摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第1章 引言 | 第13-29页 |
·Hnrnpk基因的研究进展 | 第13-19页 |
·Hnrnpk的发现 | 第13页 |
·Hnrnpk的结构 | 第13-15页 |
·Hnrnpk的表达与调控 | 第15-16页 |
·Hnrnpk的功能 | 第16-19页 |
·c-Src基因的研究进展 | 第19-21页 |
·c-Src的介绍 | 第19页 |
·c-Src的结构 | 第19-20页 |
·c-Src的功能 | 第20-21页 |
·蛋白质相互作用研究进展 | 第21-27页 |
·免疫共沉淀技术 | 第21-22页 |
·酵母双杂交技术 | 第22-23页 |
·GST pull-down技术 | 第23页 |
·双分子荧光互补技术 | 第23-24页 |
·荧光共振能量转移技术 | 第24-25页 |
·串联亲和纯化技术 | 第25-26页 |
·蛋白质芯片技术 | 第26页 |
·Far-western blotting技术 | 第26页 |
·噬菌体展示技术 | 第26-27页 |
·本研究的目的与意义 | 第27-29页 |
第2章 Hnrnpk与c-Src基因功能的初步研究 | 第29-55页 |
·材料 | 第29-32页 |
·实验动物和细胞 | 第29页 |
·质粒和菌株 | 第29页 |
·主要仪器设备 | 第29页 |
·主要试剂 | 第29-30页 |
·主要缓冲液配方 | 第30-32页 |
·方法 | 第32-37页 |
·实验用品的清洗与消毒 | 第32页 |
·C2C12细胞的复苏、培养及冻存 | 第32-34页 |
·组织蛋白样品的制备 | 第34页 |
·蛋白质的定量 | 第34页 |
·总RNA的提取 | 第34页 |
·cDNA的制备 | 第34-35页 |
·引物设计及合成 | 第35页 |
·荧光定量PCR体系、程序及结果分析 | 第35页 |
·PCR扩增及检测 | 第35-36页 |
·重组质粒的构建及鉴定 | 第36页 |
·细胞转染 | 第36-37页 |
·统计分析 | 第37页 |
·结果与分析 | 第37-52页 |
·Hnrnpk基因的克隆及时空表达分析 | 第37-41页 |
·c-Src基因的克隆及时空表达分析 | 第41-45页 |
·Hnrnpk对C2C12细胞增殖分化的影响 | 第45-49页 |
·c-Src对C2C12细胞增殖分化的影响 | 第49-52页 |
·讨论 | 第52-55页 |
·Hnrnpk基因的克隆及时空表达分析 | 第52页 |
·c-Src基因的克隆及时空表达分析 | 第52-53页 |
·Hnrnpk对C2C12细胞增殖分化的影响 | 第53-54页 |
·c-Src对C2C12细胞增殖分化的影响 | 第54-55页 |
第3章 Hnrnpk与c-Src互作分析 | 第55-74页 |
·材料 | 第55-58页 |
·质粒和菌株 | 第55页 |
·动物材料和细胞 | 第55页 |
·主要分子生物学试剂 | 第55页 |
·主要试剂的配制 | 第55-57页 |
·主要仪器设备 | 第57-58页 |
·方法 | 第58-65页 |
·总RNA的提取 | 第58页 |
·cDNA的制备 | 第58页 |
·引物设计与合成 | 第58页 |
·PCR扩增及检测 | 第58页 |
·Co-IP分析 | 第58-59页 |
·GST pull-down分析 | 第59-61页 |
·酵母双杂交分析 | 第61-63页 |
·RIP分析 | 第63-65页 |
·统计分析 | 第65页 |
·结果与分析 | 第65-71页 |
·Hnrnpk与c-Src蛋白质互作预测及Co-IP验证 | 第65-66页 |
·Hnrnpk与c-Src蛋白的体外相互作用 | 第66-68页 |
·Hnrnpk与c-Src蛋白在酵母中的相互作用 | 第68-69页 |
·Hnrnpk基因在C2C12成肌细胞分化中的表达 | 第69-70页 |
·RIP分析C2C12成肌细胞中Hnrnpk与c-Src mRNA的互作 | 第70-71页 |
·讨论 | 第71-74页 |
·Hnrnpk与c-Src的互作 | 第71-72页 |
·Hnrnpk与c-Src mRNA的互作 | 第72页 |
·Hnrnpk与c-Src在成肌细胞增殖分化中的可能作用机制 | 第72-74页 |
第4章 总结 | 第74-76页 |
·主要研究结果 | 第74-75页 |
·主要创新点与特色 | 第75页 |
·本研究的不足之处 | 第75页 |
·值得进一步研究的相关问题 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-88页 |
攻读学位期间获得与学位论文相关的科研成果目录 | 第88-89页 |
附录 | 第89-94页 |