| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-21页 |
| ·概述 | 第12页 |
| ·纤维素酶的组成及其降解机制 | 第12-13页 |
| ·纤维素酶的组成 | 第12-13页 |
| ·纤维素酶的降解机制 | 第13页 |
| ·分泌纤维素酶的丝状真菌 | 第13-14页 |
| ·纤维素酶的表达调控 | 第14-17页 |
| ·丝状真菌转录水平调控 | 第14-15页 |
| ·XlnR | 第14页 |
| ·ACEⅠ,ACEⅡ | 第14-15页 |
| ·CRE | 第15页 |
| ·丝状真菌蛋白质分泌 | 第15-17页 |
| ·丝状真菌蛋白质分泌过程 | 第15页 |
| ·液泡蛋白分选受体蛋白VPS | 第15-17页 |
| ·丝状真菌转化系统 | 第17-19页 |
| ·丝状真菌转化方法 | 第17-18页 |
| ·CaCl_2-PEG介导的遗传转化方法 | 第17页 |
| ·电激介导的遗传转化方法 | 第17页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化方法 | 第17-18页 |
| ·选择性标记基因 | 第18-19页 |
| ·营养缺陷型标记基因 | 第18页 |
| ·药物抗性标记基因 | 第18页 |
| ·碳源、氮源、硫源等营养基因 | 第18-19页 |
| ·异源表达纤维素酶系统 | 第19-21页 |
| ·酵母异源表达系统 | 第19页 |
| ·细菌异源表达系统 | 第19-20页 |
| ·丝状真菌异源表达系统 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-33页 |
| ·实验材料 | 第21-25页 |
| ·实验菌种 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·主要仪器及设备 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·培养条件 | 第23页 |
| ·主要试剂的配制 | 第23-25页 |
| ·实验方法 | 第25-33页 |
| ·Double-joint PCR | 第25-26页 |
| ·原生质体制备与转化 | 第26-27页 |
| ·原生质体制备 | 第26页 |
| ·原生质体转化 | 第26-27页 |
| ·T载体连接与转化 | 第27页 |
| ·质粒的提取 | 第27-28页 |
| ·染色体的提取 | 第28-29页 |
| ·小量提取染色体 | 第28页 |
| ·大量提取染色体 | 第28-29页 |
| ·△vps：：pyrG敲除盒的构建 | 第29-30页 |
| ·表达质粒pbgl-hph的构建 | 第30-31页 |
| ·Southern blotting | 第31页 |
| ·酶活力方法测定 | 第31-32页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第32页 |
| ·生物量测定 | 第32页 |
| ·pH值测定 | 第32页 |
| ·表型分析 | 第32页 |
| ·核苷酸序列号 | 第32-33页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第33-51页 |
| ·斜卧青霉ΔVPS::PTRA突变株的筛选 | 第33-36页 |
| ·斜卧青霉vps10基因鉴定 | 第33页 |
| ·斜卧青霉△vps::ptrA敲除盒的构建 | 第33-34页 |
| ·制备并转化斜卧青霉114-2原生质体 | 第34-35页 |
| ·△vps::ptrA转化子验证 | 第35-36页 |
| ·小结 | 第36页 |
| ·斜卧青霉△vPs::PYRG突变株的筛选 | 第36-41页 |
| ·带有重复序列的△vps::pyrG敲除盒的构建 | 第36-38页 |
| ·△vps::pyrG转化子筛选 | 第38-39页 |
| ·△vps::pyrG转化子验证 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| ·△vPS::PRYG转化子异源表达瑞氏木霉中的B-葡萄糖苷酶 | 第41-43页 |
| ·表达质粒pbgl-hph的构建 | 第41-42页 |
| ·△vps::ptrA突变株和斜卧青霉114-2原生质体转化质粒pbgl-hph | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43页 |
| ·转录调控因子BGLR对产纤维素酶的影响 | 第43-51页 |
| ·bg1R基因序列分析 | 第43-44页 |
| ·△bg1R:：ptrA敲除盒的构建 | 第44-45页 |
| ·Southern blotting验证 | 第45-46页 |
| ·斜卧青霉△bg1R:：ptrA突变株的表型分析 | 第46页 |
| ·酶活力的变化 | 第46-48页 |
| ·蛋白含量的变化 | 第48页 |
| ·生物量的变化 | 第48页 |
| ·pH值的变化 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-51页 |
| 第四章 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附录 标准曲线 | 第59-60页 |