摘要 | 第8-9页 |
前言 | 第9-11页 |
文献综述 | 第11-21页 |
1 黑色素的研究进展 | 第11-16页 |
1.1 黑色素与角化细胞的关系 | 第11页 |
1.2 黑色素合成场所黑色素小体 | 第11-12页 |
1.3 黑色素的生物学特性 | 第12页 |
1.4 黑色素细胞的培养 | 第12-13页 |
1.5 黑色素的合成、运输 | 第13-14页 |
1.5.1 黑色素的合成 | 第13-14页 |
1.5.2 黑色素的运输 | 第14页 |
1.6 TYR、TYRP2、MITF对黑色素合成的调节作用 | 第14-16页 |
1.6.1 TYR参与黑色素合成的分子机制 | 第14-15页 |
1.6.2 TYRP2分子结构特点对黑色素合成的影响 | 第15页 |
1.6.3 MITF对黑色素合成的调节 | 第15-16页 |
2 TGFβ对黑色素细胞合成黑色素影响的研究进展 | 第16-19页 |
2.1 TGFβ的生物学特性 | 第16-17页 |
2.1.1 TGFβ的发现 | 第16-17页 |
2.1.2 TGFβ对黑色素合成的影响 | 第17页 |
2.2 TGFβ三个亚型的生物学特性和对黑色素合成的影响 | 第17-19页 |
2.2.1 TGFβ1的生物学功能 | 第17-18页 |
2.2.2 TGFβ2对细胞生殖的影响 | 第18-19页 |
2.2.3 TGFβ3分子结构特点与对生理功能研究的进展 | 第19页 |
3 本试验研究的意义和解决的问题 | 第19-21页 |
材料和方法 | 第21-33页 |
1 羊驼黑色素细胞的体外培养 | 第21-22页 |
1.1 仪器 | 第21页 |
1.2 试剂 | 第21页 |
1.3 羊驼黑色素细胞的复苏 | 第21页 |
1.4 羊驼黑色素细胞的传代培养 | 第21-22页 |
1.5 羊驼黑色素细胞的冻存 | 第22页 |
2 TGFβ3的添加试验、细胞增殖试验、黑色素含量测定试验 | 第22-24页 |
2.1 材料 | 第22页 |
2.2 仪器 | 第22页 |
2.3 试剂 | 第22页 |
2.4 方法 | 第22-24页 |
2.4.1 TGFβ3的添加试验 | 第22-23页 |
2.4.2 细胞增殖试验 | 第23页 |
2.4.3 羊驼黑色素含量测定试验 | 第23-24页 |
3 RT-PCR检测 | 第24-28页 |
3.1 细胞总RNA的提取 | 第24-26页 |
3.1.1 材料 | 第24页 |
3.1.2 仪器 | 第24页 |
3.1.3 试剂与耗材 | 第24-25页 |
3.1.4 方法 | 第25-26页 |
3.2 总RNA纯度测定 | 第26页 |
3.3 总RNA的反转录即cDNA的合成 | 第26页 |
3.4 PCR引物的设计 | 第26-27页 |
3.5 RT-PCR反应体系的建立及优化 | 第27-28页 |
3.6 数据处理分析 | 第28页 |
4 羊驼黑色素细胞蛋白免疫印迹试验 | 第28-33页 |
4.1 材料 | 第28页 |
4.2 仪器 | 第28-29页 |
4.3 试剂与耗材 | 第29-31页 |
4.4 方法 | 第31-32页 |
4.4.1 羊驼黑色素细胞总蛋白的提取 | 第31页 |
4.4.2 SDS-PAGE电泳 | 第31-32页 |
4.4.3 转膜、抗体孵育和曝光 | 第32页 |
4.5 数据处理分析 | 第32-33页 |
结果与分析 | 第33-39页 |
1 TGFβ3对羊驼黑素细胞形态的影响 | 第33-34页 |
2 TGFβ3对羊驼黑素细胞增殖的影响 | 第34页 |
3 TGFβ3对羊驼黑素细胞MITF、TYR、TYRP2基因定量结果 | 第34-36页 |
3.1 羊驼黑素细胞RNA质量鉴定 | 第34-35页 |
3.2 TGFβ3对羊驼黑素细胞MITF、TYR、TYRP2基因表达变化量的影响 | 第35-36页 |
4 TGFβ3对羊驼黑素细胞MITF、TYR、TYRP2蛋白表达变化量的影响 | 第36-38页 |
5 TGFβ3对羊驼黑素细胞内黑色素产量的影响 | 第38-39页 |
讨论 | 第39-41页 |
1 TGFβ3和黑色素生成相关基因的关系 | 第39-40页 |
2 TGFβ3对黑素细胞形态学的影响 | 第40-41页 |
全文结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-48页 |
Abstract | 第48页 |
致谢 | 第50页 |