关于基因突变方法的选择 | 第33-34页 |
| 试验三 地塞米松对绵羊Myomaker基因5'调控区转录调控活性的影响 | 第34-55页 |
| 3.1 材料与方法 | 第34-40页 |
| 3.1.1 质粒载体、细胞和动物材料 | 第34页 |
| 3.1.2 分子和细胞试验生化试剂 | 第34页 |
| 3.1.3 主要仪器与设备 | 第34-35页 |
| 3.1.4 主要试剂及缓冲液的配制 | 第35页 |
| 3.1.5 试验方法 | 第35-40页 |
| 3.2 结果与分析 | 第40-53页 |
| 3.2.1 绵羊Myomaker 5'调控区在C2C12细胞中的转录调控活性 | 第40-41页 |
| 3.2.2 转染C2C12细胞后RNA提取结果 | 第41-42页 |
| 3.2.3 EGFP与GAPDH基因扩增动力学和溶解曲线 | 第42页 |
| 3.2.4 地塞米松对绵羊Myomaker5'调控区转录调控活性的影响 | 第42-49页 |
| 3.2.5 (n)GRE元件突变对Myomaker 5'调控区转录调控活性的影响 | 第49-51页 |
| 3.2.6 组织水平(n)GRE元件及相应因子的EMSA鉴定结果 | 第51-52页 |
| 3.2.7 Dex及其受体抑制剂对细胞核蛋白与(n)GRE元件结合的影响 | 第52-53页 |
| 3.3 讨论 | 第53-55页 |
| 3.3.1 肌肉细胞生长和分化状态对绵羊Myomaker基因转录的影响 | 第53页 |
| 3.3.2 糖皮质激素和(n)GRE元件对绵羊Myomaker基因转录调控的影响 | 第53-55页 |
| 全文结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| Abstract | 第61-62页 |
| 附录 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
