| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 上篇 文献综述 | 第8-17页 |
| 1 香蕉与香蕉枯萎病菌 | 第8-14页 |
| ·香蕉简介 | 第8页 |
| ·香蕉枯萎病的发生及危害 | 第8-9页 |
| ·香蕉枯萎病菌致病机理相关研究 | 第9-12页 |
| ·致病性相关基因的克隆和及其对致病性的影响 | 第9-11页 |
| ·香蕉病菌的侵染过程 | 第11页 |
| ·毒素成分的作用机制 | 第11-12页 |
| ·香蕉抗枯萎病机制 | 第12页 |
| ·香蕉枯萎病的防治进展 | 第12-13页 |
| ·香蕉枯萎病菌基因研究的策略 | 第13-14页 |
| ·香蕉枯萎病致病相关基因的研究思路 | 第13页 |
| ·绿色荧光蛋白(GFP)及在尖孢镰刀菌致病相关基因研究中的应用 | 第13-14页 |
| 2 关于1ncRNA的概况 | 第14-15页 |
| 3 选题意义及目标 | 第15-16页 |
| 4 本研究的技术路线 | 第16-17页 |
| 下篇 研究内容 | 第17-41页 |
| 1 材料与方法 | 第17-29页 |
| ·材料 | 第17-19页 |
| ·供试菌株 | 第17页 |
| ·培养基 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-29页 |
| ·突变体Focr4-1453的获得 | 第19页 |
| ·样品基因组总DNA的提取 | 第19-20页 |
| ·Southern blots检测插入片段拷贝数 | 第20-23页 |
| ·Focr4-1453插入位点侧翼序列的克隆 | 第23-24页 |
| ·突变基因的定位 | 第24页 |
| ·RT-PCR验证基因表达 | 第24-25页 |
| ·Focr4-1453突变基因的cDNA克隆 | 第25-26页 |
| ·Focr4-1453突变基因敲除载体的构建 | 第26页 |
| ·Focr4-1453突变基因互补亚细胞定位载体的构建 | 第26-27页 |
| ·香蕉枯萎病菌原生质的体制备、转化和筛选 | 第27-28页 |
| ·突变体菌株落形态观察 | 第28页 |
| ·温度、碳源、pH对各突变体菌株菌落生长的影响 | 第28页 |
| ·各突变菌株显微观察及产孢量、孢子萌发率测定 | 第28-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-38页 |
| ·T-DNA插入突变体Focr4-1453致病性验证结果 | 第29-30页 |
| ·T-DNA插入突变体Focr4-1453活体叶片致病性测定结果 | 第29页 |
| ·香蕉苗根部致病性测定结果 | 第29-30页 |
| ·Southern blots实验分析结果 | 第30页 |
| ·T-DNA插入突变体菌株Focr4-1453插入位点侧翼序列的克隆 | 第30页 |
| ·插入失活基因的定位及cDNA全长的克隆 | 第30-32页 |
| ·突变体插入失活基因敲除载体的构建和敲除子的筛选 | 第32-33页 |
| ·突变体失活基因互补载体构建及互补子的筛选 | 第33页 |
| ·敲除突变体和互补转化菌株菌落形态观察结果 | 第33-34页 |
| ·野生型菌株与所得各突变体菌株玻璃纸穿透实验测定结果 | 第34页 |
| ·T-DNA插入突变体菌丝、孢子形态观察及其敲除子产孢量的测定 | 第34-35页 |
| ·温度、碳源、pH对插入突变体及其敲除子菌落生长状况的影响 | 第35-38页 |
| 3 讨论 | 第38-39页 |
| ·关于所得基因的分析 | 第38页 |
| ·GFP基因转化香蕉枯萎病菌 | 第38-39页 |
| ·突变基因对尖孢镰刀菌表型的影响 | 第39页 |
| ·尖孢镰孢菌致病相关的酶及毒素的检测 | 第39页 |
| 4 问题与展望 | 第39-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 附录 | 第41-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
