| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1.1 作物抗旱机理的研究进展 | 第13-18页 |
| 1.1.1 作物响应干旱的形态变化 | 第13页 |
| 1.1.2 作物响应干旱的生理生化反应 | 第13-16页 |
| 1.1.3 作物抗旱的分子机制 | 第16-18页 |
| 1.2 LEA蛋白的研究进展 | 第18-22页 |
| 1.2.1 LEA蛋白的分类及结构特征 | 第18-20页 |
| 1.2.2 LEA蛋白的表达及亚细胞定位 | 第20页 |
| 1.2.3 LEA蛋白的结构特点 | 第20-21页 |
| 1.2.4 LEA蛋白的功能 | 第21-22页 |
| 1.2.5 LEA蛋白与植物的抗逆性 | 第22页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 小麦LEA3族Ta Dlea3基因和LEA3同源性高TaWSI18基因克隆 | 第24-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 菌种和载体 | 第24页 |
| 2.1.3 试剂 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-26页 |
| 2.2.1 小麦幼苗培养 | 第24-25页 |
| 2.2.2 小麦TaDlea3和TaWSI18基因的克隆 | 第25-26页 |
| 2.2.3 小麦TaDlea3和TaWSI18基因的生物信息学分析 | 第26页 |
| 2.3 结果分析 | 第26-32页 |
| 2.3.1 小麦TaDlea3基因的克隆 | 第26-27页 |
| 2.3.2 小麦TaWSI18基因的克隆 | 第27页 |
| 2.3.3 小麦TaDlea3蛋白的特性分析 | 第27-28页 |
| 2.3.4 小麦TaWSI18蛋白特性分析 | 第28-30页 |
| 2.3.5 小麦TaDlea3和TaWSI18蛋白质亚细胞定位及跨膜结构域的预测分析 | 第30页 |
| 2.3.6 小麦TaDlea3蛋白序列比对及聚类分析 | 第30-31页 |
| 2.3.7 小麦TaWSI18蛋白序列比对及聚类分析 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 Ta Dlea3蛋白的原核表达及抗体制备 | 第34-41页 |
| 3.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 3.1.1 菌株和载体 | 第34页 |
| 3.1.2 试剂 | 第34-35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-37页 |
| 3.2.1 构建原核表达载体pET28a-TaDlea3 | 第35页 |
| 3.2.2 TaDlea3蛋白的表达 | 第35-36页 |
| 3.2.3 TaDlea3蛋白的纯化 | 第36页 |
| 3.2.4 Western blot检测多克隆抗体特异性 | 第36-37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-40页 |
| 3.3.1 小麦TaDlea3基因原核表达载体构建 | 第37-38页 |
| 3.3.2 原核TaDlea3的表达与纯化 | 第38-39页 |
| 3.3.3 多克隆抗体的特异性检测 | 第39-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-41页 |
| 第四章 小麦TaDlea3蛋白的亚细胞定位、酶的保护作用和非生物胁迫处理的表达特征 | 第41-51页 |
| 4.1 材料与方法 | 第41-44页 |
| 4.1.1 小麦TaDlea3蛋白的亚细胞定位 | 第41-42页 |
| 4.1.2 小麦TaDlea3蛋白对乳酸脱氢酶的保护作用 | 第42-43页 |
| 4.1.3 不同逆境下小麦TaDlea3基因的表达分析 | 第43-44页 |
| 4.2 结果与分析 | 第44-49页 |
| 4.2.1 小麦TaDlea3蛋白的亚细胞定位载体构建 | 第44-45页 |
| 4.2.2 小麦TaDlea3蛋白的亚细胞定位 | 第45页 |
| 4.2.3 低温胁迫下TaDlea3蛋白对乳酸脱氢酶的保护 | 第45-46页 |
| 4.2.4 高温胁迫下TaDlea3蛋白对LDH的保护 | 第46页 |
| 4.2.5 小麦的RNA提取和cDNA反转录 | 第46-47页 |
| 4.2.6 逆境胁迫下小麦陕合6号TaDlea3基因的表达 | 第47-48页 |
| 4.2.7 逆境胁迫下小麦郑引1号TaDlea3基因的表达 | 第48-49页 |
| 4.3 讨论 | 第49-51页 |
| 4.3.1 小麦TaDlea3蛋白的亚细胞定位 | 第49页 |
| 4.3.2 小麦TaDlea3蛋白对LDH的保护作用 | 第49-50页 |
| 4.3.3 小麦TaDlea3基因对不同逆境的响应 | 第50-51页 |
| 第五章 小麦TaDlea3基因转化拟南芥及功能分析 | 第51-60页 |
| 5.1 实验材料 | 第51-52页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第51页 |
| 5.1.2 菌株和载体 | 第51页 |
| 5.1.3 试剂 | 第51-52页 |
| 5.2 实验方法 | 第52-53页 |
| 5.2.1 拟南芥的培养 | 第52页 |
| 5.2.2 转基因载体构建 | 第52页 |
| 5.2.3 农杆菌介导法转化拟南芥 | 第52页 |
| 5.2.4 转基因拟南芥的鉴定 | 第52-53页 |
| 5.2.5 转基因拟南芥的耐旱分析 | 第53页 |
| 5.3 结果与分析 | 第53-59页 |
| 5.3.1 转基因的载体构建 | 第53-55页 |
| 5.3.2 转基因拟南芥DNA水平鉴定 | 第55页 |
| 5.3.3 转基因拟南芥半定量PCR检测 | 第55-56页 |
| 5.3.4 转基因拟南芥蛋白水平鉴定 | 第56页 |
| 5.3.5 干旱处理下拟南芥表型分析 | 第56-58页 |
| 5.3.6 干旱处理下拟南芥的生理生化指标的变化 | 第58-59页 |
| 5.4 讨论 | 第59-60页 |
| 第六章 TaDlea3基因在小麦生长不同生育期的表达规律 | 第60-83页 |
| 6.1 实验材料 | 第60页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第60页 |
| 6.1.2 主要试剂 | 第60页 |
| 6.2 实验方法 | 第60-62页 |
| 6.2.1 小麦栽培 | 第60页 |
| 6.2.2 小麦干旱胁迫处理 | 第60-61页 |
| 6.2.3 干旱胁迫下Ta Dlea3基因的表达分析 | 第61页 |
| 6.2.4 干旱胁迫下TaDlea3蛋白的表达分析 | 第61页 |
| 6.2.5 干旱胁迫下生理指标测定 | 第61-62页 |
| 6.2.6 数据统计分析 | 第62页 |
| 6.3 结果与分析 | 第62-81页 |
| 6.3.1 干旱胁迫条件下小麦的生理变化 | 第62-70页 |
| 6.3.2 干旱胁迫对小麦TaDlea3基因表达量分析 | 第70-72页 |
| 6.3.3 干旱胁迫对小麦TaDlea3蛋白表达量分析 | 第72-81页 |
| 6.3.4 干旱胁迫对小麦产量的影响 | 第81页 |
| 6.4 讨论 | 第81-83页 |
| 第七章 全文总结 | 第83-85页 |
| 7.1 结论 | 第83-84页 |
| 7.2 本研究的创新点 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-94页 |
| 缩略词表 | 第94-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 作者简介 | 第97页 |
