猪传染性胃肠炎病毒RT-LAMP检测方法的建立及初步应用
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-21页 |
| ·猪传染性胃肠炎（TGE）概述 | 第10-11页 |
| ·TGEV粒子结构 | 第10-11页 |
| ·TGEV的易感细胞系 | 第11页 |
| ·TGEV实验室传统诊断方法 | 第11-14页 |
| ·TGEV主要结构蛋白以及目的基因的选择 | 第11-12页 |
| ·病毒分离和鉴定 | 第12-13页 |
| ·电子显微镜检测 | 第13页 |
| ·免疫组化技术 | 第13页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第13-14页 |
| ·核酸探针 | 第14页 |
| ·病毒中和试验 | 第14页 |
| ·RT-PCR方法 | 第14页 |
| ·逆转录-环介导等温扩增（RT-LAMP） | 第14-20页 |
| ·RT-LAMP引物设计原理 | 第15-16页 |
| ·RT-LAMP的扩增过程 | 第16-17页 |
| ·RT-LAMP的特点 | 第17-18页 |
| ·RT-LAMP存在的问题 | 第18页 |
| ·RT-LAMP的应用 | 第18-20页 |
| ·实验目的与意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-25页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·病毒与细胞 | 第21页 |
| ·临床样本 | 第21页 |
| ·仪器与设备 | 第21页 |
| ·试验药品及试剂 | 第21-22页 |
| ·试验试剂配方 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-25页 |
| ·ST细胞的传代及TGEV在细胞上的增值培养 | 第22-23页 |
| ·引物设计 | 第23页 |
| ·病毒核酸的提取 | 第23页 |
| ·RT-LAMP法检测反应体系以及条件的优化 | 第23-24页 |
| ·RT-LAMP与RT-PCR敏感性的比较 | 第24页 |
| ·RT-LAMP检测TGEV特异性评价 | 第24页 |
| ·临床样本检测 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-33页 |
| ·TGEV RT-LAMP检测方法的建立 | 第25-26页 |
| ·TGEV RT-LAMP最佳反应条件的确定 | 第26-27页 |
| ·反应温度的优化 | 第26页 |
| ·反应时间的优化 | 第26-27页 |
| ·TGEV的RT-LAMP检测灵敏度 | 第27-29页 |
| ·TGEV的RT-LAMP检测特异性分析 | 第29-30页 |
| ·临床腹泻粪便样本的检测 | 第30-33页 |
| ·临床腹泻粪便样本的ELISA检测 | 第30页 |
| ·临床样本的RT-PCR检测 | 第30-31页 |
| ·临床样本的RT-LAMP检测 | 第31-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 5 结论 | 第35-36页 |
| 致谢 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第41页 |
