| 中文摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 常用缩略词表 | 第8-12页 |
| 文献综述 | 第12-21页 |
| 1 病原学 | 第12-17页 |
| 1.1 猪萨佩罗病毒的分类 | 第12-13页 |
| 1.2 猪萨佩罗病毒粒子的结构特征 | 第13页 |
| 1.3 猪萨佩罗病毒的基因组结构特征及复制 | 第13-14页 |
| 1.4 病毒的理化特性和培养特性 | 第14-15页 |
| 1.5 猪萨佩罗病毒的结构蛋白和非结构蛋白及其功能 | 第15-17页 |
| 2 PSV感染的临诊症状及病理变化 | 第17-18页 |
| 2.1 临诊症状 | 第17页 |
| 2.2 病理变化 | 第17-18页 |
| 3 PSV流行病学 | 第18-19页 |
| 4 猪萨佩罗病毒的检测 | 第19-21页 |
| 4.1 病毒的分离与鉴定 | 第19-20页 |
| 4.2 分子生物学方法 | 第20页 |
| 4.3 免疫学方法 | 第20-21页 |
| 5 防制 | 第21页 |
| 研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 第一章 猪萨佩罗病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用 | 第23-45页 |
| 1 试验材料 | 第23-25页 |
| 1.1 毒株 | 第23-24页 |
| 1.2 临床样品的收集 | 第24页 |
| 1.3 主要试剂与仪器 | 第24页 |
| 1.4 溶液配制 | 第24-25页 |
| 2 试验方法 | 第25-33页 |
| 2.1 荧光定量RT-PCR引物的设计及合成 | 第25页 |
| 2.2 重组质粒标准品的制备 | 第25-31页 |
| 2.3 实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 | 第31-32页 |
| 2.4 实时荧光定量RT-PCR检测方法的应用 | 第32-33页 |
| 3 结果 | 第33-41页 |
| 3.1 质粒标准品的鉴定 | 第33页 |
| 3.2 重组质粒浓度的测定 | 第33-34页 |
| 3.3 优化的Real-time RT-PCR检测条件 | 第34页 |
| 3.4 Real-time RT-PCR标准曲线的制作 | 第34页 |
| 3.5 溶解曲线与特异性试验结果 | 第34-35页 |
| 3.6 敏感性试验结果 | 第35-36页 |
| 3.7 重复性试验结果 | 第36-37页 |
| 3.8 实时荧光定量RT-PCR与常规PCR比较结果 | 第37-39页 |
| 3.9 PSV感染组织特异性研究结果 | 第39页 |
| 3.10 PSV感染情况调查 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| 4.1 PSV Real-time RT-PCR检测方法的建立 | 第41-42页 |
| 4.2 PSV感染组织特异性的初步研究 | 第42-43页 |
| 4.3 腹泻猪群中PSV感染情况调查 | 第43-44页 |
| 5 小结 | 第44-45页 |
| 第二章 四川省2014-2015年PSV 1B基因遗传进化分析 | 第45-56页 |
| 1 试验材料 | 第45-46页 |
| 1.1 PSV阳性样品 | 第45页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第45-46页 |
| 1.3 分析软件 | 第46页 |
| 2 试验方法 | 第46-48页 |
| 2.1 引物设计 | 第46页 |
| 2.3 1B基因的扩增,克隆及测序 | 第46-47页 |
| 2.4 遗传进化分析 | 第47-48页 |
| 3 结果 | 第48-53页 |
| 3.3 PSV 1B全基因扩增 | 第48-49页 |
| 3.4 猪萨罗病毒1B基因测序结果 | 第49页 |
| 3.5 1B基因核苷酸序列及推导的氨基酸同源性分析 | 第49-50页 |
| 3.6 1B基因遗传进化树的建立 | 第50-51页 |
| 3.7 基因突变位点分析 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 5 小结 | 第55-56页 |
| 全文结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
